受体型酪氨酸磷酸酶的抗体制备与细胞定位研究

PCP 2是王红阳教授等于 1996年在胰腺癌细胞株中克隆并鉴定的受体型蛋白酪氨酸磷酸酶 (R PTPs)家族的新成员[1] ,可通过近膜区与重要的肿瘤相关基因 β catenin相互作用。cadherins catenins复合物与肌动蛋白细胞骨架作用 ,参与对细胞粘附的调节 ,这些粘着结构的异常已被证明可导致胚胎发育畸形 ,并与肿瘤、心血管系统疾病等密切相关[2 ,3 ] 。我们对PCP 2近膜区进行原核系统的表达 ,制备抗PCP 2多克隆抗体 ,以研究PCP 2与cadherins catenins复合物的相互作用及其在细胞粘附信号转导中的作用机制。一、材料和方法1.材料 :载体pGEX 5…     

HCCA1在原发性肝癌中的表达及其意义

目的 对近期克隆的新基因HCCA1与肝癌的相关性进行研究。方法 采用Northern杂交分析HCCA1 mRNA在肝癌中的表达,应用制备的特异性抗体检测其蛋白水平的表达,结合临床及病理学资料进行分析。结果 65例HCC患者在其癌组织中HCCA1 mRNA表达的检出率为90.8％（59／65）,其中91.5%(54/59)患者HCCA1 mRNA在肝癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,有13.8%(9/65)患者在癌旁组织中检测到较弱的HCCA1 mRNA的表达,86.2％（56／65）患者在癌旁组织中未检测到HCCA1 mRNA的,与病理指标的相关性分析表明,HCCA1 mRNA在Ⅲ-Ⅳ级肝癌中的表达水平明显高于Ⅰ-Ⅱ级肝癌,有门脉癌栓形成者的表达水平明显高于无癌栓形成者。免疫组织化学在蛋白水平上证实HCCA1在肝癌中的高表达。结论 HCCA1是一个新的肝癌相关基因,可能在肝癌的浸润和转移中起重要作用。     

抑癌基因PTEN的表达对大肠癌细胞转移侵袭能力的影响

目的探讨抑癌基因PTEN的表达大肠癌细胞转移侵袭能力的影响.方法1.利用western blot法检测不同转移潜能的大肠癌细胞系内PTEN蛋白的表达水平,说明PTEN蛋白的表达对大肠癌细胞转移潜能的影响,2.用脂质体作载体,将PTEN基因转染大肠癌细胞株LOVO后,采用计数细胞悬液加到粘附底物后20 min和120 min的细胞贴壁数用以测定细胞粘附能力,采用Costar的浸润小室检测PTEN基因转染前后细胞的浸润能力.结果1.转移潜能高的LOVO细胞PTEN的表达量显著低于转移潜能较低的HT-29,LS-174T,2.未转染细胞(LOVO)、转染pcDNA3.0-PTEN的细胞(LOVO/pcD-NA3.0-PTEN)在特异性粘附底物(Laminin)上20 min时贴壁率分别为18.6%±1.4%和13.9%±0.48%(P＜0.05),120min时贴壁率分别为71.2%±2.5%和56.0%±1.6%(P＜0.05),3.采用Costar的浸润小室对LOVO、LOVO/pcDNA3.0-PTEN细胞的浸润能力分析结果显示细胞悬液静置培养6 h后,对照细胞LOVO浸润穿透多聚碳膜的细胞数为11.7±1.74个,LOVO/pcDNA3.0-PTEN细胞穿透多聚碳膜的细胞数为7.5±1.58个(P＜0.05).结论在肿瘤细胞内抑癌基因PTEN的表达与大肠癌的转移侵袭行为密切相关.     

