应用双单克隆抗体ELISA夹心法检测循环抗原诊断弓形虫病实验研究

应用ELISA双单抗夹心法检测弓形虫不同感染度的家兔各临床期循环抗原(CA_g),并与双多抗法等检测CA_g进行比较,探讨该法检测CA_g诊断弓形虫病的敏感性和特异性。 人工感染弓形虫家兔分重度、中度及轻度感染组,分别感染13、6、15只。健康对照兔5只。各组同时分期采血。另设血吸虫感染兔42只。球虫感染兔8只,分别     

制备血吸虫单克隆抗体的一种免疫新方法

淋巴细胞杂交瘤技术中的小鼠免疫方法,一般为体内免疫法。该法免疫时间长,抗原用量大,不适于来源有限的抗原。我们应用手术脾内法和直接脾内法致敏脾脏细胞,并与常规法比较。结果:一、血吸虫尾蚴抗原常规法和手术脾内法的比较:手术脾内法融合率为87.5％,阳性率为9.4％;常规法融合率为72.4％:阳性率为64.6％。与文献报道相似。二、血吸虫成虫抗原常规法和直接脾内法比较结果:AWA     

浙江省钉螺分布抽样调查

目的　了解浙江省钉螺及感染性钉螺分布 ,为制定血吸虫病防治计划提供科学依据。　方法　采用分层整群随机抽样法抽取调查点,5m系统抽样结合环境抽查2框方法查螺,压碎法检查钉螺感染情况,设置假螺点考核查螺质量。　结果　在全省55县7106个村中抽取34县的100村为调查点,在21县的32村中查出有螺条块223个,1572框有螺,有螺面积73300m2。其中山丘型18县29村有螺,有螺面积72640m2,占总数的99.1%,与水网型比较差异具有显著性(t=3.04,P<0.01);1,2层有螺面积71680m2,占总数的97.8%,与 3层比较差异具有显著性(t=3.71,P<0.01);沟和渠有螺面积占总数的62.6%,显著高于田环境(t=3.02,P<0.01)。解剖活螺7892只,均阴性。推算全省有螺面积理论值为1361940m2 。　结论　估算浙江省当前有螺面积1500000～2000000m2,主要分布在山丘地区近4年内有螺村,以沟渠为主,但未查到感染性钉螺。     

杭州某肉类加工厂人群弓形虫感染流行病学调查

<正> 杭州某肉类加工厂是以猪肉为主的各类肉制品加工工厂,我们于1990年4～8月,对该厂职工进行了人群弓形虫感染调查。 一、方法 (一)血检对象:结合食品卫生从业人员体检作肝功能检查时,留取少许血样作弓形虫的血清检测,实际血检人数为职工数的65.94％(362/549)。     

三个抗弓形虫单克隆抗体免疫学特性的比较研究

1984～1986年我们建成3株分泌抗弓形虫单克隆抗体(McAb)细胞株。制备了3个McAb,并对这三个McAb的免疫学特性进行初步比较研究。 一、McAb的效价测定3个McAb的滴度分别     

杭州地区ELISA人畜弓形虫抗体调查

1986～1987年,我们应用ELISA对杭州地区人群及几种动物进行弓形虫抗体检测,现将结果报告如下。一,材料和方法采用弓形虫速殖子(CN株)可溶性抗原(上海市农科院畜牧兽医研究所);本室以过碘酸钠法制备的马抗人、羊抗猪、羊抗兔及兔抗鼠的IgG-HRP结合物;参考血清分别以IHA检测抗体滴度≥1:1024的阳性血清及滴度在≤1:8的阴性参考血清混合。采用ELISA间接法,经棋盘滴定法测定抗原、血清及酶结合物的最适稀释     

三个抗弓形虫单抗免疫学特性的比较研究

<正> 材料和方法 一、单克隆抗体(McAb)的制备:按本室1984年建株的报道方法进行。 二、McAb的免疫反应特性测定方法:1.间接荧光试验;2.ELISA双McAb夹心法或ELISA单抗二抗夹心法。以上两法均与高效价免疫兔血清(PcAb)进行对比试验。     

双抗体ELISA检测人血清弓形虫循环抗原的初步研究

应用抗弓形虫抗体酶联免疫吸附试验夹心法(双抗体ELISA),检测不同人群血清循环抗原(CAg)。肉类加工人员、饮食服务人员的阳性率分别为9.3%(15/161)及3.9%(3/76),献血员未检出阳性者(0/72),肉类加工人员与献血员的CAg阳性率间差异非常显著(P<0.01),提示弓形虫感染与接触肉类食品似有密切关系。该法检测抗核抗体、类风湿因子、抗链球菌溶血素“O”等阳性者血清93份,均为阴性。方法的特异性试验的抑制率>70%;重现性试验的变异系数<10%。结果表明,该法具有较高的敏感性和特异性,认为可作为人体弓形虫急性感染的诊断方法。     

钩蚴抗原收集和ELISA检测钩蚴抗体的研究

进行钩虫免疫学研究,需收集大量钩蚴制备抗原和建立检测钩蚴抗体的ELISA法。为此,我们于1990年1月对几种常用钩蚴培养方法作了对比,并对ELISA法的敏感性、特异性、稳定性和孵育时间等进行了研究。现将结果综合报告如下。     

弓形虫速殖子抗原组分分析及其免疫反应性的比较研究

应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、酶联免疫印渍试验(ELIB)和酶联免疫吸附试验(ELISA),对四种不同地理株弓形虫-CN、RH、BH、HH速殖子细胞质、细胞膜和代谢抗原组分及株间抗原差异、免疫反应性进行比较研究。ELIB实验结果:RH株高免兔血清与四株细胞质抗原反应,分别出现10、7、4、6条显色的反应区带,其中在35～38kD处都出现极明显的反应区带;与四株细胞膜抗原反应,分别出现5、6、6、9条显色反应区带,其中在31～35kD处都出现极明显的反应区带;与四株代谢抗原反应,分别出现8、7、6、7条反应区带,其中在50kD处、100～108kD处都有明显反应区带。实验结果提示,高免兔血清与四株12种抗原反应结果所出现的区带存在不同程度差异。ELISA检测免疫比值(P/N)大小比较结果表明,无论是细胞质、细胞膜或代谢抗原,在检测人弓形虫抗体阳性血清时,HH、BH较CN、RH的免疫比值高,株间抗原免疫反应似存在一定差异。