ACE2基因通过调控Nrf2/HO-1通路改善肾缺血再灌注损伤

目的 探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞HK-2氧化应激、炎症、凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响。 方法 将ACE2慢病毒转染HK-2细胞,按照实验需要分为常氧组(Control组)、缺氧复氧模型组(H/R组)、缺氧复氧转染阴性对照慢病毒组(H/R-NC组)和缺氧复氧转染ACE2慢病毒组(H/R-ACE2组)。细胞经H/R处理后,通过CCK-8法检测细胞活力;RT-PCR及ELISA法检测炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平;比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)表达水平;Western blotting法检测胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、Nrf2、HO-1的蛋白水平。采用Nrf2抑制剂ML385以及HO-1抑制剂SnPPIX抑制Nrf2/HO-1通路,Western blotting法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、Nrf2、HO-1的蛋白表达水平变化,比色法检测SOD和MDA表达变化。 结果 与Control组相比,H/R组细胞活力降低(t=7.58,P<0.001),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均增加(t_MDA=11.08,P_MDA<0.001;t_PCR-IL-6=5.82,P_PCR-IL6<0.001;t_PCR-TNF-α=7.69,P_PCR-TNF-α<0.001;t_PCR-IL-1β=4.80,P_PCR-IL-1β=0.001;t_ELISA-IL-6=34.11,P_ELISA-IL-6<0.001;t_ELISA-TNF-α=14.12,P_ELISA-TNF-α<0.001;t_ELISA-IL-1β=9.63,P_ELISA-IL-1β<0.001;t_Caspase-3=2.73,P_Caspase-3=0.026;t_Bax=27.75,P_Bax<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平下降(t_SOD=7.74,P_SOD<0.001;t_Bcl-2=75.49,P_Bcl-2<0.001;t_ACE2=11.41,P_ACE2<0.001)。与H/R组相比,H/R-ACE2组细胞活力增加(t=3.61,P=0.002),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均下降(t_MDA=6.15,P_MDA<0.001;t_PCR-IL-6=3.34,P_PCR-IL-6=0.006;t_PCR-TNF-α=3.65,P_PCR-TNF-α=0.007;t_PCR-IL-1β=4.06,P_PCR-IL-1β=0.004;t_ELISA-IL-6=14.62,P_ELISA-IL-6<0.001;t_ELISA-TNF-α=10.42,P_ELISA-TNF-α<0.001;t_ELISA-IL-1β=8.65,P_ELISA-IL-1β<0.001;t_Caspase-3=3.74,P_Caspase-3=0.006;t_Bax=30.52,P_Bax<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平增加(t_SOD=3.58,P_SOD=0.007;t_Bcl-2=63.86,P_Bcl-2<0.001;t_ACE2=58.72,P_ACE2<0.001),Nrf2/HO-1信号通路被激活蛋白水平增加(t_Nrf2=44.55,P_Nrf2<0.001;t_HO-1=14.19,P_HO-1<0.001)。然而ML385和SnPPIX处理会抑制ACE2基因过表达在H/R中HK-2细胞的保护作用(F_Bax=11.02,P_Bax=0.003;F_Bcl-2=21.48,P_Bcl-2<0.001;F_Caspase-3=20.80,P_Caspase-3<0.001;F_SOD=133.49,P_SOD<0.001;F_MDA=14.06,P_MDA=0.001)。 结论 ACE2在HK-2细胞缺氧复氧损伤中具有抑制氧化应激、调节炎症、改善凋亡的作用,Nrf2/HO-1信号通路发挥重要作用。     

