应用噬菌体十二肽库筛选卫氏并殖吸虫抗原模拟表位

目的　从噬菌体 12肽库中筛选卫氏并殖吸虫抗原模拟表位。　方法　将卫氏并殖吸虫病患者血清免疫粗球蛋白 (Ig )作为靶分子筛选噬菌体随机 12肽库。经过 5轮淘筛 ,随机挑取 2 4个蓝色噬菌斑进行扩增 ,以ELISA检测其免疫活性并分析其诊断并殖吸虫病的价值。　结果　 2 4个克隆中有 12个可以被卫氏并殖吸虫病患者血清Ig所识别 ,其中有 2个克隆 (P5、P6)具有较好的特异性和敏感性 ,可能为特异性的卫氏并殖吸虫抗原模拟表位。　结论　应用噬菌体肽库筛选可以获得卫氏并殖吸虫抗原模拟表位 ,为并殖吸虫病诊断抗原和短肽疫苗的研究提供了新的方法学依据。     

鞭毛教学标本片的制作改进

目前 ,虽有一些鞭毛标本片的制作方法 ,但制作较复杂 ,且结果不太理想 ,笔者用镀银染色法制作鞭毛教学标本片 ,收到满意效果 ,特报告如下 :1　材料和方法伤寒杆菌同济医科大学微生物教研室赠 ,半固体血液增菌培养基截玻片 (帆船牌 ) ,镀银染液 ;隔水式电热恒温培养箱 ,超净工作台。载玻片的清洗 :首先用 0 .1%～ 1%Ｈｃｌ浸泡过夜 ,第 2天用自来水冲洗至中性 ,即ｐＨ =7.0左右 ,然后用 95%酒精 (或无水乙醇 )浸泡过夜 ,最后取出晾干。菌种的准备 :在超净工作台内用无菌接种针取琼脂斜面培养基上的伤寒杆菌 ,直接点种到半固体血液琼脂平板的…     

穿琥宁注射液致严重过敏反应1例报告

1　病例介绍患者 ,女 ,17岁 ,因鼻塞流涕、轻咳伴咽喉肿痛3d。口服板兰根冲剂及乙酰螺旋霉素无效 ,于 2 0 0 2年 7月 2日来医院门诊就诊 ,诊断为上呼吸道感染。按医嘱行青霉素皮试 ,为阳性反应 ,故选用林可霉素12 0mg ,穿琥宁 32 0mg加入 5 %葡萄糖注射液2 5 0mg中静脉滴注 ,约 3min左右 ,患者突然诉腹痛、窒息感 ,用手抓颈部 ,即刻出现咳嗽、气促、胸闷、头昏、全身皮肤潮红密布粟粒状红色小丘疹、面色青紫、四肢湿冷 ,桡动脉搏速而弱 ,考虑过敏休克。立即停止输液 ,病人平卧 ,给予吸氧、肌肉注射地塞米松 5mg ,经对症处理后约 5min左右其…     

某卫校学生疥疮及手足癣感染情况

为了解某卫校学生疥疮及手足癣患病情况 ,进一步探讨防治措施 ,笔者结合病原微生物教学实际 ,连续 3年对该校学生疥疮及手足癣患病情况进行了调查 ,现报道如下。1　对象与方法1.1　对象　选择 1997～ 1999年间入校的社区医士、妇幼助产士学生 132 7名。其中男生 35 2人 ,女生 975人。1.2　方法　新生入校第 1学年病原微生物课程开设时对学生进行检测。首先采用 1人 1表方式 ,对疑有疥疮及手足癣的学生 ,皮肤望诊 ,记录病损部位及病变特征。根据病史及临床体征确定患者检查内容。如手足癣取皮屑直接涂片 ,亚急性水泡型癣症早期剪取水疥顶端表…     

旋毛虫抗原模拟表位抗原性的鉴定

目的　鉴定旋毛虫十二肽模拟表位的抗原性。方法　筛选噬菌体十二肽库获得旋毛虫抗原模拟表位 ,随机挑选2 4个克隆 ,利用酶联免疫吸附试验 (ELISA)选取灵敏性较好的 6个克隆 (T1～T6 ) ,检测其敏感性和特异性。结果　 6个克隆均与旋毛虫病患者血清反应 (10 0 % ) ;其中T6克隆特异性最好 ,无交叉反应 ;其余克隆与卫氏并殖吸虫和日本血吸虫病患者血清存在不同程度的交叉反应 (0 %～ 4 0 % )。结论　用噬菌体十二肽库筛选得到的旋毛虫抗原模拟表位具有较好的灵敏性和特异性 ,作为新的旋毛虫病诊断试剂有较好的应用前景。     

