NHE1反义基因磁性纳米微粒对SGC-7901胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨NHE1反义基因磁性纳米微粒对SGC-7901胃癌细胞株增殖和凋亡的影响,探索胃癌基因治疗的新方法。方法:构建NHE1反义基因真核表达载体和NHE1反义基因磁性纳米微粒,将NHE1反义基因转染至SGC-7901胃癌细胞中,比较观察细胞转染前后生长曲线、细胞周期和细胞凋亡率的变化。结果:氧化铁磁性纳米颗粒成功地将NHE1反义基因转染至SGC-7901胃癌细胞中。NHE1反义基因能使SGC-7901胃癌细胞生长速度减慢、体外生长增殖能力降低,转染NHE1反义重组质粒的SGC-7901胃癌细胞增殖指数为34.73%,低于SGC-7901细胞的38.95%;NHE1反义基因使SGC-7901胃癌细胞凋亡率增加,转染NHE1反义重组质粒的SGC-7901胃癌细胞凋亡率为11.75%,显著高于SGC-7901胃癌细胞凋亡率(3.85%,P<0.01)。结论:NHE1反义基因磁性纳米微粒能抑制SGC-7901胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,具有良好的治疗效果,有一定的临床应用前景。     

根除幽门螺杆菌对胃窦黏膜萎缩的逆转作用

目的 评价5a随访根除幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）感染对胃窦黏膜萎缩的逆转作用并探讨其机制。方法 采用前瞻性队列研究方法，选择110例慢性萎缩性胃窦炎患者作为观察对象。Hp阳性患者根据自愿原则采用根除Hp治疗或采用对照治疗。全部病例跟踪随访5a。采用TUNEL技术及免疫组化染色检测胃黏膜上皮细胞凋亡和增殖情况。结果 Hp阳性观察组患者胃黏膜萎缩程度在5a中加重的比例高达43％，显著高于Hp根除观察组及Hp阴性对照组（13％和20％，P〈0．05）。Hp根除观察组胃窦黏膜萎缩程度减轻的病人比率为29％，显著高于Hp阳性观察组（9％，P〈0．01）。Hp阳性患者胃黏膜上皮细胞凋亡指数及PCNA指数（12．7％，14．6％）均显著高于Hp阴性患者（2．9％，8．0％，P〈0．01），Hp根除后胃黏膜上皮细胞PC—NA指数和凋亡指数（14．3％，12．9%）均显著下降（9.2％，3．6％，P〈0．01），而Hp未根除者上述指标则无显著性变化。结论 Hp感染可能通过刺激胃黏膜上皮细胞凋亡与增殖的调节紊乱，促进胃窦黏膜萎缩的形成与发展。根除Hp治疗可以使胃寞黏膜萎缩程度减轻和逆转。     

基因芯片技术在食管癌研究中的应用进展

基因芯片技术是近几年发展起来的前沿生物技术，其高通量、快速、平行化采集生物信息的特点更是优于其他传统的技术方法，为研究肿瘤细胞生长各期与肿瘤生长相关基因的表达模式提供了强有力的工具。基因芯片技术不断应用于食管癌及其癌前疾病的研究中，为揭示食管癌发生发展的分子机制起到了巨大的促进作用．其特异的靶分子可以成为食管癌血清学诊断标记和基因治疗的靶标。现对基因芯片技术在食管癌研究中的应用进展作一简要概述。     

程序性细胞死亡因子4过表达对胃癌细胞BGC823凋亡及凋亡调控蛋白的影响

目的通过稳定转染程序性细胞死亡因子4（programmed cell death4,PDCIM）基因至胃癌细胞BGC823中,观察过表达PDCD4对BGC823凋亡的作用及对凋亡相关调控蛋白Akt／p-Akt、FLIP、caspase-8及cleaved-caspase-8的影响。方法构建针对人PDCD4的真核表达载体并转染至BGC823细胞,Annexin V—FITC／PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测蛋白的表达。结果成功构建PDCD4真核表达载体并转染至BGC823中,获得稳定过表达PDCD4的细胞模型,过表达PDCD4的BGC823细胞凋亡率（10．82％±1．29％）较未转染组（5．06％±0．83％）明显升高（P〈0．05）。转染PDCD4后,Akt／p-Akt表达（0．25±0．04／0．06±0．01）较未转染组（0．65±0．09／0．18±0．02）明显降低（P〈0．01）,FLIP蛋白在转染组中的表达（0．12±0．01）较未转染组中的表达（0．48±0．06）明显降低（P〈0．01）,而转染组caspase-8（0．36±0．07）及cleaved—caspasc-8（0．24±0．05）较未转染组caspase-8（0．18±0．04）及cleaved-caspase-8（0．11±0．02）明显升高（P〈0．05）。结论PDCD4过表达可促进胃癌细胞BGC823的凋亡,并且抑制Akt和FLIP的表达,从而促进caspase-8的活性。     

PBL教学法在消化内镜临床进修教学中的实施和效果

＂以问题为基础的学习＂（problem-based learning,PBL）教学模式是一种以问题为基础,以学生为中心,以教师为引导的一种新的教学模式。与传统的＂以授课为基础的学习（lecture based learning,LBL）”教学模式相比,在设计理念、实施方式、评估体系、实际效果等方面,均有根本区别。目前已成为国际上较流行的一种教学方法,也逐渐成为我国医学教育模式改革的趋势。我院消化内镜中心对来自全国各地的临床进修生实施了PBL教学法,与LBL教学模式相比较,取得更好效果。     