流式细胞仪交叉配型对移植肾1年存活率的影响

目的：探讨流式细胞仪交叉配型（flow cytometry crossmatch, FCXM）对移植肾一年存活率的影响。方法:应用χ2检验比较FCXM阳性与阴性组间1年移植肾死亡有无差异。以“移植后1年肾脏的存活状况(是/否)”为应变量，以移植后早期排斥反应（移植后1月内发生）、血管性排斥反应、移植肾功能延迟（移植后1周内需做血液透析）、FCXM、群体抗原反应抗体(PRA)、 HLA A,B配型、HLA DR配型、供者类型（尸肾/活体供肾）、既往移植次数、免疫抑制药物的使用、血清巨细胞病毒状态、冷缺血时间、供者和受者年龄等可疑影响因素为自变量建立Logistic回归模型，探讨流式细胞仪交叉配型对移植肾1年存活有无影响。结果:258例患者平均随访时间为25个月（12～60个月），期间30例移植肾死亡，其中23例发生在移植后1年内。 χ2检验显示，FCXM阳性与阴性组间1年移植肾死亡无统计学差异（P=0.157?0）。 Logistic 回归显示，对移植肾1年死亡有影响的因素包括移植肾功能延迟（OR=8.00, P=0.001?4），供者类型为尸肾（OR=9.30, P=0.001?7）和血管排斥反应（OR=5.05, P=0.021?9）。FCXM的结果不会影响移植肾一年存活率（OR=1.60, P=0.534?6）。结论: FCXM对移植肾1年后存活尚无肯定的影响。     

糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激的实验研究

目的探讨糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激水平在糖尿病肾病中的作用。方法采用STZ诱导糖尿病模型鼠。36只大鼠随机分为正常对照组，糖尿病Ⅰ组(给予鱼精蛋白锌胰岛素2～4U／2d)，糖尿病Ⅱ组(每日给予鱼精蛋白锌胰岛素9～12U／kg体重)。喂养至12w，测定各组血糖，血中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮、肌酐、糖化血红蛋白(HbAlc)水平，尿肌酐水平和24h尿蛋白含量。运用比色法测定肾脏皮质中抗氧化酶的活性，包括总超氧化物歧化酶(TSOD)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu—Zn SOD)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)，以及丙二醛(MDA)的含量。结果糖尿病Ⅱ组与正常对照组间各指标无显著性差异。糖尿病Ⅰ组与Ⅱ组或正常对照组比较，血糖、TC、TG、HbAlc明显升高；抗氧化酶中，TSOD、Cu—Zn SOD、CAT活性明显下降，GSH—Px活性则升高，Mn SOD活性在各组中无显著性差异；MDA水平明显升高。尿蛋白含量在糖尿病Ⅰ组较其他两组明显升高，而肌酐清除率则明显下降。结论糖尿病可以引起大鼠肾脏氧化应激水平的升高，在糖尿病肾病发病机制中起重要作用。     

针灸治疗腰椎间盘突出症机制研究进展

腰椎间盘突出症（lumbar disc herniation,LDH）是现今临床发病率较高的疾病,严重影响着人们的生活质量与身心健康。针灸作为中医药特色疗法,对治疗腰椎间盘突出症具有显著的效果。针灸治疗该病方法选择较多,机制也不尽相同,作者从腰椎间盘突出症的中西医发病机制出发,对平衡针、电针、针刀、腹针、艾灸等治疗腰椎间盘突出症的机制进行总结,发现针灸具有简便易廉、起效快速、不良反应小、受众范围广、易被患者接受等优点。但是其治疗腰椎间盘突出症作用机制和临床疗效仍不明确。该文旨在为针灸治疗腰椎间盘突出症的普及以及进一步研究提供新的思考。     

卒中康复模式治疗脑卒中70例临床研究

目的:观察卒中康复模式治疗脑卒中的临床疗效.方法:将120例卒中患者随机分为卒中康复模式治疗组(简称治疗组,70例)和常规针刺组(简称对照组,50例),卒中治疗组采用卒中康复模式治疗,对照组选取常规穴位针刺治疗.结果:治疗组疗效显著优于对照组(P<0.05).结论:卒中康复模式是疗效很好的脑卒中康复治疗方法.     

