过继免疫联合化疗治疗肺癌的临床应用

癌症的生物治疗在20世纪80年代兴起，近年来已成为传统肿瘤治疗模式(手术、化疗和放疗)之外的第4种模式。我们采用脾、胸腺淋巴细胞作为前体细胞，体外用重组淋巴因子(rIL-2)诱导产生LAK细胞，并联合化疗治疗肺癌，取得比较理想的效果。     

生存素—肿瘤免疫治疗中的新靶点

 细胞毒性T细胞(CTL)的免疫功能在机体抗肿瘤免疫中起决定作用。肿瘤抗原激活CTL及CTL杀伤肿瘤细胞的前提是CTL对肿瘤抗原的有效识别。与抗体和B细胞受体不同，CTL既不能直接识别游离抗原，也不单独识别出现于细胞表面的抗原片段，但是CTL的T细胞受体(T Cell Receptor，TCR)既能识别抗原递呈细胞(Antigen-presenting Cell，APC)又能识别靶细胞上MHC-1类分子及其所递呈的表位肽，这就是所谓的“双识别”，也是MHC限制性的基础。“双识别”产生CTL活化的第一信号，CTL与APC间CD28-B7、LFA-1-CD54、CD2-CD58等多种共刺激分子的相互结合可产生多种第二信号，从而使CTL充分活化。     

HGF 基因修饰的间充质干细胞对犬后肢缺血后股神经的保护作用简

目的观察携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒（Ad—HGF）修饰的骨髓间充质干细胞（Msc）对犬后肢缺血后神经组织病理学的影响。方法18只犬随机分为Ad—HGF—MSC处理组、模型对照组和正常对照组,每组6只。将Ad—HGF—MSC处理组和模型对照组犬麻醉后,全结扎左后肢股动脉制作犬左后肢缺血模型,体外分离、培养犬骨髓MSC,转染Ad—HGF,并将含Ad-HGF—MSC的细胞悬液对Ad—HGF—MSC处理组犬病肢行多点肌肉注射,模型对照组犬注射等量的PBS缓冲液,正常对照组不进行任何处理。90d后,取组织标本,常规组织病理切片染色,光学显微镜下观察。结果12只犬均建模成功。模型对照组犬病侧股神经至肌束间的细小神经均发生显著退行性变,累及轴突、髓鞘和施旺细胞核。而Ad—HGF—MSC处理组犬的各级神经病变不明显,部分甚至与正常对照组无差别。结论Ad—HGF—MSC局部注射可减轻或阻遏犬后肢缺血后股神经组织损伤,具有一定的神经组织保护作用。     

携带白细胞介素2和NK4双基因真核共表达质粒的构建及活性观察

目的 构建同时携带白细胞介素2（IL-2）和NK4基因的真核表达载体（pIRES-IL-2-IRES-NK4）,观察其在防治肿瘤中的潜在应用前景.方法 根据Pubmed上公布的IL-2及NK4 mRNA序列,设计扩增IL-2及NK4 cDNA的特异性引物,以PBV220-IL-2质粒和PCAGGS/hNK4质粒为模板,分别扩增IL-2及NK4基因,并将IL-2及NK4基因分别克隆在真核表达载体pIRES-SEQ的XhoI、MLuI位点和SalI、NotⅠ位点.获得同时携带IL-2和NK4基因的重组真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4.该重组质粒转染肝癌细胞HepG2后,检测目的基因的转染表达及表达产物对HepG2细胞增殖的影响.结果 通过对构建质粒克隆进行测序及酶切,证实携带IL-2和NK4双基因的真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4构建成功.用pIRES-IL-2-IRES-NK4转染HepG2细胞后24 h后在荧光显微镜下可观察到细胞有较强的绿色荧光表达,48 h时荧光更强;逆转录聚合酶链反应结果表明转染pIRES-IL-2-IRES-NK4质粒细胞的IL-2及NK4基因表达明显增强.酶联免疫吸附测定检测结果表明,转染组细胞较对照组细胞培养上清中IL-2及NK4蛋白表达水平明显增强.转染组48 h后的IL-2、NK4蛋白表达水平为2.139、1.956 mg/L,明显高于未转染组的0.492、0.620 mg/L.四甲基偶氮唑盐法结果表明转染真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4的细胞表达上清,有明显抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性,且有剂量效应关系.结论 本研究成功构建了同时携带IL-2和NK4基因的重组真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4,该质粒可有效转染肝癌细胞,且转染细胞表达上清有明显抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性,提示该重组质粒有潜在防治肿瘤的应用前景.     

