血清TSH水平相关的遗传学研究进展

甲状腺激素在机体的牛理及代谢过程巾发挥重要作用.作为评价甲状腺功能的敏感指标,血清促甲状腺素(TSH)浓度在个体之间差异明显并且主要由遗传因素所决定.在经历了传统的连锁分析及候选基因关联分析之后,全基因组关联分析(GWAS)在研究血清TSH易感基因过程中取得了重大进展,并发现了许多新的易感位点.本文主要综述与血清TSH水平相关的基因,并对这些研究的未来进行了展望.     

AD-004蛋白表达、抗体制备及其在睾丸和肾上腺组织中的表达分析

目的以原核表达的小鼠肾上腺蛋白AD-004为免疫原，制备抗AD-004的兔多克隆抗体，并明确其在肾上腺、睾丸组织中的分布。方法将小鼠AD-004cDNA克隆于原核表达载体PET28，经IPTG诱导AD-004的表达。用Ni^2＋-NTA纯化后的蛋白为免疫原制备抗AD-004多克隆抗体。通过Western印迹鉴定抗体特异性及效价，并用此抗体对小鼠睾丸、肾上腺组织进行免疫组织化学分析。结果此原核表达系统可高效表达AD-004蛋白，Western印迹结果显示所制备的抗体具有很高的效价和特异性，免疫组化提示AD-004蛋白在肾上腺的髓质表达较高，而在睾丸中主要表达于间质的Leydig细胞。结论本研究获得了小鼠AD-004原核表达蛋白，成功制备了AD-004多克隆抗体，并发现其在睾丸间质Leydig细胞表达最高，提示AD-004可能在睾丸性激素的合成过程中起重要作用。     

家族性肥厚型心肌病大家系肌球蛋白结合蛋白C3基因突变筛查

目的 研究一汉族家族性肥厚型心肌病(FHCM)家系患者的致病基因突变位点,分析其基因型与表型关系.方法 收集到一规模较大的FHCM家系,共5代89位成员,采集到67份血样.用primerexperss 2.0软件设计引物扩增肌球蛋白结合蛋白C3( MyBPC3)基因的各外显子及相邻内含子区,产物纯化后应用美国ABI PRISM 3700 DNA自动测序仪进行测序,用Autoassembler 2.0软件将测序结果与MyBPC3的基因组序列进行比较、分析.结果 该家系共14例患者(4例已去世,其中2例是年轻时猝死),在世的10例患者左心室壁厚度均超过13 mm.符合常染色体显性遗传病的特点.经突变筛查,发现2处碱基改变,经检索国家生物技术信息中心单核苷酸多态性数据库,这些碱基改变均为多态性.结论 MyBPC3基因不是该家系的致病基因,反映了肥厚型心肌病的遗传异质性,需对其他可能的候选致病基因进行筛查.     

TSHR基因内含子1区域多态性与Graves病的关联研究

目的 探讨中国江苏徐州地区汉族人群促甲状腺素受体(TSHR)基因内含子1 上单核苷酸多态性位点(SNP)rs179247和rs12101261与Graves病的关系.方法应用TaqMan探针技术,在Fluidigm EP1平台上对1 066例Graves病患者和1 107名健康对照者进行基因分型;同时检测样本血清甲状腺激素和TSH受体抗体(TRAb)水平.结果 rs179247_A、rs12101261_T与Graves病易感性关联(分别为OR=1.35,95%CI 1.19～1.54,P=5.92×10-6;OR=1.32,95%CI 1.16～1.50,P=2.22×10-5);Logistic回归提示rs179247是独立的易感位点.在rs179247_GG、AG、AA 3种基因型之间相比,血清TRAb水平具有统计学差异(P=0.015);其他临床表现其差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 TSHR基因内含子1区域rs179247、rs12101261与徐州地区汉族人群Graves病相关联,并且rs179247是一个独立易感位点;该多态性与血清TRAb水平有关,与血清甲状腺激素水平、发病年龄、甲状腺肿大程度、Graves病眼征分级、复发与否无明显关联.

Abstract：

Objective To investigate the association between polymorphisms of thyroid-stimulating hormone receptor(TSHR)gene intron 1(rs179247, rs12101261)and Graves′ disease(GD)in the China Han population from Xuzhou city, Jiangsu Province. Methods Total 1 066 GD patients and 1 107 control subjects were recruited for genotyping by Taqman probe technique on Fluidigm EP1 platform. Meanwhile, serum concentrations of thyroid hormone and TSH receptor antibodies(TRAb)were determined. Results The rs179247_A, rs12101261_T were significantly associated with GD risk(OR=1.35, 95%CI 1.19-1.54, P=5.92×10-6; OR=1.32, 95%CI 1.16-1.50, P=2.22×10-5). Logistic regression identified that rs179247 was an independent susceptibility locus of GD. Serum TRAb concentration showed a significant difference(P=0.015)among rs179247_AA, AG, and GG genotypes. Conclusion rs179247 and rs12101261 in TSHR intron 1 are both associated with GD, and rs179247 may contribute risk to GD independently. The polymorphism is associated with TRAb, but not with serum concentration of thyroid hormones, age of onset, diffused thyroid goiter, ophthalmic signs, and relapse.     

