病毒学因素对ALT持续正常的e抗原阴性慢性乙型肝炎病毒感染者肝脏组织学改变的影响

Objective To investigate the correlation between viral factors and liver histological changes of HBeAg-negative chronic hepatitis B patients with persistently normal serum ALT levels (PNAL). Methods HBV DNA level, HBV genotype, basal core promoter (BCP) and precore mutation were exam- ined in 52 HBeAg-negative chronic hepatitis B patients with PNAL (defined as normal ALT measured on at least 3 occasions in the intervals of about two months over a period of 12 months or more prior to the biopsy). Viral factors influencing histological changes of HBeAg-negative chronic hepatitis B patients with per-Results Subjects with both BCP and precore mutations had significantly higher HBV DNA levels than those without mutations [(4.9±1.4) vs (4.1±1.1) log10copies/ml, t = 2.308, P < 0.05]. A higher proportion of patients with histological activity index (HA1)≥ 4 was found in patients with both mutations (32.1% vs 16.7%) than in patients without mutation, however, the proportion of patients with histological activity index (HAl)≥ 3 in patients with mutations was not significantly different from that in patients without mutations (14.3% vs. 12.5%, χ2 = 0.000, P > 0.05). In patients without precore or BCP mutations, there was a strong positive correlation between viral load and liver inflammation as well as fibrosis (precore: r = 0.626, 0.592, P < 0.01; BCP: r = 0.730, 0.641, P < 0.01). In patients without both mutations, HBV DNA has shown a high accuracy for predecting fibrosis (F≥3) (AUC = 0.905, 95% CI: 0.771±1.039, P < 0.05) with the cutoff value of 4.5 log10copies/ml (sensitivity = 1.000, specificity = 0.778, PPV = 42.9%, NPV = 100.0%). Results of both genotypes and mutations were successfully obtained in 40 samples with HBV DNA≥ 104 copies/ml. The higher viral load was observed in the patients with genotype B than genotype C (5.1 vs 4.3 Iog,0copies/ml, t = 2.059, P < 0.05), but no difference was seen of liver pathologic changes between these two genotypes. Conclusions Virus harboring both BCP and precore mutants has the higher replication level than wild type virus. 32.1% and 14.3% of the patients with both mutations have moderate or severe inflammation and fibrosis. There was a strong positive correlation between viral load and liver histological changes in patients without precore or BCP mutations, and viral load shows a high accuracy for predecting sig-nificant fibrosis (F ≥ 3).     

CD11c+髓样树突状细胞在慢性乙型肝炎中频数与细胞表型的变化

目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血中CD11c 髓样树突状细胞(mDC)相对数量和细胞表型的变化,以及与HBV持续感染之间的关系.方法:2007-03/2007-10瑞金医院感染科住院及门诊慢性乙型肝炎患者28例,另设健康对照组21例(均为本院职工).流式细胞分析技术检测受试者外周血mDC的百分比数.磁珠分选方法分离纯化mDC.流式细胞仪检测mDC表面共刺激分子CD80和CD86.结果:与健康对照组相比,慢性乙肝患者CD11c mDC占外周血单个核细胞的频数明显降低,差异有统计学意义(0.38%±0.61%vs0.77%±0.56%,P<0.05).慢性乙肝患者外周血mDc频数与血清ALT水平、病毒载量呈负相关(r=0.374,-0.435,均P<0.05),患者组不同肝脏炎症程度mDC频数存在差异.新鲜分离的mDc表面共刺激分子cD80和cD86表达较低,但患者组CD86的表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义(45.26%±21.54%vs18.71%±10.93%,P<0.05).结论:慢性乙型肝炎患者外周血CDllc mDC亚群百分比降低,但mDc表面共刺激分子表达率并未严重受损,外周血中CD11c mDc数量减少可能与血清病毒载量及肝脏炎症程度相关.     

