大鼠神经元型一氧化氮合酶基因慢病毒载体的构建及功能测定

目的：构建编码大鼠神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS）全长基因的慢病毒载体,并检测其表达效率和催化活性功能。方法：采用RT?PCR提取nNOS的cDNA,同时改造真核表达载体pCDH?GFP。鉴定nNOS的cDNA碱基序列正确后,将目的基因克隆入慢病毒载体pCDH?GFP,得重组载体pCDH?GFP/nNOS,采用Lipofectamine 2000将其及慢病毒包装辅助质粒转染293T细胞,超速离心纯化后,感染神经干细胞和海马齿状回神经元进行感染能力鉴定,并检测nNOS蛋白表达和催化功能。结果：成功构建编码nNOS全长cDNA,测序证明重组慢病毒载体pCDH?GFP/nNOS构建成功。包装慢病毒颗粒LV?nNOS?GFP可以感染离体神经干细胞和在体神经元。Western blot检测证明nNOS蛋白成功表达。一氧化氮浓度检测表明表达的nNOS具有催化活性。结论：慢病毒载体LV?nNOS?GFP构建成功,可以表达功能性全长nNOS蛋白。     

江苏省城乡居民不同糖代谢状态人群视网膜病变患病率及相关因素分析

目的:比较江苏省城乡居民不同糖代谢状态人群视网膜病变患病率并分析其相关影响因素。方法:本研究为横断面研究。于2017年4至7月采用分层多阶段随机抽样对江苏省盐城盐都区、镇江句容市抽取4 074名18~70岁居民进行问卷调查、体格检查、血糖检测和眼底筛查。以糖尿病视网膜病变（DR）早期治疗研究分级≥20定义为糖尿病特征性...