Dot—ELISA检测抗丝虫抗体的初步实验研究

本文报告以马来丝虫成虫可溶性抗原作Dot-ELISA检测丝虫病人抗丝虫抗体的初步结果。62例马来丝虫微丝蚴血症者的阳性符合率为96.8％,49例班氏丝虫微丝蚴血症者的阳性符合率为85.7％,50例和39例非流行区正常人的假阳性率分别为4.0％和5.1％,与钩虫和蛔虫混合感染者的血清有一定的交叉反应。实验结果显示,Dot—ELISA检测微丝蚴血症者抗丝虫抗体具有敏感性高,且方法简便,可望用于丝虫病监测。     

抗血吸虫成虫表膜抗原单克隆抗体检测循环抗原及/或免疫复合物的实验研究

本文报告用单克隆抗体检测血吸虫感染兔血清中循环抗原及/或免疫复合物的实验结果.以血吸虫成虫盐水浸液抗原ACSE免疫BALB/c小鼠,取其脾脏与SP2/0骨髓瘤细胞融合获得抗成虫表膜的单克隆抗体8SE_4。此抗体经DE_(52)柱层析提纯后制成HRP-8SE_4结合物.血清样本与HRP-8SE_4作用后加入PEG(mw·6000)沉淀免疫复合物,然后加入底物OPD显色,于492nm读数,OD值即反映血循环中抗原及/或免疫复合物的量。实验结果表明5只重感染兔(接种尾蚴15O0～2000条)于感染后6wk可见OD值明显升高,达到感染前的1.9～4.5倍。5只轻感染兔接种尾蚴10～500条亦于感染6wk后OD值明显上升,至感染后8wk达高峰,此后至11wk剖杀时仍维持在较高水平.5轻感染兔检虫数为4～326条,未见虫荷与检测结果有明显相关。本实验结果提示感染兔血清中有循环表膜抗原及/或其复合物存在。至于检测该抗原能否用于考核治疗效果,有待进一步研究。     

日本血吸虫卵尿素溶解性抗原的提取、分离及其化学和免疫学特性

日本血吸虫卵在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中制成匀浆。离心后上清液为水溶性抗原(JSEA)。沉淀用8M尿素提取,得尿素溶解性抗原(JEU)。用动力学酶标固相免疫方法(K-ELISA)进行测定,JEU的抗原总活力得量为JSEA的2.83倍。将JEU通过Bio-Gel A 50 m柱分得的JEG_3为稳定的不含尿素的高抗原活力成分。作为诊断用抗原,应用K-ELISA对血吸虫病人血清进行测定,JEG_3较JSEA为敏感。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶区带电泳转移酶标免疫印斑技术,薄膜聚焦电泳和高压液相色谱分析的结果均表明,JSEA和JEG_3含有不同的蛋白质抗原成分,前者各组分的分子量在20万道尔顿以下,后者则主要为大分子蛋白质,分子量在40万道尔顿以上。     

日本血吸虫微粒体抗原的研究 Ⅲ.成虫微粒体抗原在ELISA中的应用

<正> 1982年我们用差速离心法从日本血吸虫成虫中分离得到的微粒体粗抗原(JAMAC)用于ELISA表明其抗原活力远比成虫可溶性抗原(JSAA)为高。根据中美医药卫生科技合作协议,同年10月美国疾病控制中心曾凯(V.Tsang)来我所共同对JAMAC做进一步提取和分离,得到了尿素溶解部分(JMC)和提纯的微粒体抗原(JAMA)。用ELISA对血吸虫抗体进行检测时,JAMAC、JMC和JAMA三种抗原均呈现高的敏感性和特异性。由于JAMAC的制备方法较简便,无需柱层分离步骤,我们采用这一抗原对     

脲酶结合物ELISA测定法在日本血吸虫病诊断中应用的初步报告

本文系用脲酶结合物系统进行ELISA测定诊断血吸虫病的初步报告。自巨豆粉中制得的脲酶结晶,用戊二配合一步法与羊抗人IgG结合制成结合物。酶底物为溴甲酚紫—尿素溶液,作用后产生的氨使pH发生改变,溶液中的溴甲酚紫指示剂由黄色转变为紫色,目测观察对比分明。脲酸不存在于一般的细胞和组织中,不受内源酶的干扰,不为NaN_3所抑制,在试剂和样本中可加防腐剂易于保存。对36份血吸虫病人血清和36份正常人血清用本法进行测定,结果与用辣根过氧化物酶结合物的常规目测法一致。     

体外介导白细胞杀伤日本血吸虫童虫的单克隆抗体

本文报道了一种在体外具有介导白细胞杀伤日本血吸虫童虫的单克隆抗体(AD_(12)F_6),经成虫冰冻切片免疫荧光试验(IFA)法证明,其靶抗原在成虫表皮。与日本血吸虫尾蚴、虫卵冰冻切片及丝虫冰冻切片、食蟹猴疟原虫血片及利什曼鞭与体玻片的IFA 试验均呈阴性反应。与培养3小时的血吸虫童虫共同温育,并进行IFA 试验,童虫表膜出现亮绿的特异荧光,其内容物则呈红色阴性反应,酶联免疫印渍试验表明,此单克隆抗体能识别ASE抗原中分子量为23K的部份,体外细胞杀伤试验证明,在有补体参与下,AD_(12)F_6对3小时童虫的杀伤率为 64％,对照血清为20％。     

微孔板法胶乳凝集试验检测弓形虫抗体

弓形虫病是人畜共患的寄生虫病.近年来国内人群弓形虫感染已有少数报告。常用的诊断方法有IFA、IHA、ELISA和染色试验等。日本东京慈惠会大学小林昭夫教授等报告用胶乳凝集试验诊断弓形虫病取得满意结果。我们以小林教授赠送的胶乳诊断试剂盒对上海市人群136例(包括肉类制品加工     

胶乳凝集试验检测日本血吸虫病抗体的实验观察

本文对检测血吸虫病抗体的胶乳凝集试验重新进行了评价,证明共价结合的日本血吸虫卵胶乳抗原有较高的敏感性和特异性。143例慢性及32例急性血吸虫病患者的阳性率分别为89.5％及93.8％;92份北京地区献血员及142份美国献血员血清未发现假阳性反应;100份上海居民血清假阳性率3％。曼氏血吸虫病和埃及血吸虫病患者的阳性率分别为40.5％(17/42)及45.5％(5/11);与丝虫病、华支睾吸虫病及肺吸虫病间有7.7～10％的交叉反应,但强度明显低于同种反应。本法抗原稳定、操作简便、快速,适合现场应用。     

斑点ELISA法在血吸虫病诊断中的应用

本文介绍用斑点ELISA法诊断血吸虫病的初步结果.对63例确诊血吸虫病患者的敏感性为88.9～96.8％,65例正常人血清均未出现假阳性反应,与肺吸虫及华支睾吸虫病患者血清有一定的交叉反应。斑点ELISA可作为血吸虫病诊断的补充方法.     

检测日本血吸虫病患者循环抗原及免疫复合物的初步观察

检出循环抗原可作为日本血吸虫活动性感染的指标,且有助于考核疗效。1972年我们还发现日本血吸虫循环抗原在实验动物体内常以抗原抗体复合物形式存在,不经处理的常规方法不易检出。本文报告应用对流免疫电泳法对实验感染动物和确诊患者血清中循环抗原及免疫复合物检测的初步结果。