牛蒡根4种提取物体外抗肿瘤活性的比较研究

目的:研究牛蒡根4种提取物体外抗肿瘤活性。方法:以系统溶剂分离法分别提取牛蒡根的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇部位。采用MTT法检测4种提取物对人乳腺癌细胞MCF-7、人胃腺癌细胞BGC-823、小鼠肝癌细胞HepA、肉瘤细胞S180和小鼠脾淋巴细胞生长的抑制作用。结果:牛蒡根石油醚、氯仿、乙酸乙酯3种提取物对MCF-7细胞和BGC-823细胞在体外有一定生长抑制作用;牛蒡根4种提取物对HepA细胞、S180细胞和小鼠脾淋巴细胞在体外有一定的生长抑制作用。结论:牛蒡根石油醚、氯仿、乙酸乙酯提取物体外具有一定的抗肿瘤活性,这种作用与增强细胞免疫活性无关。     

不同治则方剂对5-氟尿嘧啶化疗增效作用的实验观察

目的 观察不同治则方剂对5-氟尿嘧啶(5-Fu)疗效的影响.方法 设计清热解毒、活血化淤、扶正固本、化痰祛湿、益气养血、软坚散结6种治则方剂,中药血清药理通法获取含药血清.MTT法检测10%和20%含药血清对人乳腺癌(MCF-7)细胞生长的影响以及其对5-Fu化疗作用的影响.小鼠肿瘤艾氏腹水癌(EAC)动物模型观察软坚散结方对5-Fu化疗的增效作用.结果 血清药理体外实验显示,与对照组相比,6种方剂含药血清均显示出对5-Fu化疗不同的增效作用,其中以软坚散结方和化痰祛湿方效果较好,软坚散结方体内实验亦表现出明确的增效作用.结论 血清药理学实验可用于中药方剂对化疗药物增效作用的筛选,其体外与体内实验存在相关性.     

紫杉醇原位凝胶在EAC荷瘤小鼠体内药动学研究

目的:考察紫杉醇原位凝胶制剂PECT/PTX小鼠瘤体内植入后的药动学特点,评价该制剂是否具有控释、缓释作用。方法:对EAC荷瘤小鼠分别进行PECT/PTX瘤体内给药(A组,40 mg·kg^-1),PTX瘤体内给药(B组,40 mg·kg^-1)和PTX腹腔给药(C组,40 mg·kg^-1),给药后于设定的时间点采血,应用HPLC法测定血浆中PTX的含量,DAS 2.1.1药动学分析软件计算主要药动学参数。结果:血浆中A、B、C 3组的C_max分别为(2.23±0.16),(25.25±0.83),(258.38±10.34)mg·L^-1;t_1/2分别为(473.81±195.13),(10.89±0.87),(17.87±6.29)h;AUC_0-t分别为(623.57±23.48),(340.72±2.73),(843.35±25.93)mg·L^-1·h;V_d分别为(17.01±2.24),(1.76±0.13),(1.07±0.25)L·kg^-1;CL分别为(0.024±0.010),(0.105±0.001),(0.040±0.004)L·h^-1·kg^-1。与B组相比,A、C 2组主要药动学参数均具有显著的统计学差异(P<0.01)。结论:PECT/PTX原位凝胶制剂瘤体内给药具有缓慢释放PTX的作用。     

非酒精性脂肪性肝病中西医结合诊疗共识意见(2017年)

基于G蛋白偶联胆汁酸受体(G protein-coupled bile acid receptor,TGR5)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor 3,NLRP3)信号通路,探讨活血清解灵干预非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠炎症反应的作用机制。

将70只SD雄性大鼠随机分为5组,分别为对照组20只,模型组20只,阿托伐他汀阳性药组和活血清解灵高、低剂量组各10只。对照组给予维持饲料,其余各组均给予高脂饲料,通过模型评价确定于第20周末NASH大鼠模型造模成功。造模成功后,对照组和模型组灌胃生理盐水,阿托伐他汀阳性药组,活血清解灵高、低剂量组灌胃给予相应药物,每日1次,连续4周。第24周末处死大鼠,计算肝指数,全自动生化仪检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,HE、油红O染色观察肝脏组织病理变化,Western blotting、免疫荧光法检测肝脏组织TGR5及NLRP3蛋白表达,ELISA试剂盒检测肝脏组织白细胞介素18(IL-18)及白细胞介素1β(IL-1β)含量。

活血清解灵能显著改善NASH大鼠一般状态,各剂量组均能显著降低大鼠体质量、肝指数(P<0.01),血清TG、TC含量和ALT、AST活性水平显著下降(P<0.01),病理结果提示活血清解灵能明显改善肝脏脂肪变、炎症及气球样变,TGR5蛋白表达显著上升(P<0.01),NLRP3蛋白表达及IL-18、IL-1β含量均显著下降(P<0.01,P<0.05)。

