血小板增强骨髓间充质干细胞促肿瘤转移作用

目的观察血小板作用于人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)后对肿瘤细胞转移的作用。方法体外分离培养人骨髓MSCs及健康人外周血中的血小板;实验分为MSCs组、血小板+MSCs组及肿瘤细胞上清处理血小板+MSCs组(T-血小板+MSCs),分别收集3组培养24 h后的MSCs及培养上清(SGC-7901-CM及MSCs-CM);western blot检测其肿瘤相关成纤维母细胞(CAF)标志蛋白α-SMA及Vimentin的表达;Transwell实验检测骨髓MSCs的迁移能力;流式细胞术检测SGC-7901-CM及MSCs-CM共培养后血小板P选择素的表达水平;建立BALB/c裸鼠尾静脉注射SGC-7901胃癌细胞系转移模型,观察体内肿瘤转移情况。结果 SGC-7901-CM及MSCs-CM处理的血小板P选择素的表达水平[分别为(31.4±1.71)%、(21.37±1.00)%]明显高于对照组[(3.17±0.40)%],差异有统计学意义(t分别为27.85和29.18,P均0.01);血小板+MSCs组及T-血小板+MSCs组α-SMA蛋白[分别为(0.79±0.08)、(0.90±0.06)]及Vimentin蛋白[分别为(0.88±0.01)、(0.96±0.04)]的表达水平均明显高于MSCs组[分别为(0.64±0.02)、(0.75±0.05)],差异有统计学意义(t分别为2.96和6.45,4.73和5.73,P均0.01);血小板+MSCs组及T-血小板+MSCs组迁移细胞数[分别为(340.3±27.7)个、(424.3±17.6)个]明显高于MSCs组[(220.7±19.4)个],差异有统计学意义(t分别为6.14和13.48,P均0.01);体内实验结果表明,血小板+MSCs组转移灶及T-血小板+MSCs组转移灶[分别为(4±2)个、(21±4)个]明显高于MSCs组[(0.33±0.06)个],差异有统计学意义(t分别为3.051和8.857,P均0.01)。结论血小板能促进骨髓MSCs迁移,并能增强骨髓MSCs体内促进肿瘤细胞转移能力。     

血小板对胃癌间质干细胞生物学特性的影响

目的观察血小板对胃癌间质干细胞(gastric cancer mesenchymal stem cells,GC-MSCs)的生物学特性以及对GC-MSCs促进肿瘤细胞迁移能力的影响。方法从健康志愿者静脉血标本中分离血小板;体外分离培养人GC-MSCs并分为对照组和GC-MSCs+血小板组,用流式细胞术检测GC-MSCs的细胞表型;成脂、成骨实验检测GC-MSCs的成脂、成骨能力;细胞计数法和Transwell实验检测GC-MSCs的增殖和迁移能力;将GC-MSCs与血小板或肿瘤细胞上清处理后的血小板共培养,western blot检测α-SMA蛋白的表达水平;将SGC-7901与GC-MSCs的细胞培养上清和血小板处理后的GC-MSCs上清共培养,Transwell实验检测SGC-7901的迁移能力。结果 GC-MSCs+血小板组的成脂、成骨能力增强,且增殖能力(24 h,t=3.88,P0.05; 48 h,t=5.93,P0.05; 72 h,t=4.35,P0.05)和迁移能力(t=4.03,P0.05)也明显加强; SGC-7901上清处理血小板组与单独血小板组的α-SMA蛋白表达水平高于对照组; SGC-7901与GC-MSCs上清或血小板处理后的GC-MSCs上清共培养后,其迁移能力增强(F=42.92,P0.05)。结论血小板可促进GC-MSCs增殖、迁移及成脂、成骨分化能力,并且可增强GC-MSCs促进肿瘤细胞迁移的能力。     

pH差示法测定血清胆碱酯酶

胆碱酯酶(Cholinesterase,CHE;EC 3.1.1.8)常用的测定方法有:滴定法、试纸法和分光光度法.我们参考有关文献,利用血气分析仪pH 通道以pH 差示法测定血清CHE.此法专一性强,灵敏度高,重复性好,简单快速.1 原理     