丙氨酸转氨酶持续正常的HBeAg阴性慢性乙型肝炎病毒感染者肝脏组织学改变及其影响因素

目的 分析ALT持续正常的HBeAg阴性慢性HBV感染者的肝脏组织学改变及其影响因素.方法 选择2003年10月至2008年3月经皮肝组织活检的ALT持续正常的HBeAg阴性慢性HBV感染者98例,检测其ALT水平、HBV标志物、HBV DNA水平和肝脏组织学改变.均数比较采用t检验和单因素方差分析,非参数统计采用Mann-Whitney U检验和Kruskal-Wallis检验.采用Logistic模型进行独立危险因素分析,采用受试者工作特征曲线评价ALT水平对显著肝脏病理改变的诊断价值.结果 98例患者中炎症活动指数(Hal)≥4、纤维化(F)评分≥3的患者分别占22.4%与17.3%.ALT为(0.51～1.00)×正常值上限(ULN)组发生上述病理改变的比例均高于(0～0.50)×ULN组(HAI≥4:36.4%比11.1%,χ2=8.881,P=0.003;F评分≥3:27.3%比9.3%,χ2=5.487,P=0.019).年龄每增长10岁是HAI≥4分的独立危险因素(OR=2.410,P=0.023);年龄>45岁者发生HAI≥4分的比例明显高于≤45岁者(33.3%比13.4%,χ2=4.923,P=0.027).HBV DNA＜1×104拷贝/mL时,仍有14.9%的患者Hal≥4分、12.8%的患者F评分≥3分.结论 部分ALT持续正常的HBeAg阴性慢性HBV感染者在不同HBV DNA水平存在一定程度的肝脏病理改变,肝组织活检对于年龄＞45岁的患者是十分重要的.0.50×ULN有望为中国HBeAg阴性的慢性HBV感染者的临床处理提供一个恰当的ALT"正常"参考值.     

联合聚乙二醇干扰素-α对恩替卡韦经治HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的疗效和预测因素

目的探讨恩替卡韦(ETV)治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者获得病毒学应答后,加用聚乙二醇干扰素(Peg-IFNα)的疗效和预测因素。方法 HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者经过ETV治疗6个月以上获得病毒学应答者84例,分成继续ETV单药治疗组45例和ETV基础上加用Peg-IFNα联合治疗组39例,分别继续治疗24~48周。检测基线和治疗期间血清HBV DNA载量、HBV血清学标志物、肝功能指标。以HBsAg下降幅度和HBsAg≤150 IU/mL为主要疗效评价指标,以HBeAg清除和HBeAg血清学转换为次要疗效评价指标,同时分析基线HBsAg水平对Peg-IFN疗效的影响。组间差异采用Fisher检验。结果联合治疗组治疗结束时患者HBsAg下降幅度明显大于ETV单药组(单药组为0.24 lg IU/mL,联合治疗组为0.61 lg IU/mL,P=0.0007),且HBsAg≤150 IU/mL患者的比例也明显多于单药组(单药组为11.1%,联合治疗组为30.8%,P=0.0315)。两组的HBeAg清除和HBeAg血清学转换相比较均差异无统计学意义。基线HBsAg≤1500 IU/mL的患者,在加用Peg-IFN治疗结束时HBsAg≤150 IU/mL、HBeAg清除的患者比例均明显高于基线HBsAg1500 IU/mL的患者(HBsAg≤150 IU/mL:66.7%比14.8%,P=0.0024;HBeAg清除:58.3%比22.2%,P=0.0272)。结论联合Peg-INFα对已经获得病毒学应答的ETV经治患者可以获得更高的HBsAg下降以及HBsAg≤150 IU/mL的概率,基线HBsAg≤1500 IU/mL患者加用Peg-IFN能够获得更好的免疫控制。     

