山西汉族高血压人群与蛋白酶体α_6亚单位基因多态性的相关性研究

<正>泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)是Hershko等[1]发现的一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白的选择性降解,由泛素、泛素活化酶、泛素偶联酶、泛素—蛋白连接酶、26S蛋白酶体以及泛素再循环酶等组     

自噬相关基因 5 下调抑制血管紧张素Ⅱ介导的巨噬细胞凋亡

目的探讨自噬相关基因5（autophagy-relatedgene5,Atg5）在血管紧张素Ⅱ（angiotensionⅡ,AngⅡ）诱导高血压心脏损伤中对巨噬细胞凋亡的影响。方法40只雄性C57BL/6小鼠及10只Atg^5＋/-分为对照组,AngⅡ灌泵1d组,AngⅡ灌泵3d组,AngⅡ灌泵7d组和Atg^5＋/-灌泵组,每组10只。给予乙酸溶液（对照组）及AngⅡ（1500ng/kg＊min）微量泵灌注。TUNEL染色观察心脏中细胞凋亡,免疫荧光共染明确凋亡细胞类型;qPCR检测Atg^5＋/-小鼠心脏中Atg5表达;TUNEL染色观察心脏中细胞凋亡,QuantiGenePlex（QGP）检测凋亡因子表达;体外Ang1I刺激wT和Atg^5＋/-骨髓巨噬细胞,免疫荧光共染,检测巨噬细胞凋亡。结果wT小鼠心脏于AngⅡ灌注1-7d后,TUNEL染色阳性细胞数显著增加,荧光共染显示凋亡细胞为巨噬细胞;Atg^5＋/-小鼠心脏中Atg5表达量较WT小鼠心脏降低53％;AngⅡ灌注7d后,与WT鼠相比,Atg^5＋/-小鼠心脏TUNEL染色阳性细胞数降低,促凋亡因子Caspase3、Caspase8、Caspase12表达降低。体外AngII刺激下,Atg^5＋/-骨髓巨噬细胞较W骨髓巨噬细胞凋亡减少。结论在AngⅡ致高血压心脏损伤中,Atg5下调可导致心脏中巨噬细胞凋亡下降。     

高血压对小鼠血管骨桥蛋白表达的影响

目的研究高血压早期血管损伤中基因表达变化。方法30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和血管紧张素II（angiotensinII,AngII）组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和AngII1500ng/（kg·min）,于第7天取主动脉,提取RNA后进行基因芯片分析;采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;实时定量PCR（Real-timePCR）检测骨桥蛋白（OPN）的表达;取其胸主动脉进行组织切片,免疫组织化学染色观察骨桥蛋白的表达。结果与对照组相比,AngII组在灌泵7天时血压升高]（105±7）vs．（148±14）mmH岛1mmHg=0．133kPa,P〈0．001];基因芯片结果显示骨桥蛋白基因表达明显升高（〉50倍）;real-timePCR验证骨桥蛋白表达升高3．9±0．9倍,P〈0．05;免疫组化显示主动脉OPN表达增加。结论AngII导致高血压情况下,血管组织OPN表达增高,可能参与高血压血管损伤的过程。     

巨噬细胞分化在心肌梗死后心脏重构中的作用研究

目的探讨巨噬细胞分化在心肌梗死后心脏重构中的作用。方法 34只雄性C57BL/6J野生小鼠随机分成对照组(6只)和心肌梗死组(28只),心肌梗死组结扎小鼠左冠状动脉前降支构建心肌梗死模型,对照组只穿线不结扎。苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学染色及实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察心肌梗死术后1、3、7 d巨噬细胞浸润、分化及炎症因子分泌,马松染色、免疫组织化学染色观察心肌梗死28 d后心脏重构情况。结果术后1 d超声结果示造模成功,心肌梗死7 d存活率为64%(18/28),HE染色示心肌梗死后炎症细胞浸润增多,免疫组织化学半乳糖凝集素-2(MAC-2)、精氨酸酶-1(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)染色及RT-PCR结果示心肌梗死后Mac-2+细胞、iNOS+细胞、Arg-1+细胞在1、3、7 d均升高,其中iNOS+细胞数目在第7天最高,Arg-1+细胞数目在第3天最高,趋化因子、炎症因子分泌均增加,其中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在第3天最高,转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α在第7天最高,马松染色、免疫组织化学α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)提示心肌梗死28 d发生心脏重构(均P<0.01)。结论心肌梗死后发生炎症反应,巨噬细胞浸润逐渐增多,炎症早期以经典活化型为主,炎症晚期以替代活化型为主,炎症因子分泌逐渐增多,促进α-SMA+肌成纤维细胞形成,引起晚期心脏重构。     

二甲基精氨酸二甲基氨基酸水解酶基因多态性与冠心病的相关性研究

目的:研究中国人群二甲基精氨酸二甲基氨基酸水解酶(DDAH)基因单核苷酸多态性(SNP)与冠状动脉性心脏病(coronary heart disease,CHD)的关系。方法:从山西医科大学第二医院选取冠心病患者165例和匹配的对照组192例。并记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其它流行病学资料,采取聚合酶链式反应和限制性酶切片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测各组DDAH2基因rs805305位点C/G的基因型并统计各组的基因型频率。用连接酶检测反应(LDR)-测序分型方法检测各组基因rs2272592位点G/A的基因型并统计各组的基因型频率。结果:冠心病组rs805305和rs2272592基因型频率与对照组之间相比较均无显著差异(P0.05)。并在校正了年龄、性别、高血压史、糖尿病史、甘油三酯和胆固醇等传统危险因素的影响后,这种相关性依然不存在。结论:DDAH2基因rs805305位点C/G多态性和rs2272592位点G/A多态性可能与中国人群冠心病发病不相关。     