吸烟对支气管哮喘患者白细胞介素水平影响的研究

支气管哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾患,严重危害人群健康.目前已确知10余种细胞因子参与支气管哮喘发病机制的调节,细胞因子是一组由免疫效应细胞产生的、具有调节和决定免疫性质的分泌性蛋白,白细胞介素(IL)作为其中一种细胞因子已得到广泛研究.研究表明,白细胞介素在免疫球蛋白E(IgE)的合成、气道炎症的调节中发挥重要作用,并在这种炎症反应过程中对增强、维持和减轻炎症反应起了重要的调节作用.吸烟是不良生活方式中危害最大的一种,不仅严重危害吸烟者本人健康,引起癌症、高血压、冠心病、中风、慢性支气管炎和肺气肿等多种疾病,而且严重污染环境,危及周围的不吸烟者.本研究旨在探讨吸烟对支气管哮喘患者的白细胞介素水平的影响.……     

蛋白质组学技术筛选大鼠肝脏大部切除后肝再生相关差异表达蛋白

目的:应用蛋白质组学技术观察大鼠肝脏大部分切除术后蛋白表达情况,筛选肝脏切除后肝再生相关的差异表达蛋白.方法:大鼠随机分为肝大部切除组(n=35)和假手术对照组(n=5).肝大部切除组大鼠无菌条件下切除肝左外叶、左中叶和中叶共约70%肝脏;假手术组大鼠仅开腹,不行肝大部切除.肝大部切除术后不同时间点(2、12、24、36、48、72、168 h)各处死5只大鼠,取右叶肝组织,提取大鼠肝脏总蛋白,以假手术组为对照,进行二维电泳和质谱分析,筛选差异表达蛋白,并对其中差异显著蛋白进行Western印迹鉴定.结果:电泳图谱显示肝脏70%切除术后2 h差异表达蛋白点开始增多,36 h达到高峰;共筛选出78个差异表达蛋白点,质谱技术鉴定出其中35个有意义的蛋白点.35个差异蛋白根据动态变化趋势可分为5类:3类丰度上调蛋白和2类丰度下调蛋白(各自间上调或下调时间和幅度均有所差异);这些蛋白主要涉及以下代谢途径:氧化应激反应、急性期反应蛋白、脂类代谢蛋白、能量代谢的酶类、信号转导、神经递质降解等,部分蛋白功能未知.Western印迹鉴定证实其中的prohibitin蛋白在肝大部切除术后2 h开始上调,36 h达高峰,48 h后趋于正常水平.结论:多种信号和代谢途径参与肝脏大部切除后的肝脏再生过程.     

麦粒灸干预甲状腺功能减退大鼠免疫应答的实验研究

目的 观察麦粒灸对甲状腺功能减退(简称甲减)大鼠免疫应答的影响,探究麦粒灸对甲状腺功能减退大鼠的保护作用。方法 将30只SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、麦粒灸组,共3组。除空白组外,其余组用丙硫氧嘧啶灌胃的方法进行甲减疾病造模。麦粒灸组采用麦粒柱于大椎、脾俞(双)、肾俞(双)、命门施灸,持续4周。治疗结束后,取脾脏,后分离胸腺和甲状腺,取血清用ELISA方法检测游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、促甲状腺素(thyrotropin,TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibodies,TGAb)、干扰素(interferon γ,I IFN-γ)、白介素10(interleukin 10,IL-10)、转化生长因子β₁(transforming growth factor-β,TGF-β₁);并运用免疫组化染色酶法...     

