Pretomanid(PA-824)治疗耐多药结核病的应用建议

耐多药结核病治疗疗程长达18~24个月、药物不良反应重、患者治疗依从性差,部分患者因耐药谱广泛,不能选择二线抗结核药物组成有效的治疗方案,导致死亡率高。因此,耐多药结核病治疗新药的研究是全球结核病控制的重要问题,也是我国改变耐多药结核病防治现状亟待解决的问题。全球结核病药物研发联盟研发的pretomanid(PA-824)与贝达喹啉和利奈唑胺组成的BPaL方案,针对严重耐多药结核病的治疗,具有疗程短、全程口服、治疗依从性高、治愈率高等优势,为严重耐多药结核病患者的治疗带来了新的希望。该方案于2020年被世界卫生组织在全球推荐使用。目前,贝达喹啉和利奈唑胺两种药品已经在我国上市,并作为二线抗结核药物用于耐多药结核病治疗。因此,亟待PA-824能早日在我国获批使用,以挽救更多耐多药结核病患者的生命。为此,中国防痨协会联合中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心组织全国结核病防治、临床和基础研究等领域的专家,经反复讨论撰写了《Pretomanid(PA-824)治疗耐多药结核病的应用建议》,以期为加快PA-824及BPaL方案在我国的注册使用提供参考。     

2015—2019年全国肺结核报告发病情况分析

目的 了解2015—2019年我国肺结核报告发病情况的主要变化趋势。 方法 利用2015—2019年我国《传染病报告信息管理系统》报告的肺结核(临床诊断和实验室诊断)发病数据,分析全国肺结核报告发病率、不同省份肺结核报告发病率、不同年龄段和不同性别肺结核报告发病例数及各自占对应年龄段人口总数的比例、不同职业肺结核报告发病例数及其占发病职业人口总数的比例。结果 2015年全国肺结核报告发病率为63.42/10万(864015/136247万),2019年全国肺结核报告发病率为55.55/10万(775764/139654万)。2019年较2015年报告发病率下降了12.41%。2015—2018年新疆维吾尔自治区的报告发病率均位居各省之首,逐年分别为184.56/10万(42413/2298万)、185.66/10万(43816/2360万)、202.59/10万(48581/2398万)、304.90/10万(74549/2445万)。到2019年,西藏自治区成为报告发病率最高的地区,为182.38/10万(6274/344万)。2015、2019年全国肺结核报告发病患者性别分布上,男性分别占68.97%(595939/864015)和68.83%(533981/775764);女性分别占31.03%(268076/864015)和31.17%(241783/775764)。职业分布上,2015—2019年农民报告发病的比例均最高,分别占64.42%(556643/864015)、63.81%(533637/836236)、62.26%(520003/835193)、61.42%(505664/823342)、60.06%(465945/775764)。结论 2015—2019年,我国肺结核报告发病情况呈现稳定下降趋势,应重视农民、新疆和西藏地区的结核病防控工作。     