脱氧胆酸在酸性环境下促进正常食管鳞状上皮细胞表达BMP4

背景：骨形态发生蛋白4（BMP4）是Barrett食管（BE）上皮的标记性蛋白,可调节CDX2表达以及促进肠化生,但其在BE中表达上调的机制尚不明。脱氧胆酸（DCA）是BE发生的重要环境因素。目的：探讨DCA对正常食管鳞状上皮细胞BMP4及其第二信使Smad1表达的影响。方法：培养原代正常食管鳞状上皮细胞．采用不同浓度DCA与pH值酸处理细胞。分别以实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质印迹法检测BMP4、Smad1 mRNA和蛋白表达。结果：DCA在酸性环境下可呈浓度依赖性地增强正常食管鳞状上皮细胞表达BMP4．同时100μmol／LDCA可促进Smad1表达,200μmol／LDCA的作用则相反。结论：DCA可能通过促进BMP4和BMP信号通路相关蛋白表达而参与BE的发生.     

慢传输型便秘大鼠结肠肌电变化机制

目的:研究慢传输型便秘(STC)大鼠的结肠肌电变化,并从神经病理学的角度初步探讨其发生机制.方法:应用复方苯乙哌啶建立大鼠慢传输型便秘模型,采用电生理技术进行结肠肌电检测.利用铺片技术制作结肠肌间神经丛标本,采用免疫组织化学法在铺片上显示大鼠结肠肌间神经丛内VIP能神经和SP能神经的分布及形态学改变.结果:模型组大鼠结肠慢波出现双向改变,部分大鼠结肠慢波频率明显减慢[(5.55±1.20)次/min vs对照组(13.20±1.09)次/min,P＜0.01],振幅增加[(0.43±0.05)mV vs对照组(0.19±0.02)mV,P＜0.01],波形仍表现为不规则的近似正弦波样曲线;部分大鼠结肠慢波频率出现快速性改变[(30.85±3.86)次/min vs对照组(13.20±1.09)次/min,P＜0.01],振幅强弱不等[(0.21±0.03)mV vs对照组(0.19±0.02)mV,P＜0.01],波形较不稳定,且出现基线位移.模型组大鼠结肠慢波频率和振幅变异系数分别为22.2%,12.5%和11.8%,15.1%,均显著高于对照组大鼠(8.3%和8.4%,P＜0.01).免疫组化染色发现模型大鼠VIP阳性神经节及节间束细小,节内神经元数量明显减少,神经束内神经纤维分布稀疏,阳性神经元胞体少见,其平均面密度值为19.35±1.13,显著低于对照组(23.08±1.82,P＜0.01).SP阳性神经节明显增大,神经束增粗,神经元和神经纤维明显增多,免疫反应性增强,平均面密度值为18.14±1.18,显著高于对照组(15.45±1.05,P＜0.01).结论:结肠慢波异常可能是导致慢传输型便秘结肠传输减慢的重要因素.结肠传输功能障碍可能与结肠肌间神经丛VIP和SP能神经病理改变或(和)功能障碍有关.     

NHE1反义基因磁性纳米微粒对SGC-7901胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨NHE1反义基因磁性纳米微粒对SGC-7901胃癌细胞株增殖和凋亡的影响，探索胃癌基因治疗的新方法。方法：构建NHE1反义基因真核表达载体和NHE1反义基因磁性纳米微粒，将NHE1反义基因转染至SGC-7901胃癌细胞中，比较观察细胞转染前后生长曲线、细胞周期和细胞凋亡率的变化。结果：氧化铁磁性纳米颗粒成功地将NHE1反义基因转染至SGC-7901胃癌细胞中。NHE1反义基因能使SGC-7901胃癌细胞生长速度减慢、体外生长增殖能力降低，转染NHE1反义重组质粒的SGC-7901胃癌细胞增殖指数为34．73％，低于SGC-7901细胞的38．95％；NHE1反义基因使SGC-7901胃癌细胞凋亡率增加，转染NHE1反义重组质粒的SGC-7901胃癌细胞凋亡率为11．75％，显著高于SGC-7901胃癌细胞凋亡率（3．85％，P〈0．01）。结论：NHEl反义基因磁性纳米微粒能抑制SGC-7901胃癌细胞增殖，诱导细胞凋亡。具有良好的治疗效果，有一定的临床应用前景。     

大黄对慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛胆碱能神经的影响

目的 研究大黄治疗慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛内胆碱能(AchE) 神经的变化,从神经病理学角度初步探讨大黄治疗慢传输型便秘的机制.方法 建立大鼠慢传输型便秘模型,大黄治疗后利用铺片技术制作结肠肌间神经丛标本,采用组织化学技术行结肠肌间神经丛内AchE神经染色.结果 结肠肌间神经丛铺片组化染色发现便秘大鼠结肠肌间神经丛内胆碱能神经分布较稀疏,数量较少,但胞体增大,染色加深.大黄治疗组大鼠结肠肌间神经丛中的胆碱能神经分布趋于正常,胆碱能阳性神经元较多(阳性细胞数25.71±5.36与便秘组14.32±4.60,P<0.01;核浆比例0.71±0.21与便秘组0.58±0.19,P<0.01).结论 慢传输型便秘大鼠结肠传输功能障碍与肠壁内胆碱能的病理改变和(或) 功能障碍有关.大黄使便秘大鼠结肠肌间神经丛中的胆碱能神经分布趋于正常,可能是其调节结肠功能、治疗慢传输型便秘的机制之一.