干扰素治疗慢性病毒性肝炎发生甲状腺功能异常的临床特征和危险因素

目的 探讨IFN治疗慢性病毒性肝炎患者发生甲状腺功能异常的临床特征,并结合生物化学、病毒学等因素分析其危险因素.方法 选择2007年1月至2010年3月间采用IFN治疗的慢性乙型和丙型肝炎患者385例,在抗病毒治疗前2周内及治疗中每4～12周检测血常规、肝功能和病毒载量,并观察甲状腺功能的血清学指标和甲状腺自身抗体变化,治疗结束后继续随访48周.Logistic分析甲状腺功能异常发生的危险因素.结果 IFN治疗后发生甲状腺功能异常者共32例,发生率为8.3％,其中甲状腺功能亢进及减退各占一半,依次为桥本甲状腺炎10例,Graves病和破坏性甲状腺炎各8例,非自身免疫性甲状腺功能减退6例.10例甲状腺功能异常者有明显临床症状;9例进行内分泌治疗,3例停用IFN.发生甲状腺功能异常的中位时间为治疗第7个月(最早于治疗第2个月,最迟于治疗结束后7个月),甲状腺功能异常持续时间中位数为4个月(1～11个月).治疗结束后随访1年,所有患者甲状腺功能均恢复正常.女性(OR=3.656)和预存的抗甲状腺过氧化物酶抗体(OR=1.006)是发生甲状腺功能异常的独立危险因素.结论 Graves病、桥本甲状腺炎、破坏性甲状腺炎和非自身免疫性甲状腺功能减退是IFN致甲状腺功能异常的主要类型,前两者通常伴有明显症状,可能需停用IFN并予内分泌治疗.接受IFN治疗的慢性病毒性肝炎患者在治疗前、中及后均应密切监测甲状腺功能和甲状腺自身抗体,尤其是女性及有预存甲状腺自身抗体者.     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者基于聚乙二醇干扰素-α24周应答采用不同治疗方案的疗效及预测因素分析

目的通过研究HBeAg阳性慢性乙型肝炎初治患者接受聚乙二醇干扰素-α(Peg-IFN-α)24周,根据RGT策略给予不同的治疗方案,分析比较其疗效及预测因素。方法收集87例初治选用足量Peg-IFN-α的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者,24周时根据应答情况接受不同序贯单药或联合治疗,分别为a:有早期应答者继续Peg-IFN-α治疗至48周(n=20);而对于无早期应答者采用3种治疗方案,即b:继续单药Peg-IFN-α治疗至48周(n=17);c:Peg-IFN-α单药延长治疗至96周(n=25);d:在Peg-IFN-α基础上联合恩替卡韦并延长治疗至96周(n=25)。比较分析各组之间的疗效及应答的预测因素。结果治疗结束时,a组较b组,d组较c组HBsAg、HBV DNA下降均有明显增加(P值分别为0.0194、0.041以及0.0008、0.0035)。96周治疗患者(无论单药还是联合)在治疗结束时达到HBsAg≤1000 IU/mL且HBeAg(-)的患者均较b组增加(P=0.0384);治疗结束时d组较c组HBeAg下降增加,对HBeAg消失及血清学转换有一定的作用,但差异无统计学意义;基线HBsAg≥1500 IU/mL的患者,治疗结束后d组较c组DNA转阴率、以及获得HBsAg下降≥2lg IU/mL且HBV DNA转阴的患者都明显增加(P分别为0.0228和0.0237)。结论对于无早期应答患者,延长干扰素疗程并同时加用核苷类药物可以提高HBsAg及HBV DNA载量下降的幅度。基线HBsAg≥1500IU/mL的患者,仍可选择联合核苷类药物并延长的治疗方案。     

e抗原阳性慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞Toll样受体3的表达及意义

目的探讨Toll样受体3（TLR3）的表达与HBV感染后宿主免疫清除障碍的关系。方法选取轻度CHB患者50例,健康对照者48名,其外周血用免疫磁珠细胞分选法获得纯化的CD14^＋单核细胞,用RPMI 1640培养基培养,并且用人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和hIL-4诱导单核细胞成为未成熟的髓样树突状细胞（mDC）,加入聚肌胞刺激后获得成熟的mDC。分别在剌激后0、12、24、48h用流式细胞仪检测TLR3、CD86、HLA-DR和CD1a的表达,实时PCR检测TLR3的表达变化。结果健康对照组中mDC在刺激后24h,TLR3表达较0 h时上调显著（P〈0.05）,48h时TLR3的表达与0h相比差异无统计学意义（P〉0.05）;患者组在刺激后12、24h TLR3的表达与0h时相比,上调不明显,48h时TLR3的表达显著上调（P〈0.05）。实时PCR检测mDC上TLR3 mRNA结果发现,对照组TLR3 mRNA在刺激后12h的表达水平较0h显著上升（P〈0.05）,也显著高于患者组刺激后0、12、24h的表达水平;患者组刺激后48h的TLR3 mRNA表达水平较0h显著上升（P〈0.05）。与0h比较,健康对照组在刺激后12、24h和48h,CD86的表达水平显著高于患者组（P〈0.05）。患者组与对照组间CD1a和HLA-DR的表达差异无统计学意义。结论慢性HBV感染者mDC受聚肌胞刺激后TLR3表达异常,协同刺激因子CD86表达低下,可能造成宿主对HBV感染的免疫清除障碍,导致疾病慢性化。     

