RNAi沉默Sp3基因对肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的:采用基因沉默和慢病毒转染技术,沉默人肝癌细胞HepG2中特异蛋白3(specificity protein 3,Sp3)的表达,观察沉默Sp3基因后的肝细胞的增殖能力变化.方法:采用Sp3-siRNA慢病毒转染人肝癌细胞HepG2,通过免疫印迹法和PCR技术检测Sp3的表达以验证转染效果,通过MTT检测细胞生长曲线和流式细胞技术测定细胞周期.结果:Western blot实验表明,实验组的Sp3表达量明显少于空白组和阴性对照组(0.37±0.08 vs 0.83±0.17,0.66±0.13,F=8.442,均P<0.05).RT-PCR也得到相同的结果(0.47±0.05 vs 0.74±0.08,0.70±0.16,F=7.322,均P<0.05).MTT实验结果显示,与空白对照和阴性对照组相比,实验组细胞在48、72和96h时的增殖明显受到抑制(0.28±0.18 vs 0.34±0.19,0.35±0.07,F=3.888;0.57±0.11 vs 0.84±0.05,0.74±0.08,F=12.721;0.72±18.1 vs 0.98±0.05,0.93±0.9,F=6.342,均P<0.05).流式细胞术结果显示实验组细胞主要分布在G1期.结论:RNAi沉默Sp3基因导致人肝癌HepG2细胞体外增殖能力下降.     

转录因子S p3在肝细胞癌中的表达意义

目的：研究转录因子Sp3（Sp3）在肝细胞癌（HCC）发生、发展及预后中的作用。方法采用Western blot法和RT‐PCR法检测该院49例HCC组织及其癌旁肝组织中Sp3和β‐Catenin的表达情况,分析二者在 HCC和癌旁肝组织中的表达差异、二者的表达与 HCC临床病理特征的关系,以及Sp3与预后的关系。结果 Western blot和RT‐PCR法的结果均显示：（1）Sp3在HCC中的表达高于癌旁肝组织,差异有统计学意义（P＜0．05）;（2）β‐Catenin在HCC中的表达高于癌旁肝组织,差异有统计学意义（P＜0．05）;（3）Sp3和β‐Catenin在HCC中的表达与肿瘤直径和分级相关;（4）Sp3和β‐Catenin在 HCC中的表达呈正相关（Western blot ：r＝0．681、P＝0．000;RT‐PCR：r＝0．641,P＝0．000）,均与肿瘤大小和分化程度有关;（5）Sp3高表达的病例预后较低表达的病例差（P＜0．05）。结论 Sp3在 HCC发生中起促进作用且与肿瘤恶性程度相关;Wnt通路可能是其参与 HCC发生、发展的途径。     

不同冻存液冻存慢病毒转染后稳转肝癌细胞株 HepG2的效果比较

目的筛选冻存慢病毒转染后稳转肝癌细胞株HepG2的最佳冻存液。方法采用甘油和二甲基亚砜(DMSO)2种不同冻存保护剂,以4种不同比例的冻存液分别冻存慢病毒转染后肝癌细胞HepG2及未转染的HepG2细胞,并对上述细胞复苏后的存活率及增殖能力进行比较分析。结果采用甘油为冻存保护剂时,冻存液[DMEM∶胎牛血清(FBS)∶甘油]比例为0∶9∶1的转染后细胞存活率最高(P=0.001);未转染细胞存活率与冻存液比例无关(P=0.293)。采用DMSO为冻存保护剂时,转染后细胞存活率为0%;未转染细胞存活率在60%及以上,且与冻存液比例无关(P=0.487)。冻存液中血清含量越高,复苏后细胞的增殖能力越强(P<0.05)。结论冻存慢病毒转染后的稳转肝癌细胞株HepG2的最佳冻存液为90%FBS+10%甘油。     

长链非编码RNAC17orf91在肝细胞癌中低表达的临床意义

目的评估长链非编码RNAC17orf91在肝细胞癌患者中的表达水平及其临床意义。方法通过整合全球基因芯片、转录组测序数据鉴定肝细胞癌差异表达基因,计算1381例肝细胞癌及1052例非癌肝组织样本中C17orf91表达水平的标准化平均差（SMD）,并合并C17orf91表达水平用于区分肝细胞癌及非癌肝组织的ROC曲线以及AUC。利用癌症基因组图谱分析C17orf91表达水平对肝细胞癌患者预后的影响。为探究C17orf91参与潜在分子通路,本研究从miRecords、DIANA-microT-CDS、ElMMo等11个数据库全面搜集C17orf91来源的hsa-miR-22-3p及hsa-miR-22-5p靶基因,将其与肝细胞癌差异表达基因取交集,对基因分子功能展开注释,并据此初步筛选可能具有较高敏感性的抗肝细胞癌药物及其潜在作用靶点。结果肝细胞癌组织中C17orf91表达水平明显下调,其SMD低至-0.96（-1.25~-0.67）,对肝细胞癌组织及非癌肝组织具有中等区分能力;且低表达C17orf91预示肝细胞癌患者预后不良。C17orf91来源的hsa-miR-22-3p和hsa-miR-22-5p可能参与抑制细胞迁移正性调控及血管发育;而hsa-miR-22-3p靶基因ADAMTS1可能作为肝细胞癌的治疗靶点。结论低表达C17orf91可能作为肝细胞癌患者预后不良的分子标志物之一。     

新医学教学模式下病理学教学的改革及探索

病理学是研究疾病发生、发展的医学基础学科,是衔接临床医学与基础医学之间的桥梁,其教学内容多,涉及面广,知识零散抽象,是医学教育的难点及重点.本教研室依据新医学教学模式在教学目标、教学内容以及教学手段方面进行一系列的改革,并取得了良好的效果,提高了病理学教学质量.     

同源盒A家族基因在肺鳞癌中的表达谱研究

目的:研究同源盒A(homebox A,HOXA)家族基因在肺鳞癌中的表达、预后价值及潜在分子机制。方法:利用基因芯片技术检测HOXA家族基因在广西医科大学第一附属医院2017年8月至2017年10月收集的3对肺鳞癌及癌旁组织标本中的表达量,并整合其他多种技术分析计算标准化均数差( SMD)评价HOXA家族...