山西汉族人群肾上腺素β_2受体基因多态性与冠心病的相关性研究

目的研究山西汉族人群肾上腺素β2受体基因(ADRB2)单核苷酸多态性(SNP)与冠心病的相关性。方法从山西医科大学第二医院选取经冠状动脉造影证实为冠心病的患者428例和与之匹配的经冠状动脉造影证实无冠心病的对照组397例。并记录分析所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其他流行病学资料,采取连接酶检测法检测各组ADRB2基因rs1042713位点A/G基因型并统计各组的基因型频率。结果冠心病组rs1 0 4 2 7 1 3位点A等位基因型频率显著低于对照组(4 5.8%vs5 6.7%,P=0.002,OR=1.548),差异有统计学意义。结论 ADRB2基因rs1042713位点A/G多态性与冠心病的发病密切相关,其中A等位基因可能是山西汉族人群冠心病的保护因素之一。     

细胞间粘附因子-1在高血压致炎症和心脏纤维化中作用的研究

目的探讨细胞间粘附因子-1(Intercellular Adhesion Molecular-1,ICAM-1)在高血压致炎症与心脏纤维化中的作用。方法将12只野生小鼠和12只ICAM-1敲除小鼠随机分成四组:野生对照组,野生血管紧张素Ⅱ灌泵组,ICAM-1敲除对照组,ICAM-1敲除血管紧张素Ⅱ灌泵组,给予血管紧张素Ⅱ(1500ng/kg*min,7d)及乙酸溶液(对照组)微量泵灌注,在灌注后第7天通过小鼠尾动脉套法测定各组血压,超声心动图检查以观察小鼠心脏结构和功能改变,马松染色、天狼星红染色观察心脏纤维化,免疫组化α-SMA染色观察肌成纤维细胞的形成,HE染色和免疫组化Mac-2、IL-1β、TGF-β染色观察炎症细胞浸润及炎症因子分泌。结果血管紧张素Ⅱ灌注第7天,灌泵组较对照组血压升高,说明造模成功。ICAM-1敲除灌泵组较野生灌泵组炎症细胞浸润增多(p<0.05n=6),尤其是Mac-2+巨噬细胞(p<0.05n=6),炎症因子TGF-β、IL-1β分泌增多(p<0.05n=6),α-SMA+肌成纤维细胞增多(p<0.05n=6)。结论在高血压致心脏纤维化过程中,ICAM-1敲除后,加重以Mac-2+巨噬细胞为主的炎症细胞浸润、增加炎症因子(TGF-β、IL-1β)分泌,导致心脏组织中α-SMA+的肌成纤维细胞形成,最终加重心脏纤维化。     

超声心动图无创评估左心室充盈压指导慢性心力衰竭患者利尿剂的使用

目的：评价超声心动图无创评估左心室充盈压（LVFP）指导慢性心力衰竭（CHF）患者利尿剂的合理使用及改善预后。方法：入选2019年10月至2020年10月就诊于我院急诊危重症中心门诊的CHF患者127例,随机分为超声评估组（n=64）和常规评估组（n=63）,超声评估组根据常规临床查体、化验和超声心动图无创评估的LVFP结果制定利尿剂治疗方案,常规评估组仅依据常规临床查体和化验结果制定利尿剂治疗方案。随访时间为入组后14 d、30 d和90 d。主要终点是因心力衰竭（HF）紧急就诊或再入院复合终点事件;次要终点是因HF紧急就诊、因HF再入院、全因死亡和N末端B型利钠肽原（NT-proBNP）水平;安全性终点为肾功能恶化（WRF）。结果：排除未获得有效超声心动图参数及随访资料不全患者6例,最终121例纳入研究,超声评估组58例和常规评估组63例。基线时充血阳性体征的患者不足1/4,而LVFP升高的比例约占一半。随访期间超声评估组袢利尿剂使用人数和剂量调整频次较常规评估组更多（P均<0.05）,平均剂量和WRF患者比例差异无统计学意义（P均>0.05）。在基线LVFP升高患者的...     

山西汉族人群肾上腺素β2受体基因多态性与冠心病的相关性研究

目的研究山西汉族人群肾上腺素β2受体基因（ADRB2）单核苷酸多态性（SNP）与冠心病的相关性。方法从山西医科大学第二医院选取经冠状动脉造影证实为冠心病的患者428例和与之匹配的经冠状动脉造影证实无冠心病的对照组397例。并记录分析所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其他流行病学资料,采取连接酶检测法检测各组ADRB2基因rs1042713位点A/G基因型并统计各组的基因型频率。结果冠心病组rs1 0 4 2 7 1 3位点A等位基因型频率显著低于对照组（4 5.8%vs5 6.7%,P=0.002,OR=1.548）,差异有统计学意义。结论 ADRB2基因rs1042713位点A/G多态性与冠心病的发病密切相关,其中A等位基因可能是山西汉族人群冠心病的保护因素之一。