改良肺动脉灌注在发绀型先天性心脏病体外循环术中的应用

目的研究体外循环中经肺动脉灌注低温组胺酸-酮戊二酸-色氨酸灌注液(HTK)对发绀型先天性心脏病患儿的肺保护作用。方法 30例发绀型先天性心脏病患儿随机分为灌注组和对照组。灌注组体外循环期间肺动脉灌注低温HTK,对照组常规体外循环。围手术期检测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。征得患儿家长同意,取右下肺组织活检,观察病理变化。检测围手术期动脉血气分析及体外循环(CPB)时间、主动脉阻断时间、呼吸机辅助时间、住监护室(ICU)时间、术后住院时间。结果 2组CPB时间、主动脉阻断时间及术后住院时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。灌注组呼吸机辅助时间、住ICU时间均显著低于对照组(P<0.05)。返回ICU后0、12、24和48 h,灌注组氧合指数均明显高于对照组,肺泡-动脉氧分压差明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。体外循环前,灌注组血浆TNF-α与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);返回ICU后0、12、24和48 h灌注组血浆TNF-α与对照组比较明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察显示,灌注组体外循环术后肺泡轻度水肿,肺泡内炎症细胞浸润减少;对照组体外循环术后肺泡水肿,肺泡内见大量中性粒细胞浸润。结论改良肺动脉灌注低温HTK可以明显减轻发绀型先天性心脏病体外循环术后肺内炎症反应和改善肺功能。     

法舒地尔逆转大鼠重度肺动脉高压实验研究

目的探讨法舒地尔对大鼠重度肺动脉高压及其组织病理改变的影响。方法左肺切除+野百合碱注射建立大鼠重度肺动脉高压模型,雄性SD大鼠60只随机分为5组,A组为对照组,B组为肺动脉高压组,C,D,E组分别为法舒地尔30,50,100mg/(kg.d)干预肺动脉高压组。对各组大鼠进行生存分析,测量平均肺动脉压力、股动脉收缩压、右心室肥厚指数;弹力纤维染色分析肺血管病变;免疫组织化学法检测肺动脉平滑肌细胞凋亡率。结果 C,D,E组生存率明显高于B组,C及D组生存率高于E组(P<0.05);4周后,C,D,E组平均肺动脉压力较B组明显降低,肺动脉中膜肥厚、内膜增生较B组明显减轻,肺动脉平滑肌细胞凋亡率较B组明显升高(P均<0.05);C及D组右心室肥大指数较B组降低(P<0.05);E组动脉收缩压较B组明显下降(P<0.05)。结论中、小剂量法舒地尔可改善重度肺动脉高压大鼠的预后、逆转右心室肥厚及不同类型的肺血管病变。     

乳猪深低温停循环不同流量选择性脑灌注微透析实验研究

目的运用微透析分析技术观察乳猪深低温停循环不同流量选择性脑灌注（antegrade selective cerebral perfusion,ASCP）中神经细胞间液各种物质变化情况。方法20只健康幼猪麻醉成功后植入微透析针,随机分为对照组5只与实验组15只,对照组为单纯深低温停循环（DHCA组）,实验组按不同ASCP流量分为3组各5只,ASCP30组灌注流量为30mL／（kg·min）,ASCPS0组灌注流量为50mL／（kg·min）,ASCP80组灌注流量为80mL／（kg·min）。各组于体外循环前（T1）、降温40rain时（T2）、深低温停循环时（T3）、复温40min时（T4）、体外循环后60min时（T5）、体外循环后120min时（T6）6个时间点采集微透析样本,检测氨基酸和能量代谢物质水平,观察变化趋势,评估不同ASCP流量的脑保护效果。结果DHCA组T3、T4时间点、丙酮酸高于实验组,葡萄糖低于实验组（P〈0．05）,T3、T4、T5、T6时间点乳酸高于实验组（P均〈0．05）,T4时间点乳酸／丙酮酸比值、乳酸／葡萄糖比值、甘油高于实验组（P均〈0．05）;ASCP80组T2～T6时间点乳酸、丙酮酸、甘油、谷氨酸高于ASCP30组和ASCP50组,但差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论乳猪深低温停循环＋ASCP模型深低温体外循环模型中,ASCP维持在较低流量（30～50mL／（kg·min））可起到脑保护作用。     