胃癌患者术后端粒长度变化与预后观察

目的分析原发性胃癌组织中的端粒长度变化与患者术后预后的关系.方法以琼脂糖DNA杂交检测58例手术切除的原发性胃癌与邻近胃组织中端粒限制性内切酶片段(TRF)的长度,并观察术后患者的临床状况及生存期.结果发现原发性胃癌组织中的平均TRF长度均比相应邻近胃组织缩短.其中原发性胃癌有14例TRF缩短,5例TRF延长;且在胃癌中TRF的这种异常状态与肿瘤的大小、转移、临床病理分期及患者的生存率相一致.结论 TRF长度不仅参与了胃癌的发生与发展,而且也为胃癌的诊断及预后判断提供了一种新的手段.     

高原缺氧条件对大鼠肠黏膜组织及缺氧诱导因子-1α、诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨高原缺氧条件对大鼠肠黏膜组织形态以及缺氧诱导因子(HIF)-1α和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法将40只雄性Wistar大鼠均分为平原对照组及高原24h、48h、72h组,每组10只。平原对照组在常温环境下饲养1个月后处死,高原组在平原饲养1个月后于24h内急运至高原,建立高原缺氧模型,分别于到达高原后24、48、72h处死。分别在光镜和电镜下观察大鼠空肠上段的微观组织学变化,用图像测量软件测量绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度及绒毛表面积。免疫组化染色检测HIF-1α及iNOS在肠黏膜中的表达。结果高原24h组肠绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度及绒毛表面积分别为313.10±10.84、123.10±2.64、432.60±7.37μm和0.09±0.01mm2,与平原对照组(分别为322.00±12.68、127.70±7.24、447.50±21.93μm和0.10±0.01mm2)相比差异无统计学意义(P>0.05),高原48h组上述指标分别为279.00±9.80、101.10±7.11、376.40±19.05μm和0.06±0.01mm2高原72h组上述指标分别为235.80±19...     

双特异性抗体增强LAK细胞毒效应的实验研究

抗肿瘤单克隆抗体的高度特异性与杀伤细胞对肿瘤的细胞毒效应相互结合起来,是增强LAK细胞抗肿瘤作用的重要途径。本文用4h~(51)Cr释放细胞毒实验观察了化学连接法制备的双特异性抗体CD3-HB8759增强LAK的效应功能。实验结果表明:CD3-HB8759在诱导相可显著增强LAK细胞对LiBr黑素瘤细胞的细胞毒效应,也能使非LAK细胞获得细胞毒性,在杀伤相加入CD3-HB8759对LAK细胞的细胞毒作用也具有促进作用。表明CD3-HB8759一方面通过其CD3 McAb部分激活T淋巴细胞,促进LAK细胞毒作用;另一方面将其特异性导向黑素瘤细胞并杀伤肿瘤细胞,可能为该肿瘤的生物治疗提供一条新的途径。     

6 129例病人术前血液传播性疾病分析

目的 对6 129例病人术前血液传播性疾病分析,为预防医院感染和医疗纠纷提供依据.方法 对6 129例病人空腹血进行乙肝三系统、抗-HCV和抗-HIV 1/2的检测.结果 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)和抗-HIV阳性率分别为6.1%、2.5%和0.5%.在乙型肝炎中,大三阳和小三阳的阳性率分别为1.26%和1.66%,抗-HBs阳性率为21.41%.结论 术前血清学检测对减少院内感染,减少医疗纠纷十分必要.     

Ad—HGF转染对HepG2细胞的生长抑制作用

目的：探讨Ad—HGF转染对HepG2生长抑制作用的影响。方法：用Ad—HGF转染HepG2细胞，检测HGF蛋白表达及对细胞凋亡的影响；并用裸鼠致瘤试验体内观察Ad—HGF对HepG2细胞致癌的影响。结果：转染后24hHGF即有表达，48h达高峰。并观察到Ad—HGF可促进HepG2凋亡，体内Ad—HGF可抑制HepG2细胞生长成瘤。结论：Ad—HGF在体外可抑制HepG2细胞增殖、促进其凋亡，体内抑制其致癌作用。