活血清解灵能够明显改善NASH大鼠状态,抑制其肝脏脂肪变和炎症反应,其作用机制可能与抑制TGR5/NLRP3信号通路传导密切相关。

     

柴胡桂枝汤减轻慢性胰腺炎神经性腹痛机制的探讨

目的：探讨柴胡桂枝汤(CHGZT)减轻三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠慢性胰腺炎(CP)神经性腹痛的初步机制。方法：50只雄性SD大鼠随机均分为5组,分别为假手术组、模型组、CHGZT低、中、高剂量组(4、8、16 g·kg^-1)。假手术组轻轻翻动胰腺后即关腹,模型组采用向胰管内逆行注射2%TNBS-10%乙醇。CHGZT在造模后4周开始灌胃给药,连续2周。5组大鼠分别于术后6周进行Von Frey疼痛阈值检测;苏木素-伊红(HE)染色评估胰腺组织慢性炎症及纤维化病变;免疫组化法(IHC)检测PGP9.5蛋白表达,同时观察神经周围炎性改变;IHC及免疫荧光(IF)染色观察胰腺相关胸段脊髓后角离子钙结合蛋白-1(Iba-1)、嘌呤能受体P2X7(P2RX7)的定位及P2RX7和小胶质细胞的共表达。结果：与假手术组比较,模型大鼠胰腺组织腺泡萎缩评分、炎性浸润评分、纤维化评分显著增高(P<0.01),大鼠在不同力值疼痛反应值均明显升高(P<0.05,P<0.01),PGP9.5周围炎性浸润评分显著升高(P<0.01),模型组大鼠脊髓后角Iba-...     

牛蒡根氯仿提取物有效组分分离及其抗肿瘤活性的研究

目的:通过生物活性追踪法对牛蒡根氯仿提取物进行分离提取,研究其抗肿瘤有效组分及可能的作用机制。方法:牛蒡根氯仿提取物经硅胶柱洗脱分离得到不同组分。用S180细胞和K562细胞经 MTT法筛选活性组分;流式细胞术检测活性组分对K562细胞周期及凋亡的影响;小鼠淋转实验验证活性组分对小鼠免疫功能的影响;MTT法观察活性组分对耐药细胞K562/O2的逆转作用。结果:牛蒡根氯仿 提取物分离鉴定后得到甾体类组分（L-1）、三萜类组分（L-2）、L-3和L-4 4个组分。各组分对S180细胞均显示很强的细胞毒作用,其IC50值均在10 μg/mL以下。而K562细胞对甾体类组分和三萜类组分 敏感度较高,IC50值分别为204.50 μg/mL和117.56 μg/mL;三萜类组分可使K562细胞 G0/G1期细胞比例较对照组的45.52%增加至53.82%,S期细胞比例由对照组的45.68%减少到37.11%（均P<0.05）;甾 体类组分和三萜类组分分别将K562细胞凋亡率由5.1%增加至21.8%和38.0%（均P<0.01）。三萜类组分对小鼠淋巴细胞存在一定促进增殖作用,而甾体类组分与阿霉素合用后K562/O2细胞耐药指数由1 165 降低至46８（P<0.01）。结论:牛蒡根氯仿提取物中的甾体类组分和三萜类组分影响细胞周期、诱导细胞凋亡并在免疫调节和肿瘤耐药性方面发挥抗肿瘤作用。     

活血清解灵对胆汁淤积肝病大鼠胆汁酸代谢的影响

目的探讨活血清解灵对胆汁淤积性肝病大鼠胆汁酸代谢的影响。方法将48只大鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、复方甘草酸苷胶囊组、活血清解灵低、中、高剂量组。除空白组外,其余组以α-异硫氰酸萘酯(ANIT,100 mg/kg)灌胃1次,制备胆汁淤积性肝病模型。复方甘草酸苷胶囊组予0. 023 g/kg复方甘草酸苷胶囊,活血清解灵低、中、高剂量组分别给予4. 1、8. 1、16. 2 g/kg活血清解灵连续灌胃给药4 d。第5天进行胆管插管手术留取胆汁,通过LC-MS/MS测定各组大鼠胆汁中18种胆汁酸的含量,腹主动脉取血检测各组血清总胆红素和总胆汁酸含量,Western blotting法检测肝组织中牛磺胆酸钠转运蛋白(NTCP)含量。结果与空白组比,模型组胆汁中各胆汁酸成分浓度均下降(P均<0. 05),仅牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)浓度增高(P <0. 05),血清中总胆红素和总胆汁酸含量增高(P均<0. 05),肝组织中NTCP含量降低(P <0. 01);与模型组相比,活血清解灵高剂量组胆汁中去氧胆酸(DCA)、牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)、牛磺猪去氧胆酸...     