慢性肺血减少性发绀幼猪模型建立与优化

目的:采用人工血管肺动脉-左心房分流与肺动脉环缩的方法建立慢性肺血减少性发绀幼猪模型.方法:6～8周龄幼猪分为2组.模型组7只先行人工血管肺动脉-左心房分流后环缩主肺动脉,对照组6只仅开胸.饲养4周后行2次手术,测量肺动脉环缩处压差及动脉血气分析.结果:对照组均存活,模型组存活6只.模型组建模4周后与建立初比较,动脉血氧饱和度、加(O2)和pH明显降低(P<0.05),而血红蛋白、血细胞比容和pa(CO2)均明显升高(P<0.01).肺动脉环缩处的压差由(1.37±0.81)kPa增至4周后的(2.62±0.63)kPa(P<0.05).4周后模型组的动脉血氧饱和度、pa(O2)、pa(CO2)、血红蛋白和血细胞比容与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:应用人工血管肺动脉-左心房分流与肺动脉环缩的方法成功建立慢性肺血减少性发绀动物模型,该模型创伤小、可重复性高,为发绀型肺血减少先天性心脏病的基础及临床研究提供可靠的模型平台和理论依据.     

法舒地尔逆转大鼠重度肺动脉高压实验研究

目的探讨法舒地尔对大鼠重度肺动脉高压及其组织病理改变的影响。方法左肺切除＋野百合碱注射建立大鼠重度肺动脉高压模型,雄性SD大鼠60只随机分为5组,A组为对照组,B组为肺动脉高压组,C,D,E组分别为法舒地尔30,50,lOOrag／（kg·d）干预肺动脉高压组。对各组大鼠进行生存分析,测量平均肺动脉压力、股动脉收缩压、右心室肥厚指数;弹力纤维染色分析肺血管病变;免疫组织化学法检测肺动脉平滑肌细胞凋亡率。结果C,D,E组生存率明显高于B组,C及D组生存率高于E组（P〈O．05）;4周后,c,D,E组平均肺动脉压力较B组明显降低,肺动脉中膜肥厚、内膜增生较B组明显减轻,肺动脉平滑肌细胞凋亡率较B组明显升高（P均〈o．05）;C及D组右心室肥大指数较B组降低（P〈O．05）;E组动脉收缩压较B组明显下降（P〈O．05）。结论中、小剂量法舒地尔可改善重度肺动脉高压大鼠的预后、逆转右心室肥厚及不同类型的肺血管病变。     

慢性发绀型肺血减少先天性心脏病幼猪模型的建立与病理学观察

目的:采用人工血管肺动脉(PA)-左心房(LA)分流与肺动脉环缩的方法建立慢性发绀型肺血减少先天性心脏病(先心病)幼猪模型。方法:将6～8 w龄幼猪分2组,肺血减少组7只,行人工血管PA-LA分流及PA远端环缩;对照组6只,仅开胸。饲养4 w后行二次手术,评估建模效果。结果:对照组均存活,肺血减少组存活6只。肺血减少组跨肺动脉环缩处收缩压差由(10.33±6.09)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)增至4 w后的(19.67±4.76)mmHg,P=0.011。与对照组比较,肺血减少组动脉血氧饱和度(SaO2)、动脉氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、血红蛋白含量(Hb)和血细胞比容(Hct)差异均有统计学意义(P<0.05)。2组幼猪肺脏、心脏组织比较有明显的病理学特征差异。结论:应用人工血管PA-LA分流与PA环缩的方法成功建立慢性发绀型肺血减少先心病动物模型,创伤小、可重复性高。     