《中国肿瘤生物治疗杂志》“转化医学”栏目征稿启事

近年来,在世界范围内肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)的发生率逐年上升.约20％的肾癌患者在疾病诊断时已经发生肿瘤的进展转移,而且近30％的局限性肾癌患者在肿瘤切除后会发生复发转移.受体酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼(Sunitinib,Sutent(R))被作为进展性肾癌患者的一线治疗方案.但是10％～20％的进展性肾癌患者在初次治疗时就对舒尼替尼先天耐药,其余的患者往往在接受舒尼替尼治疗6至15个月后出现耐药和疾病进展,这些现状使得舒尼替尼并不能有效延长肾癌患者的生存期.许多研究提出信号转导旁路的活化可能是肾癌舒尼替尼耐药的潜在原因,然而其生物学机制尚待阐明.另一方面,目前尚缺乏预测舒尼替尼治疗疗效的生物学标志物.因此,探索肾癌舒尼替尼耐药的生物学机制以及寻找预测舒尼替尼治疗疗效的生物学标志物十分迫切.LncRNA可多水平调节基因表达,与miRNA、mRNA或蛋白质结合发挥转录后水平的调控.LncRNA参与调节肿瘤的多种生物学特性,包括增殖、凋亡、转移、代谢等,然而IncRNA在肿瘤耐药尤其是舒尼替尼耐药中的作用尚未见报道.第二军医大学长征医院泌尿外科王林辉教授团队探讨IncRNA在肾癌舒尼替尼耐药中的生物学作用及分子机制,为舒尼替尼抵抗的肾癌患者提供新的联合治疗靶点,并寻找可预测肾癌患者对舒尼替尼治疗反应性的组织学和血清学标志物,为肾癌的个性化治疗提供重要参考.该成果发表于Cancer Cell杂志[2016,29(5):653-668].     

大剂量沐舒坦持续泵入在肺癌合并慢性阻塞性肺疾病患者肺叶切除术术后的疗效观察

目的探讨大剂量沐舒坦在肺癌合并慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）患者行肺叶切除术后的疗效观察。方法将40例肺癌合并COPD行肺叶切除术后的患者随机分成两组,治疗组（n=20）持续静脉泵入大剂量沐舒坦（900 mg/d,连续7 d）;对照组（n=20）持续静脉泵入常规剂量沐舒坦（90 mg/d,连续7 d）,比较两组患者术后氧合指数、机械通气时间和发生肺不张、肺炎的差异。结果治疗组与对照组比较,术后7 d氧合指数差异有统计学意义（P〈0.05）;两组机械通气时间、肺不张发生率及肺炎发生率比较差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论在肺癌合并COPD患者行肺叶切除术后应用大剂量沐舒坦能改善氧合,有可能缩短机械通气时间及降低肺不张、肺炎的发生率。     

凝血系统的变化与肺间质纤维化关系的研究进展

肺间质纤维化是各种病因不同的肺间质疾病的共同结局,其共同特征是成纤维细胞为主的大量间质细胞增生及基质胶原进行性积聚,并逐渐取代正常肺组织结构,严重影响肺的通气和换气功能,导致呼吸衰竭.有关间质性肺疾病的病因及发病机制仍未阐明.近年来研究发现,凝血系统的异常变化可能参与了间质性肺疾病的肺纤维化过程.本文对其研究进展综述如下.     

CT 导引支气管镜肺泡灌洗对治疗重症肺炎合并脓毒症休克的效果

目的：探讨CT导引支气管镜肺泡灌洗对治疗肺感染合并脓毒症休克的疗效。方法对重症医学科2012年10月-2013年6月收治的47例重症肺炎合并脓毒症休克患者的临床资料进行回顾性分析。患者入选标准参照2001年国际脓毒症会议。将入选患者随机分为C T 导引支气管镜肺泡灌洗组（A组）和对照组（B组）,二组均行早期目标导向治疗（EGDT ）,CT 导引支气管镜肺泡灌洗组给予支气管镜肺泡灌洗连续做3d ,1次／d ,而对照组不给予支气管肺泡灌洗。记录患者年龄,性别,开始试验时、治疗后3d、7d的APACHEⅡ评分、肺感染评分、白细胞计数,乳酸降至2mmol／L的时间,机械通气时间,ICU住院时间。结果 A、B二组性别、年龄差异无统计学意义（P＞0．05）,开始治疗时APACHEⅡ评分、肺感染评分以及开始治疗时二组白细胞计数差异无统计学意义（P＞0．05）;治疗后3d和7d时 A组 APACHEⅡ评分、肺感染评分、白细胞计数明显低于B组（P＜0．05）;A组乳酸降至2mmol／L的时间、机械通气时间和ICU住院时间明显短于B组（P＜0．05）;CT 导引支气管镜肺泡灌洗操作无任何并发症的发生。结论CT导引支气管镜肺泡灌洗对治疗重症肺炎合并脓毒症休克患者安全有效,值得临床推广。