综合归纳法在医学微生物教学中的运用

本文对综合归纳法在医学微生物学教学中的运用进行了探讨，提出了若干可行的有效方法。     

从噬菌体十二肽库筛选旋毛虫抗原模拟表位

目的　从噬菌体肽库筛选旋毛虫抗原的模拟表位 ,为研究和开发新的旋毛虫病诊断抗原提供实验依据。方法　以纯化旋毛虫病患者血清免疫球蛋白(Ts IgG)对噬菌体十二肽库进行5轮筛选 ,随机挑选24个克隆 ,通过ELISA选取吸光值(A)较高的6个克隆 (T1～T6) ,并检测其敏感性和特异性。　结果　T1～T6敏感性与旋毛虫幼虫抗原(TsA)相同(阳性率为100%,P>0.05) ,特异性与TsA无明显差异 (阴性率为0～40%,P>0.05),其中T3,T6与并殖吸虫病患者血清无交叉反应 ,特异性高于TsA(P<0.05),T6与日本血吸虫病患者血清无交叉反应 ,特异性亦高于TsA(P<0.05)。　结论　利用噬菌体十二肽库筛选到旋毛虫抗原模拟表位     

噬菌体随机肽库技术与寄生虫病免疫诊断

噬菌体随机肽库技术是 2 0世纪 90年代发展起来的一项新型基因表达筛选技术。 1 985年Smith[1]首先利用基因工程手段 ,将外源DNA片段 (基因 )插入到噬菌体外壳蛋白基因组中 ,使外源基因所编码的氨基酸序列与噬菌体外壳蛋白一起 ,以融合蛋白形式呈现于噬菌体表面。从而形成特定长度不同序列的肽段集合 ,这些表达有各种外源肽段的众多噬菌体便组成了噬菌体随机多肽文库。由于被展示的外源蛋白或多肽可保持相对独立的空间结构和生物活性 ,并能被相应的抗体或受体识别[2 ] ,因此 ,利用靶分子 (抗体、酶、细胞表面受体等 )与表达在噬菌体表面的…     

两种方法筛选噬菌体肽库所获日本血吸虫抗原模拟表位的抗原性比较

目的比较两种不同方法筛选噬菌体肽库所获得的日本血吸虫抗原模拟表位的抗原性.方法以日本血吸虫病患者血清免疫球蛋白(Sj-Ig)作为靶分子, 分别以噬菌体12肽库(SjA)和经过蚯蚓免疫兔血清免疫球蛋白(L-Ig)筛选一轮后的噬菌体12肽库(SjB)为原肽库,进行3轮吸附-洗脱-扩增免疫筛选.随机挑取SjA和SjB蓝色噬菌斑各24个, 扩增后用ELISA方法检测其抗原性.结果 24个SjA克隆中有6个可以与Sj-Ig特异结合, 其中A491 nm值较高的2个克隆具有较好的特异性和敏感性;24个SjB克隆中有10个可以与Sj-Ig特异结合, 其中A491 nm值较高的5个克隆具有较好的抗原性.比较SjA 和SjB两组间克隆的抗原性,结果显示SjB的目的克隆具有更好的特异性和敏感性.结论从SjA 和SjB中均筛选到了对日本血吸虫病具有较高潜在诊断价值的抗原模拟表位,提示以异源性抗体结合后的肽库作为原肽库来筛选寄生虫抗原模拟表位是可行的,同时也为从噬菌体肽库中筛选抗原模拟表位提供了一个新的实验方法.     

旋毛虫抗原模拟表位抗原的筛选及序列分析

目的 分析旋毛虫抗原模拟表位的抗原性及其序列。方法 利用旋毛虫病患者血清免疫球蛋白(Ts-Ig)筛选噬菌体12肽库,以旋毛虫幼虫抗原(TsA)为对照,通过ELISA鉴定筛选所获抗原模拟表位(T1-T6)的抗原性,同时检测这些模拟抗原的DNA序列并分析其氨基酸组成。结果 T1-T6灵敏性及特异性与TsA无明显差异(P>0.05),其中T3,T6与肺吸虫病患者血清无交叉反应,特异性高于TsA(P<0.05),T6与日本血吸虫病患者血清无交叉反应,特异性亦高于TsA(P<0.05)。T1-T6编码的氨基酸序列有同源性,其末端三个氨基酸残基均相同,依次为:苯丙氨酸(F),天冬酰胺(N),脯氨酸(P)。结论 筛选噬菌体12肽库获得的旋毛虫抗原模拟表位具有较好的抗原性,有望发展成为新型旋毛虫病诊断抗原,而F,N,P三个氨基酸残基可能与其较好的抗原性有关。