阴道黏膜修复敷料的生物学评价

目的考察阴道黏膜修复敷料的生物安全性。方法按照医疗器械生物学评价标准中的迟发型超敏反应试验、体外细胞毒性试验、刺激性试验分别对三批阴道黏膜修复敷料进行安全性评价。结果在本试验条件下,三批阴道黏膜修复敷料对豚鼠皮肤无致敏反应,细胞毒性反应级别不大于2级,具极轻度黏膜刺激。结论三批阴道黏膜修复敷料有望安全应用于临床。     

朱砂七HPLC指纹图谱的研究

目的 建立朱砂七的HPLC指纹图谱.方法 色谱条件为Shimadzu VP-ODS柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃;乙腈-5%磷酸溶液(V/V)梯度洗脱为流动相,流速1.0mL/min;用二极管阵列检测器选择检测波长为254nm.结果 采用国家药典委员会规定的计算机辅助相似度评价系统2004年A版生成对照指纹图谱,建立了太白朱砂七药材的指纹图谱共有模式.结论 所建立的指纹图谱具有较好的稳定性和重现性,该研究有助于朱砂七的科学化种植和质量控制.     

5种外用制剂微生物限度检查法中菌落计数方法验证

目的建立5种外用制剂的微生物限度检查方法。方法采用人工污染5种试验菌株测定其回收率，验证是否有抑菌作用。结果5种外用制剂均有抑菌作用，其中肤疾洗剂、擦癣药水抑菌作用较弱，独活止痛擦剂、氯霉素擦剂和顽癣净抑菌作用较强。结论肤疾洗剂可采用稀释法（0．5mL／皿）和顽癣净可采用薄膜过滤法（300mL／膜）进行细菌、霉菌及酵母菌检查；擦癣药水可采用常规法进行细菌检查，采用稀释法（0．2mL／皿）进行霉菌及酵母菌检查；氯霉素擦剂可采用薄膜过滤法（200mL／膜）和独活止痛擦剂可采用薄膜过滤法（300mL／膜）进行细菌检查，采用常规法进行霉菌及酵母菌检查。     

采用STAR加样仪进行RH.(D)抗原快速微板法检测

随着全自动加样设备的广泛使用,越来越多的基于微板反应的检测方法,如ELISA试验、微板凝集试验、微板速率法试验等已逐步由仪器加样取代手工操作[1,2].全自动加样设备在加样速度、准确性、重复性及精密度方面均优于手工操作,完全避免了因人为因素而造成的加样时差及各种偶然误差.我们采用全自动STAR加样仪结合扫描酶标仪,建立了基于96孔标准U型微板凝集试验的快速RH.(D)抗原检测方法.该方法完全克服了常规纸板法灵敏度差和试管法操作繁琐的缺点,特别适合大批量血样标本的快速RH血型筛选,介绍如下.     

微柱凝胶法检测血小板抗体

多次输血的血小板减少患者中 ,约有 30 %～ 70 %患者出现血小板输注无效 (ＰＴＲ)和血小板输血紫癜 (ＰＴＰ) [1],达不到临床输注的目的 ,有些病人输注血小板后不但不出现血小板计数升高 ,反而有所下降[2 ]。为了探索其发生的原因 ,提高血小板治疗的有效性 ,我们对多次输血的患     

HPLC法测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明的含量

目的建立高效液相色谱法测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明含量的方法。方法采用Kromasil C18色谱柱,流动相A为20mL.L-1乙腈的甲醇溶液,流动相B为0.02mol.L-1 KH2PO4-三乙胺(100∶0.2),用磷酸调pH为3.0,用梯度洗脱方式,检测波长210nm,流速1.0mL.min-1,柱温35℃。结果盐酸麻黄碱质量浓度在0.049 4～0.247 0mg.mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.4%,RSD为1.1%(n=9);盐酸苯海拉明质量浓度在0.020 6～0.102 8mg.mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率为101.6%,RSD为1.3%(n=9)。结论用HPLC测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明含量的方法准确,能有效控制该制剂的质量。