采用宏基因组学分析肺结核患者与健康人群呼吸道微生物菌群的特征

目的 明确肺结核患者和健康人群的呼吸道微生物菌群组成的变化情况。方法 时间限定为2010年1月至2019年12月,在英文数据库(PubMed、Embase and Ovid、Web of Science、Google Scholar、Cochrane Library)和中文数据库(中国知网、万方、中国生物医学文献服务系统与维普)检索所有包含结核和呼吸道菌群的文献,按照文献检索流程筛选文献并最终纳入。收集所有可用的下一代测序数据,统一处理参数,进行数据预处理和系统的宏基因组学分析及统计学处理。结果 共纳入9篇英文文献。物种分析结果提示肺结核组和健康对照组在门水平相对丰度排在前10位的共有菌群有:厚壁菌门、OD1菌门、变形菌门、拟杆菌门、放线菌门、梭杆菌门、蓝菌门。但两组呼吸道菌群群落结构组成差异有统计学意义,α多样性分析显示,肺结核组观测到的可操作分类单元(operational taxonomic units,OTU)数目(286.60±22.82)、Faith 谱系多样性(phylogenetic diversity,PD)指数(Faith PD指数)(13.57±2.58)、Shannon指数(7.17±0.24)明显高于健康对照组(分别为42.88±2.49、6.52±0.22、4.42±0.07),差异均具有统计学意义(P值分别为0.00016、0.00056、0.00016)。肺结核组Chao1指数高于健康对照组(266.50±92.71 和38.44±2.86),但差异无统计学意义(P>0.05)。门水平上两组丰度有差异的物种有6种,其中5种在健康对照组聚集,为厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门、梭杆菌门、变形菌门,另有OD1门在肺结核组聚集。F16科、丙型变形菌纲、梭杆菌门梭杆菌目、厚壁菌门下的明串珠菌科和芽孢杆菌科是肺结核特有的菌群种类。结论 肺结核患者与健康人群比较,呼吸道菌群的多样性及物种组成均发生了较大变化,并具有特有的菌群种类。     

结核性脑膜炎临床分离株的耐药性和基因型相关性分析

目的 了解结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）的致病菌在耐药性和基因型方面的相关性.方法 从500例疑似TBM患者脑脊液标本中经MGIT（Mycobacteria growth indicator tube）960培养仪分离培养出25株结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）,对这25株Mtb分别进行间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）法基因分型、14种抗结核药物的药物敏感性试验、10个耐药基因测序.结果 20株为北京基因型,占80.0％（20/25）;耐多药结核性脑膜炎（MDR TBM）有3株（3/25）,都属于北京基因型;测序结果显示inhA、embB、gyrB、eis 基因未发生突变,katG、rpoB、gyrA、rrs-KAN、rpsL、gidB基因发生突变.结论 北京基因型在耐药TBM中所占比例高,尤其是MDR-TBM.耐药TBM临床分离株与相关耐药基因突变有关系.     

应用分子伴侣共表达系统表达结核分枝杆菌编码蛋白

目的研究共同表达分子伴侣能否提高结核分枝杆菌编码基因的表达效率及被表达蛋白的生物活性。方法将携带有结核分枝杆菌编码基因的表达质粒Rv3790：：pET16b、Rv3791：：pET16b与能够同时表达3个分子伴侣DnaK、DnaJ和GrpE的质粒pkJE7共同在大肠埃希菌BL21（DE3）表达,之后对所获得的蛋白通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印记分析（WesternBlot）检测蛋白产量,并分析蛋白的活性。以Rv3790：：pET16b、Rv3791：：pET16b单独在BL21（DE3）内的表达作为对照。结果与分子伴侣共表达的结核分枝杆菌编码基因相对于目的基因单独表达时获得较多的可溶性蛋白,较少的包涵体和蛋白降解;共表达的蛋白也具有相对较好的活性。结论共同表达分子伴侣能够提高某些结核分枝杆菌编码蛋白的表达效率和生物活性。     

选择适宜治疗方案 正确评估抗结核治疗疗效提高利福平敏感结核病治疗质量

规范利福平敏感结核病的治疗,提高治疗质量,无论是对耐药结核病防治,还是控制结核病流行都至关重要。首先,重视病原学检查,结合结核病患者病情选择适宜辅助检查,按照结核病病变类型使用对应治疗方案;第二,首选一线抗结核药品,无胃肠道吸收功能障碍患者,全疗程口服用药;第三,使用标准抗结核治疗方案,即强化期使用H-R-Z-E治疗方案,足量用药,利福平敏感结核病抗结核治疗推荐使用抗结核固定剂量复合制剂(FDC);第四,病原学检查是判断抗结核治疗疗效的金标准,客观评价患者治疗疗效,完成抗结核治疗疗程,符合治疗成功条件的患者可以停止抗结核治疗。     

