汉滩病毒S片段基因cDNA 3′端非编码区对核蛋白在大肠杆菌中表达的影响

为了探讨汉滩病毒Ｓ片段ｃＤＮＡ３′端非编码区基因对核蛋白表达的影响，先后构建了两个核蛋白的表达质粒（ｐＢＶＳ２２和ｐＢＶＳＸ），其中ｐＢＶＳ２２不含非编码区基因，ｐＢＶＳＸ含有３′端非编码区基因。比较两者在大肠杆菌中表达核蛋白的水平后发现３′端非编码区对核蛋白的表达有明显的负调控作用，表达量下降近５０％。可能的原因是非编码区中含有非常丰富的ＡＴ碱基。该研究结果为进一步提高汉滩病毒核蛋白的表达量积累了经验，也为高效表达其它病毒结构蛋白提供了有益的资料。     

骶管注射药物治疗腰椎间盘突出症致双下肢瘫痪1例

<正>患者,女,65岁,因“腰痛伴右下肢疼痛10 d”于2022年8月5日至滁州市中西医结合医院就诊。患者有8年高血压病史,无药物过敏史。体格检查：腰部活动稍受限,L₄～L₅棘突间右侧压痛,右侧臀中部压痛,右下肢直腿抬高试验阳性、皮肤感觉正常。胸腰椎MRI显示L₄～₅椎间盘突出,骶管囊肿[图1(1)]。诊断为腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation, LDH)。入院后给予活血化瘀、消肿止痛等对症治疗,疗效不佳。     

ASODN对白细胞抗原Ⅰ类基因表达的影响

目的为观察针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ｘ基因特异性反义核酸（ＡＳＯＤＮ）对２２１５细胞表面白细胞抗原Ⅰ类基因（ＨＬＡ－Ⅰ）表达的影响。方法人工合成互补于ｘ基因关键区的三段反义核酸，用流式细胞仪检测ＡＳＯＤＮ对２２１５细胞表面ＨＬＡ－Ⅰ表达的影响，细胞原位杂交观察作用细胞内ＨＬＡ－ⅠｍＲＮＡ含量变化，同时用ＰＡＰ－ＥＬＩＳＡ法检测作用细胞上清中ＨＢｘＡｇ的含量。结果三段ＡＳＯＤＮ均能抑制ＨＢｘＡｇ的表达，２２１５细胞表面ＨＬＡ－Ⅰ类抗原的表达及细胞内ＨＬＡ－ⅠｍＲＮＡ含量也降低。结论ＨＢｘＡｇ表达量的降低可能系ＡＳＯＤＮ序列特异性抑制作用所致，而ＨＬＡ－Ⅰ表达的降低可能是ＨＢｘＡｇ对ＨＬＡ－Ⅰ基因启动子的激发减少的间接结果。     

以减毒沙门菌为载体的肿瘤DNA疫苗免疫机制

减毒沙门菌可作为外源DNA的载体，为DNA疫苗的研制提供了新的思路。携带肿瘤DNA的减毒沙门菌可通过肠上皮细胞屏障，被存在于外周免疫系统的DC捕获；肿瘤DNA可在DC中表达肿瘤抗原；DC可将肿瘤抗原呈递给T细胞。该疫苗能刺激机体发生抗肿瘤的特异性免疫应答，发挥抗肿瘤作用。     

10例大肠癌患者外周血中CK20mRNA检测

目的：检测大肠癌患者外周血中的癌细胞，以确定其肿瘤是否有微转移发生。方法：应用逆转录酶链反应(RT-PCR)，检测10例大肠癌患者癌组织和外周血中CK20mRNA的表达。结果：10例大肠癌患者中有5例外周血检测出CK20mRNA，阳性率为50％。结论：外周血中CK20mRNA检测可作为大肠癌病人肿瘤微转移的参考指标，有助于肠癌转移的早期发现和选择更好的化疗方案。     

经鼻内窥镜下鼻腔泪囊吻合术治疗泪囊炎疗效的影响因素分析

目的：探讨影响经鼻内窥镜下鼻腔泪囊吻合术治疗泪囊炎疗效的相关因素。

方法：回顾性分析2015-07/2019-04在我院行经鼻内窥镜下鼻腔泪囊吻合手术治疗的泪囊炎患者380例413眼的临床资料,术后至少随访6mo,根据泪囊、鼻腔、吻合口、泪道功能恢复情况评定临床疗效,筛选影响手术效果的相关因素。

