Toll样受体在约氏疟原虫感染早期树突状细胞应答中的作用地位

目的探讨致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii17XL,P.y17XL)感染早期,Toll样受体(Toll like receptor,TLR)在树突状细胞(dendritic cells,DCs)活化中的作用地位。方法用P.y17XL感染易感的BALB/c和抵抗的DBA/2小鼠,计数红细胞感染率;制备感染前和感染后第3d、5d小鼠脾细胞悬液,采用流式细胞分析技术检测两种小鼠感染不同时间脾细胞悬液中细胞内表达TLR9(Toll like receptor 9,TLR9)的DCs和细胞表面表达TLR4(Toll like receptor 4,TLR4)的DCs的百分含量。结果两种小鼠脾DCs细胞内TLR9的表达水平均于感染后第3d开始明显升高(P<0.01),在第5d达到最高水平(P<0.01),但两种小鼠相比无统计学意义。同时,两种小鼠DCs表面TLR4的表达水平均未见明显变化。结论在P.y17XL感染早期,TLR9可能是介导DCs活化的模式识别受体。     

疟原虫配子体蛋白Pys48核酸疫苗的构建与免疫活性观测

为探讨约氏疟原虫配子体蛋白Pys48核酸疫苗的免疫效果及其效应,以约氏疟原虫Pys48全基因序列克隆和真核表达载体pcDNA3．1为基础获得核酸重组质粒,肌肉注射免疫BALB／c小鼠,ELISA检测小鼠血清中特异性抗体水平,并通过IFA检测疫苗的免疫活性以及免疫血清对有性阶段虫体发育的阻断效应。测序结果和酶切鉴定均证实构建的质粒为Pys48全基因插入质粒。ELISA结果显示疫苗免疫小鼠血清特异性抗体滴度明显高于对照组;IFA结果显示免疫血清能够明显阻断配子体向合子与动合子的发育,并且其传播阻断效应与免疫血清呈剂量依赖性关系。实验表明,真核表达载体pcDNA3．1表达的Pys48核酸疫苗具有良好的免疫原性,其免疫血清可显著抑制有性阶段原虫的进一步发育。     

间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48基因特点

目的 阐明问日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原编码基因Pvs48的特点.方法 采集我国疟疾高发混合流行区云南省问日疟患者指尖血样本,制备血样干滤纸片提取疟原虫基因组DNA;聚合酶链反应(PCR)扩增Pvs48;双脱氧链终止法测序.并对测序结果进行序列多态性分析.结果 共成功扩增16例间日疟原虫分离株Pvs48基因.与间日疟原虫标准株Sa1-I比较,检测出6处错义突变位点,导致6处氨基酸置换和3种基因型、3种氨基酸型.结论 我国间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48编码基因相对保守,不同地理株间差异无统计学意义.有限的基因突变再次提示以Pvs48为基础构建的传播阻断疫苗在我国具有广泛应用的可行性.     

疟原虫雌性配子体特异性表面蛋白Pys47真核表达及免疫效应评价

P47是特异性表达于疟原虫雌性配子体以及雌性配子表面的蛋白,为了评价其作为传播阻断疫苗候选抗原的免疫效果及其效应,本研究将约氏疟原虫Pys47完整编码区基因序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1+,获得核酸质粒,肌肉注射BALB/c小鼠.通过ELISA方法检测免疫小鼠血清滴度,IFA检测疫苗的免疫活性以及免疫血清对有性...