福建省结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列基因分型研究

目的 了解福建省结核分枝杆菌的多位点可变数目串联重复序列基因分型(MLVA)的特征.方法 选择15个可变数目串联重复位点(VNTR),检测福建省30个耐药监测点临床分离的结核菌株,结果使用BioNumerics (Version 4.5)软件进行聚类分析.结果 313株结核菌被分为9个基因群(Ⅰ～Ⅸ),分别包含220、9、48、2、1、3、10、10、10株菌,以Ⅰ群为主(70.3％,220/313);Ⅰ群菌株异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和耐多药的耐药率与其他基因群的差异无统计学意义(P＞0.05),但利福平(RFP)耐药率为33.2％(73/220),明显高于其他群菌株RFP的耐药率20.4％(19/93),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 福建省结核分枝杆菌菌株存在明显的基因多态性,以Ⅰ群菌株为主,并与RFP耐药性具有相关性,应加强此类菌株流行的监测.     

免疫相关基因在小细胞肺癌瘤组织中的表达变化研究

目的研究免疫相关基因在小细胞肺癌瘤组织中的表达变化。方法应用自行研制含626条人类免疫相关基因的基因芯片和生物信息学方法，对14例小细胞肺癌瘤体组织和瘤旁正常组织的mRNA表达水平分别进行分析比较，所做的表达谱杂交检测均重复1次和荧光交换后再重复1次以抑制噪声。结果在小细胞肺癌中表达降低于0．25的有：Scya18、a2m、scya14、ager、maoa、cyr61、hla -dr、igf1、i16、serping1、thbd、cyp27al、hla -dp、hla -dq、igkc、eva1、lcp1、ifitm2、scya2、glrx、hla -g、ms4a7、cllorf9、i17r、qscn6、il-1r、tip-1、fgfr1、trb、mfsf10、fgfr4、Ida-a、ifitml等，表达增高4倍以上的有：ckb、insr、ilt3、mcm3、il-17br、sgrf、cd24、pmaip1、hprt1、cct6a、kpnb1、fkbp4、ilt2、ill3ra1、sil、set、tubb、kiaa0332、h3f3a、whscl、ical，经配对t检验以上结果存在显著的统计学差异。结论机体抗肺癌免疫涉及诸多免疫相关基因参与，小细胞肺癌组织中Scya18、a2m、scya14、ager等基因表达明显降低，而il17r、ckb、insr、ilt3等基因表达显著增高，这些表达明显差异的基因可能会对小细胞肺癌的生物治疗以及疗效评价产生一些积极的作用。     

应用微列阵技术快速鉴定常见致病性分枝杆菌

目的利用微列阵技术建立一种简便、快速、灵敏、特异的分枝杆菌菌种鉴定方法,为临床医师正确诊断提供依据。方法以DNA测序法为对照,通过微列阵技术分析20种分枝杆菌标准株及473株分枝杆菌临床分离株。结果微列阵技术分析20种分枝杆菌标准株,特异性为100％,在473株分枝杆菌临床分离株中,358株与分枝杆菌属探针和结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）复合群探针杂交阳性,鉴定为MTB复合群。115株为非结核分枝杆菌（nontuberculosis myvobacterial,NTM）,其中47株为龟分枝杆菌龟亚种和脓肿亚种,32株为胞内分枝杆菌,15株为鸟分枝杆菌,11株为堪萨斯分枝杆菌,4株为偶然分枝杆菌,2株为戈登分枝杆菌,2株为土分枝杆菌,2株只与分枝杆菌属探针杂交,经测序显示1株为副瘰疬分枝杆菌,1株为莫娜分枝杆菌,芯片上无鉴定这2个菌种的探针。结论做列阵技术是一种能准确、高效鉴定分枝杆菌菌种的分子诊断技术,对临床快速、特异诊断结核病具有重要意义。