平滑肌细胞caveolae在大鼠肾动脉收缩反应调控中的作用研究

目的探讨平滑肌细胞caveolae在大鼠肾动脉对不同血管活性药物收缩反应中的作用及其机制。方法采用单独甲基-β环糊精(methyl-beta-cyclodextrin,MCD)或MCD和胆固醇(cholesterol,CHO)孵育肾动脉以减少和增加平滑肌细胞caveolae含量,并与未处理组[二甲基亚砜(DMSO)组比较]。采用电镜观察caveolae数量,采用血管环张力描记技术检测肾动脉对氯化钾(potassiurn chloride,KCl)、苯肾上腺素(phenylephrine,PE)和血管紧张素Ⅱ(angiotensin,AngⅡ)的收缩反应,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测法、荧光实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测caveolin-1及血管紧张素受体1型(Angiotensin type 1 receptor,AT1R)的基因和蛋白表达,采用免疫沉淀和Western blot检测caveolin-1与AT1R的结合。结果 MCD单独孵育可显著降低平滑肌细胞caveolae数量,而MCD与CHO共孵育则可使其恢复,MCD或CHO孵育均未影响caveolin-/基因和蛋白表达。MCD与CHO预处理后,肾动脉对KCl和PE的收缩反应无明显改变。但与未处理组相比,MCD单独孵育可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度显著降低(P0.05),收缩敏感性显著减弱(P0.05),而MCD与CHO共孵育则可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度及敏感性恢复正常水平。CHO与MCD对AT1R的蛋白表达水平无明显影响。在正常动脉,AngⅡ作用后caveolin-1与AT1R的结合显著增加(P0.05),而在MCD孵育动脉,这种反应被明显抑制,CHO则可使其恢复正常水平。结论平滑肌细胞caveolae是大鼠肾动脉收缩功能调控的重要机制,其主要通过影响caveolin-1与AT1R的结合而调控其下游通路。     

血管紧张素II经酸性鞘磷脂酶/神经酰胺通路致动脉内皮功能障碍的作用

目的 探讨酸性鞘磷脂酶（acid sphingomyelinase,ASM）/神经酰胺（ceramide,Cer）通路在血管紧张素II（angiotensin II,AngII）致动脉内皮功能障碍中的作用和机制。方法 针对对照组，低、中、高剂量AngⅡ组及ASM抑制剂地昔帕明（desipramine,Dpm）组，采用Western blot检测法、实时定量PCR和免疫荧光化学方法检测ASM、Cer、总内皮型一氧化氮合酶（total endothelial nitric oxide synthase,t-eNOS）和磷酸化eNOS（phosphorylated eNOS,p-eNOS）含量变化；采用血管环张力描记技术检测主动脉血管环的舒张功能；采用二氢乙啶（dihydroethidium,DHE）荧光探针检测血管环超氧阴离子（superoxide anion,O-2·）水平。结果 与对照组相比，AngⅡ孵育后主动脉对乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）的舒张反应显著降低（P<0.05），呈剂量依赖性，对硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）的舒张反应无明显改变；AngⅡ孵育组动脉ASM表达显著增加（P<0.05），Cer含量显著增多（P<0.05）；ASM抑制剂Dpm可显著抑制AngⅡ所致ASM和Cer改变（P<0.05），亦可使动脉对Ach的舒张反应恢复正常；AngⅡ可显著降低 动脉p-eNOS含量（P<0.05），增加O-2·水平（P<0.05），Dpm则可使p-eNOS增加 （P<0.05），降低O-2·（P<0.05）。结论 ASM/Cer可能通过抑制eNOS磷酸化并增加O-2·含量介导AngⅡI所致动脉内皮功能障碍。     

GnRH-a长方案中不同卵巢反应性患者的IVF实验室结局与最优扳机条件的探讨

目的 探讨体外受精(in vitro fertilization,IVF)-胚胎移植中,长方案患者不同卵巢反应性获卵数与正常受精数一致性相关因素,探寻长方案最佳的扳机时机以获得最理想的IVF实验室结局.方法 选择女方年龄＜40岁行长方案的患者.根据获卵数不同将卵巢反应性分为3组:低反应组(＜5个),正常反应组(5～16...     

模拟失重大鼠胸主动脉和腹主动脉S1P/S1PRs通路改变

目的 研究四周模拟失重对大鼠胸主动脉(TA)和腹主动脉（AA）1-磷酸鞘氨醇（S1P）及其受体（S1PRs）蛋白表达和分布的影响。 方法 SD大鼠28只，随机分为对照（CON）组和悬吊（HU）组，每组14只（n=14）。采用尾部悬吊建立大鼠模拟失重模型，时间为4周。苏木精-伊红（HE）染色观察动脉的结构变化，Western blot和免疫组织化学染色检测神经鞘氨醇激酶（SphK）1和（SphK）2、S1P裂解酶（SGPL）1、1-3型S1PRs（S1PR1、S1PR2、S1PR3）、增殖细胞核抗原（PCNA）和I型胶原蛋白（COL1）的蛋白表达和分布变化。 结果 悬吊4周后，与CON组相比，HU组TA的SphK1表达无明显改变，而SphK2和SGPL1表达降低（P<0.05），S1PRs表达和分布均无明显改变；同时，与CON组相比，HU组大鼠TA内-中膜厚度（IMT）和横截面积(CSA)增加，PCNA表达显著增加（P<0.05），但COL1表达无明显变化。与TA不同，与CON组比较，四周尾部悬吊后AA的SphK1、SphK2与SGPL1表达显著增加（P<0.05），S1PR1和S1PR3表达显著降低（P<0.05），IMT、CSA和PCNA表达无显著变化，但COL1表达显著减少（P<0.05）。此外，CON组AA的SphK1、SphK2、SGPL1、S1PR3、PCNA和COL1的蛋白表达均显著低于TA（P<0.05），S1PR1蛋白表达则高于TA（P<0.05），IMT与CSA均小于TA（P<0.05）。 结论 模拟失重大鼠TA与AA的S1P合成和降解过程发生部位特异性改变，可能与其平滑肌细胞增殖程度有关；S1P及其受体含量在TA和AA间存在部位差异。      

冻融胚胎移植周期中胚胎致密化的应用价值

目的 探讨冻融胚胎移植周期中，D4胚胎的致密化程度和数量对临床妊娠结局的影响，明确胚胎致密化对抱婴率的影响。方法 选择女方年龄<40岁行冻融胚胎移植的患者。根据移植胚胎致密化程度不同将移植周期分为3组：含有2个部分致密化或致密化以上胚胎组（A组）；含1个部分致密化或致密化以上胚胎组（B组）；不含部分致密化或致密化胚胎组（C组），对其种植率和临床结局进行分析。研究致密化胚胎的最终妊娠结局。结果 （1）年龄、体质量指数C组均显著低于A组。不孕年限、基础FSH、基础LH，基础E2采用非参数检验3组间差异无统计学意义（P> 0.05）。内膜准备方案，3组间差异无统计学意义（P>0.05）。移植日内膜厚度，C组显著高于A组（P <0.05）。（2）平均移植优质胚胎数A组、B组、C组依次降低，差异有统计学意义（P <0.05）。早期妊娠丢失率3组间差异有统计学意义（P <0.05）,B组升高且A组降低。抱婴率3组间差异有统计学意义（P <0.05）,A组与C组、B组比较差异有统计学意义（P <0.05）。结论 增加2枚部分致密化以上胚胎可以显著增加抱...