血管紧张素转化酶2激活预防肺动脉高压的实验研究

目的:探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)激活,对肺叶切除联合野百合碱注射,诱导重度肺动脉高压(PAH)的预防作用。方法:左肺切除+野百合碱注射建立大鼠重度PAH模型。雄性SD大鼠50只,随机分为5组,A组为空白对照组、B组为Resorcinolnaphthalein(Res)对照组,C组为PAH组,D组为Res预防组,E组为Res+A-779干预组。测量平均肺动脉压力(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI);弹力纤维染色分析肺血管病变;ELISA、Western Blot分析肾素血管紧张素系统各主要成分的水平。结果:处理3 w后,C组大鼠mPAP、RVHI明显升高,出现了严重的肺动脉中膜肥厚、内膜增生(与A组比较,P<0.05),D组上述4项指标明显减轻(与C组比较,P<0.05);E组则比D组病变严重(P<0.05)。ACE、Ang-II及AT1R水平,D组明显低于C组(P<0.05),而ACE2、Ang-(1-7)及Mas水平D组明显高于C组(P<0.05)。结论:Res激活ACE2可以抑制重度肺动脉高压的形成,调节肾素血管紧张素系统的平衡,可能是其作用的主要机制之一。     

深低温停循环大鼠海马线粒体变化研究

目的探讨深低温停循环对大鼠海马线粒体的影响。方法 18只大鼠分为深低温停循环组、常温停循环组和常温不停循环组,每组6只,分别给予深低温停循环、常温停循环和常温不停循环处理。观察3组大鼠电镜下海马线粒体形态学、二维参数和三维参数变化。结果常温不停循环组大鼠海马线粒体呈长条形或椭圆形,基质均匀,大小正常,板状嵴及双层膜清晰;常温停循环组大鼠海马线粒体肿胀明显,部分呈空泡化,数量明显减少,板状嵴变形,双层膜破损,基质中出现絮状物;深低温停循环组海马线粒体轻度肿胀,数量减少,双层膜尚完整,板状嵴部分断裂,少数线粒体出现空泡化改变;深低温停循环组和常温停循环组大鼠海马线粒体直径[(116.22±7.23)、(154.26±6.41)μm]、周长[(433.6±15.2)、(594.7±17.0)μm]、灰度(131.2±12.4、133.4±11.8)、平均体积[(0.187±0.001)、(0.249±0.002)μm3]、数密度[(0.131±0.004)、(0.099±0.002)μm^2]和体积密度[(0.111±0.004)、(0.098±0.001)μm^(-3)]均大于常温不停循环组[(86.37±5.84)μm、(319.5±12.5)μm、108.7±8.6、(0.164±0.001)μm^3、(0.178±0.005)μm^2、(0.129±0.003)μm^(-3)](P<0.05),常温停循环组大鼠海马线粒体直径、周长、平均体积大于深低温停循环组,灰度、数密度和体积密度与深低温停循环组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血缺氧能引起海马线粒体肿胀,数量减少,深低温能改善海马线粒体结构和数量的改变。     

骨髓间充质干细胞移植调节TNF-α和IL-10浓度减轻十八稀酸诱导的大鼠急性肺损伤

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对十八稀酸诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法:颈静脉内注射十八稀酸(10μL/kg)建立大鼠ALI模型,实验组给于大鼠骨髓间充质干细胞悬浊液,对照组给于同等剂量磷酸缓冲(PBS)溶液。在不同时间点(8 h,24 h和48 h)处死大鼠,评价肺病理学特点、肺组织和血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)的浓度。结果:MSCs移植在不同时间点上均能显著性降低肺组织内中性粒细胞浸润,抑制肺组织和血浆内TNF-α浓度,同时升高IL-10浓度。结论:骨髓间充质干细胞移植,显著降低肺组织和血浆中TNF-α浓度时升高IL-10浓度,减低十八稀酸所致大鼠肺损伤,其可成为ALI和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)一种潜在的细胞治疗方法。