4p14区段和CTLA-4基因多态性与Graves病相关

目的探讨中国安徽蚌埠地区汉族人群4p14区段位点rs6832151和CTLA-4基因4个SNPs(单核苷酸多态性)位点基因多态性与Graves病相关性,和基因-基因交互作用对Graves病的影响。方法提取611例诊断明确的GD患者和644名健康对照者的全基因组DNA,用Taq Man探针技术进行基因分型,使用Plink和Haploview等统计软件分析这些位点与蚌埠地区汉族人群Graves病的相关性。结果 4p14区段位点rs6832151的等位基因、基因型频率在GD组和对照组之间有差异(P0.05),CTLA-4基因区域内rs231804和rs231726两个SNP位点基因型在显性模型下差异显著(P0.05);GMDR模型显示CTLA-4基因内rs10197319、rs231726、rs231804、rs1024161位点和4p14区段内rs6832151位点组成的五阶模型(P=0.001)为最佳模型,CTLA-4基因内rs1024161和rs10197319位点之间上位效应分析结果有差异(P0.05)结论 4p14区段rs6832151,CTLA-4基因区域内rs231804和rs231726位点基因多态性与蚌埠地区汉族人群Graves病的遗传易感性相关;rs6832151(4p14区段)和rs10197319、rs231726、rs231804、rs1024161(CTLA-4基因)5个SNP位点间的基因-基因交互作用与Graves病相关,CTLA-4基因内rs1024161和rs10197319位点之间存在上位效应。     

大鼠内脏脂肪含量与ghrelin分泌的关系

目的了解大鼠内脏脂肪含量对ghrelin分泌的影响。方法80只大鼠分别制成正常大鼠模型组、高脂大鼠模型组及减重大鼠模型,使用GE Lightspeed 16排螺旋CT全扫,计算大鼠内脏脂肪组织面积,从而计算出内脏脂肪含量,并根据内脏脂肪含量将所有大鼠重新分为A组(内脏脂肪含量<3%)、B组(3%≤内脏脂肪含量<6%)、C组(6%≤内脏脂肪含量<9%)、D组(内脏脂肪含量≥9%),应用放射免疫测定法测定血清中ghrelin的含量,进一步分析大鼠内脏脂肪含量与ghrelin分泌之间的关系。结果(1)与正常饲料喂养大鼠相比,高脂饮食后大鼠体质量与内脏脂肪含量均明显增加(P<0.01);而肥胖大鼠减重后,体质量与内脏脂肪含量均下降(P<0.01),尤其内脏脂肪含量下降更为明显(P<0.01)。(2)与A组内脏脂肪含量相比,B组、C组、D组内脏脂肪含量分别是A组的3.15倍、5.84倍、7.69倍。B组与A组之间ghrelin的分泌无显著差异(P>0.05);C组、D组ghrelin的分泌较A组明显下降(P<0.01)。结论不同内脏脂肪含量的大鼠,其ghrelin的分泌不同,在内脏脂肪含量相差较明显时,ghrelin分泌的下降才具有显著差异。     

术后早期炎性肠梗阻的诊治体会

目的探讨术后早期炎性肠梗阻的临床特点和诊治原则。方法回顾性分析我院近期诊治的术后早期炎性肠梗阻28例。结果27例患者经保守治愈；1例患者经手术治疗治愈。平均治愈时间为11．2d。结论术后早期炎性肠梗阻多发生在术后2周以内，临床上虽然有肠梗阻症状和体征，但无肠绞窄，非手术治疗有效，治疗过程中应严密观察，如出现肠坏死、腹膜炎征象时应及时中转手术。     

饥饿对大鼠脂肪细胞分化的影响

目的了解饥饿对大鼠脂肪细胞分化的影响。方法应用cDNA芯片以及Northern印迹等方法,了解在饥饿的情况下,大鼠脂肪细胞基因表达谱的变化,进一步分析饥饿对大鼠脂肪细胞分化的影响。结果在饥饿大鼠的基因表达谱中,总共有98个基因或EST发生了变化,其中许多与细胞分化有关的一些基因也发生了明显的变化。结论在饥饿的情况下,大鼠脂肪细胞的分化受到一定程度的抑制。     

UGRPl基因多态性与新疆维吾尔族Graves病相关性研究

目的:探讨UGRPl基因启动子区单核苷酸多态性(SNP)与新疆维吾尔族弥漫性甲状腺肿伴甲亢(Graves病)有无相关性.方法在新疆地区以215例散发维吾尔族Graves病患者及196例维吾尔族健康对照者作为研究对象,采用外周血白细胞抽提DNA,设计引物,多重PCR扩增,应用基因芯片进行SNP位点分析.结果患者UGRPl基因启动子区发现5个多态住点,将这些多态位点的等位基因、基因型频率与对照组比较,无明显统计学差异.其中有两个位点在以往研究中未见报道.结论本研究提示UGRPl基因启动子区单核苷酸多态性与新疆维吾尔族GD可能不相关.