结果：术后6mo时,未愈患者27例27眼(6.5%),治愈患者353例386眼(93.5%)。单因素分析结果表明,患者鼻中隔偏曲程度、小泪囊、反复泪道探通/泪道激光/泪道置管、复发性泪囊炎、术后定期复诊和术者开展手术时间均对手术疗效存在影响。Logistic回归分析结果显示,患者鼻中隔偏曲程度、小泪囊、术后是否定期复诊是泪囊炎患者行经鼻内窥镜下鼻腔泪囊吻合术临床疗效的危险因素。

结论：经鼻内窥镜下鼻腔泪囊吻合术治疗泪囊炎疗效确切,术后治愈率较高。患者鼻中隔偏曲的严重程度、小泪囊和术后是否定期复诊是影响手术疗效的危险因素。术者娴熟的手术技术和规范的手术后处理及患者良好的医嘱依从性是手术成功的关键。     

抗丙型肝炎病毒锤头结构核酶的计算机设计和载体的构建

目的选择针对丙型肝炎病毒（HCV）5'非编码区（NCR）和核心区（C）的核酶（ribozyme,Rz）切割位点,构建带自剪切的Rz真核表达载体。方法应用计算机辅助设计,根据能量最低化原理,以HCV－H（1a）株SNCR和C靶序列,预测其二级结构,选择理想的Rz切割位点,设计锤头结构核酶;体外合成针对HCV5'NCR的Rz213和Rz260的cDNA,通过亚克隆技术连接于真核表达载体（pcDNA3）。结果在124个自然切割位点（CUX和GUX）中选出213（CUC）、260（GUA）、407（GUC）和498（CUU）4个切点;Rz213和Rz260的DNA序列分析,结果与合成序列完全一致,酶切鉴定两Rz连接正确。结论计算机可作为抗病毒Rz设计的重要辅助工具;通过亚克隆技术可使目的Rz两端带自剪切Rz,并成功地插入真核表达载体。     

B超引导经皮肾镜取石术治疗上尿路结石

目的观察B超引导经皮肾镜碎石取石术治疗上尿路结石的临床疗效和安全性。方法 485例患者中,输尿管上段结石138例,肾结石207例、肾输尿管上段结石140例,共556侧结石,均在B超引导下定位穿刺建立皮肾通道（微通道、标准通道或大通道）采用气压弹道碎石或EMS三代碎石清石系统治疗。结果全部病例均一次穿刺成功,Ⅰ期取石450例（509侧）,Ⅱ期取石35例（47侧）。手术时间（穿刺至放置肾造瘘管）15~221 min。术后5~7 d复查腹部平片（KUB）,447侧排净结石,Ⅰ期结石取净率86.8%。无术后肾造瘘管脱落,无胸膜和腹腔脏器损伤。结论 B超引导经皮肾镜碎石取石术治疗上尿路结石具有微创、高效、安全、易操作和并发症少等优势,值得临床推广应用。     

改装EcoScreen冷凝器收集机械通气患者呼出气冷凝液的研究

目的探讨设计改装EcoScreen冷凝器收集机械通气患者呼出气冷凝液(EBC)的可行性。方法①体外模拟肺测试:改装EcoScreen冷凝器与模拟肺连接,在干燥呼吸机管道不连接湿化器、连接不加温湿化器、连接加温湿化器三种不同连接状态下机械通气60min,观察气道压和潮气量(VT)的变化,并测量收集冷凝液量。②人体测试:10例患者在干燥呼吸机管道不连接湿化器状态下进行机械通气20min,观察气道压、VT、呼吸频率及心率、血压、SpO2的变化。并测量收集冷凝液量。结果①体外模拟肺测试发现,干燥呼吸机管道不连接湿化器机械通气60min可收集冷凝液2.2mL,期间气道压、VT无明显增高,冷凝器收集管腔无阻塞;连接不加温湿化器,机械通气中VT下降伴气道压升高,50min时被迫中止测试,发现冷凝器收集管腔被冷凝物质明显堵塞,收集冷凝液5mL;连接加温湿化器机械通气60min,收集冷凝液10.5mL,期间气道压轻度升高,VT轻度下降。②人体测试显示,干燥呼吸机管道不连接湿化器,直接与呼吸机相连,机械通气20min可收集冷凝液2mL,收集过程中气道压、VT、呼吸频率及心率、血压和SpO2无显著变化。结论改装EcoScreen冷凝器可用于收集机械通气患者的EBC。为获得检测所需的足量EBC标本,并防止EBC被稀释和气道阻塞,建议脱离湿化器,收集时间20min,同时加强呼吸机和临床监护。