重症急性胰腺炎大鼠血浆中6种线粒体N-甲酰肽及胰腺FPR1的表达研究 #br#

目的 检测重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血浆中6种线粒体N-甲酰肽（NFPs）及胰腺中甲酰肽受体1（FPR1）的表达情况,探讨其与SAP病程进展的关系。方法 30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAP模型3 h组和SAP模型6 h组,每组10只。假手术组仅在开腹后轻轻翻动胰腺后关闭腹腔;SAP模型3 h组和SAP模型6 h组均通过胆胰管内逆行注射5%牛磺胆酸钠（50 mg/kg）制备SAP大鼠模型,并分别于SAP造模3 h后和SAP造模6 h后取材。苏木素-伊红染色法观察胰腺组织病理变化;免疫组织化学法检测胰腺中FPR1的表达水平;蛋白质免疫印迹法检测血浆中6种线粒体NFPs的表达水平。结果 与假手术组比较,SAP模型3 h组和SAP模型6 h组的胰腺均发生明显出血、腺泡细胞坏死、炎性细胞浸润、水肿等病理改变,病理评分明显升高,且SAP模型6 h组更高（P＜0.05）。免疫组化结果显示SAP模型3 h组和SAP模型6 h组的胰腺组织FPR1表达水平均较假手术组升高,SAP模型6 h组更高（P＜0.05）。6种线粒体NFPs的表达水平出现不同变化,其中MT-ND1、MT-ND3和MT-ND6随着SAP造模时间延长表达逐渐增加（P＜0.05）,MT-ND4则呈递减趋势（P＜0.05）,MT-ND5在3组中表达无明显差异。结论 FPR1和部分线粒体N-甲酰肽与SAP病程进展密切相关,且可能与SAP的过度炎症反应和炎症级联放大有关。     

美登木素对人乳头状甲状腺癌B-CPAP细胞增殖和凋亡的作用及机制

目的 探讨美登木素对人乳头状甲状腺癌B-CPAP细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法 用不同浓度（0.19、0.76、3.05、12.21、48.83、195.31、781.25、3 125 nmol/L）的美登木素溶液处理B-CPAP细胞,SRB法检测B-CPAP细胞增殖情况。将B-CPAP细胞分为对照组及美登木素（0.1、1、10 nmol/L）组,光学显微镜观察B-CPAP细胞形态变化;流式细胞术检测B-CPAP细胞凋亡情况;Western blotting法测定B-CPAP细胞中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3前体（Procaspase-3）的蛋白表达量。结果 与对照组比较,美登木素能有效抑制B-CPAP细胞增殖,且呈浓度及时间相关性;随美登木素浓度增加B-CPAP细胞凋亡率逐渐升高,Bcl-2和Procaspase-3蛋白表达水平下降（P＜0.05）,呈明确的浓度相关性。结论 美登木素具有抑制B-CPAP细胞增殖及诱导凋亡的作用,其机制可能与调控Bcl-2和Procaspase-3蛋白有关。     

益肺通络方对低氧性肺血管重建大鼠无肌型肺小动脉肌化的影响

目的:观察益肺通络方对低氧性PVR大鼠无肌型肺小动脉血管重建的影响。方法:采用气管注入脂多糖联合烟熏法建立COPD大鼠模型,并叠加低氧建立PVR大鼠模型。60只Wistar大鼠随机分成空白、模型、实验高、中、低剂量5组,每组12只,空白、模型组生理盐水灌胃,实验组按高剂量(含药1.5 g/m L)、中剂量(含药1.0 g/m L)、低剂量(含药0.5 g/m L)益肺通络方煎剂灌胃。4、5、6周3个时点取材,计算3型肺小动脉百分比。结果:3型肺小动脉百分比,空白组各时点无明显改变(4周≈5周≈6周),模型组无肌型动脉呈减少趋势(4周5周6周),部分肌型动脉呈增加趋势(4周5周6周),0~4周无肌型动脉减少快,4~6周减少慢。无肌型动脉百分比,实验组各时点变化趋势均同模型组,组内分析,4周~6周比较,差异均有统计学意义(P0.05);各时点组间比较,均表现为模型组实验低剂量组实验中剂量组实验高剂量组空白组,各实验组与模型组比较,各实验组组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益肺通络方能抑制慢性低氧PVR大鼠肌型肺小动脉中膜增殖,且存在量效关系。