病毒学因素对ALT持续正常的e抗原阴性慢性乙型肝炎病毒感染者肝脏组织学改变的影响

目的 探讨ALT持续正常的HBeAg阴忡慢性HBV感染者病毒学因素与肝脏组织学改变的关系.方法 枪测52例研究对象的HBV DNA水平、基因型、基本核心启动了(BCP)与前C区变异,分析各病毒学因素对肝脏组织学改变的影响.止态分布数据两组间均数比较采用t检验,多组均数比较采用单因素方差分析;非正态分布数据比较采用Mann-Whitney I检验;两样本率的比较用χ2检验及Fisher精确概率法;HBV DNA与肝脏组织学的关系等非参数双变量相关分析采用Spearman相关系数方法;采用受试者T作特征曲线下而积评价HBV DNA水平对肝脏病理改变的诊断价值. 结果 BCP与前C区联合突变组的病毒载量高于非联合突变组[(4.9±1.4)10g10拷贝/ml比(4.1±1.1)log10拷贝/ml,t=2.308,P<0.05];联合突变组32.1%的患者HAI≥4分、14.3%的患者F≥3分.前C区或BCP野毒株的感染者中,HBV DNA与肝脏炎症呈正相关(r值分别为0.626和0.592,P值均<0.01)、与纤维化改变也呈正相关(r值分别为0.730和0.641,P值均<0.01).在尢联合突变的研究对象中,HBV DNA用于预测其F≥3分的肝脏病理改变有显著意义(受试者工作特征曲线下面积为0.905,95%可信区间为0.771～1.039,P<0.05),临界值为4.5 log10拷贝/ml(敏感度1.000,特异度0.778,阿I性预测值为42.9%,阴性预测值为100.0%).基因B型的HBV DNA高于C型[(5.1±1.5)log10拷贝/ml比(4.3±1.0)lOg10拷贝/ml],差异有统计学意义(t= 2.059,P<0.05);但两者在显著肝脏病理改变方面的差异尢统计学意义. 结论 HBV联合突变株的复制能力最强,行且部分联合突变株感染者出现显著肝组织学改变,此类患者有必要接受抗病毒治疗.在前C区或BCP变异野毒株感染者中,HBVDNA与肝脏的炎症、纤维化改变呈正相关,病毒载量用于预测这部分感染者F≥3分的肝脏病理改变有显著意义.     

慢性丙型肝炎患者治疗失败原因及其处理原则探讨

近年来国内外学者不断总结经验,探索更加有效的途径以增加持续病毒学应答(SVR)率并采取有效的补救措施"挽救"那些曾经抗病毒治疗失败的丙型肝炎患者,应答指导的治疗(response guided therapy,RGT)原则,即根据治疗过程中不同的病毒学应答实现个体化治疗,及时调整治疗方案,使更多的患者获得SVR.我们在既往RGT的基础上又引入一个新的概念—双RGT原则,在原有RGT原则上,又加强了第二个RGT原则,即原因指导的抗病毒治疗(reasonguided therapy).很多丙型肝炎患者治疗失败往往存在多种原因,不同的原因对于后续再治疗的选择非常重要,因此遵循第二个RGT原则,对提高此类患者治疗的SVR非常有必要.我们从慢性丙型肝炎患者治疗失败原因着手做一个比较深入的分析.     

非酒精性脂肪性肝病的无创性诊断方法及检测系统的研究进展

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是目前最常见的慢性肝脏疾病之一，其发病率正在快速增长，已累及约30％的成人和10％的儿童。其病变范畴包括从良性进展的脂肪肝到非酒精性脂肪性肝炎（NASH）等改变，而后者可能导致肝硬化以及其他严重的肝脏病变。目前已有的非创伤性检测方法在精确性及可靠性上仍有欠缺。因此，肝活检仍是目前公认的诊断非酒精性脂肪性肝病和早期发现肝硬化最可靠的方法。