肾淋巴管结扎对单肾切除大鼠的肾损害作用

目的： 探讨肾淋巴循环障碍及单侧肾脏切除对大鼠肾脏功能结构的损害。方法： 雄性Wistar大鼠,随机分为3组：双肾淋巴管结扎组（2KL）,左肾淋巴管结扎伴右肾切除组（1KL）,假手术组（sham）。分别在术后1、2、4、8周每组各处死6只。测定24 h尿蛋白和血尿肌酐。用PAS和Masson染色观察肾组织病理改变。用RT-PCR检测TGF-β1、Smad2/3、I型胶原（col I）mRNA的表达量;用免疫组化和Western blotting方法检测组织col I、TGF-β1、Smad2/3和磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）的蛋白表达量及主要表达部位。结果： 2KL和 1KL大鼠出现明显的蛋白尿和肾功能衰竭,1KL大鼠的肾脏损害尤其明显,随着时间推移逐渐加重,并出现明显的组织病理改变。2KL和 1KL大鼠肾组织中col I、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白和（或）基因表达水平也明显增高（P<0.01）,且主要表达在肾小管上皮细胞及肾间质。1KL大鼠的表达也明显高于2KL大鼠。结论： 肾淋巴循环障碍可导致大鼠肾脏功能及小管间质的损害,并随时间而加重。当淋巴循环障碍伴对侧肾切除时,损害明显加重。     

针刺配合吞咽训练治疗脑中风后吞咽障碍临床观察

目的:探讨针刺配合吞咽训练对脑中风后吞咽障碍的疗效。方法:将64例患者随机分成2组,对照组33例给予吞咽训练,包括温度刺激、吞咽器官基础训练和进食训练;治疗组31例进行针刺治疗和吞咽训练。1d1次,每周6次,2周为1个疗程,2个疗程后评定疗效。采用饮水实验、临床疗效评价对患者进行评估。结果:2组治疗后饮水试验评分及临床疗效比较均有显著性差异(P<0.01),治疗组优于对照组。结论:针刺配合吞咽训练对脑中风后吞咽障碍疗效显著。     

灸腰阳光穴治疗腰椎间盘突出症疗效对照研究

腰椎间盘突出症是引起腰腿痛的常见原因之一.在正常人群中的发病率约为15.2%,发病时严重影响患者的生活和工作.目前主要的治疗方法分为两大类:手术治疗和非手术治疗保守治疗.手术治疗虽可快速缓解症状,但因其有创伤,又有一定的风险性,所以更多的患者仍选择非手术治疗.非手术治疗方法众多,各有特点.我们运用灸腰阳光穴配合推拿、仰卧旋转整复法治疗腰椎间盘突出症35例,临床疗效显著,现报告如下.     

电针对兔激素性股骨头坏死局部组织血流量的影响

背景：激素所致的股骨头坏死是医源性疾病，增加局部坏死组织血流量可否有效改善这一问题。目的：观察电针治疗对股骨头局部组织血流量的影响，以了解针刺对激素性股骨头坏死的作用机制。设计：以实验动物为研究对象的随机对照研究。单位：一所中医学院的中西医结合系。材料：实验于2002—05／2003—06在安徽中医学院中西医结合临床医院动物实验室完成，新西兰大白兔30只．清洁级，雌雄各半，随机分为空白对照组、模型组和电针治疗组。方法：采用兔激素性股骨头坏死模型．电针治疗组用安徽中医学院针灸经络研究所研制生产的PCF-88A型程控电针治疗仪作用于环跳、髀关两穴，模型组、空白对照组不予治疗。主要观察指标：针刺后即刻及治疗2周后坏死局部组织血流量曲线。结果：针刺后局部组织即时血流量电针治疗组(0．50&;#177;0．08)mL／(g&;#183;min)与空白对照组(8．63&;#177;0.83)mL／(g&;#183;min)、模型组(4．30&;#177;0.89)mL／(g&;#183;min)比较显著减少．差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。治疗2周后电针治疗组局部组织血流量(6．19&;#177;0.61)mL／(g&;#183;min)明显升高．与空白对照组(8．33&;#177;0．65)mL／(g&;#183;min)、模型组（4．44&;#177;0．72)mL／(g&;#183;min)比较．差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：电针治疗改善激素性股骨头坏死局部血供的是非即时的．其机制可能与神经-内分泌-免疫网络调节有关。