缺氧对人视网膜色素上皮细胞蛋白质表达的影响

目的 为揭示缺氧对视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响及与脉络膜新生血管(CNV)生成的关系提供实验依据.方法 实验研究.分别从对数生长期的正常及缺氧状态人RPE细胞中提取蛋白样本后行等电聚焦电泳(IEF),随后采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行第二次分离.采用考马斯亮蓝染色法对凝胶进行显色固定,Image Master 2D Elite软件行分析配比,筛选出正常和缺氧RPE细胞表达明显差异的蛋白质斑点,随机选取差异斑点进行质谱分析,数据经蛋白质组数据库检索得出蒡异表达蛋白.结果 正常组分离蛋白斑点578个,组内匹配率92.90%;缺氧组559个,匹配率91.41%;两组间蛋白斑点匹配率为85.47%.发现volume值改变超过2倍的点共92个,其中32个点表达卜调,60个点表达下调.选择7个蛋白斑点行质谱分析,成功鉴定5种差异表达蛋白质(3个斑点为相同的蛋白):表达上调为热休克蛋白70、热休克蛋白60;表达下调的为β肌动蛋白、β微管蛋白以及过氧化还原蛋白3.结论 缺氧状态下RPE细胞表达差异蛋白可引起细胞应激能力明显增强,而主要细胞骨架蛋白下调,细胞维持形态、保持内部结构有序性的能力下降;本研究首次发现人RPE细胞在缺氧状态下热休克蛋白60表达上调,此蛋白的进一步研究可能能够发现新的CNV致病途径;蛋白质组学方法为CNV相关疾病的研究提供了-个很好的参考平台.     

卡托普利对大鼠角膜新生血管生长的影响

目的研究血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对角膜新生血管生长的影响。方法缝线诱导角膜新生血管模型，28只SD大鼠随机分为正常对照组、角膜新生血管对照组、卡托普利灌喂组、卡托普利球结膜下注射组。比较第8d各组新生血管并计算生长面积，分别检测血管内皮生长因子(VEGF)在基因和蛋白质水平的表达。结果卡托普利灌喂或球结膜下注射均显著抑制了角膜新生血管的生长，以后者更为明显；免疫组织化学染色，VEGF在正常角膜不表达或在上皮基底细胞有弱表达，新生血管对照组染色明显增强，球结膜下注射组表达明显减弱；VEGFmRNA和蛋白质水平表达有一致性。结论卡托普利球结膜下注射较全身应用更有效地抑制了角膜新生血管的生长，其抑制金属蛋白酶活性可能只是卡托普利治疗角膜新生血管机制的一部分。     

白内障超声乳化术对角膜内皮的影响

目的研究白内障超声乳化术对角膜内皮的影响。方法应用非接触式角膜内皮显微镜观察白内障超声乳化术和囊外摘除术两组病例术前和术后的角膜内皮细胞计数。结果超声乳化术组角膜内皮细胞损失率为１５．８±６．７％，囊外摘除术组为１６．１±４．５％，二者经统计学处理无显著差异（Ｐ＞０．０５），但将超声乳化术组按核硬度分组比较则发现各组之间差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论这种差异的产生是和使用的超声能量、时间，以及手术医师的经验、技巧有关，只要严格掌握适应证和提高手术技巧，此手术安全、可靠     

乙酰肝素酶抑制剂对体外培养视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的：探讨乙酰肝素酶（heparanase-1, HPA-1）抑制剂应用对体外培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial, RPE)细胞增殖的影响。方法：采用DMEM培养基(Dulbecco's modified eagles medium, DMEM)体外培养人RPE细胞,选择第5代细胞用于实验。倒置显微镜下直接观察不同质量浓度硫代磷酸甘露醇戊糖（phosphomannopentaose sulfate, PI-88）对人RPE细胞体外生长的干预效果,应用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dipheny1 tetrazolium bromide, MTT]比色法检测RPE细胞A₅₇₀值;免疫组织化学方法检测人RPE细胞角蛋白和HPA-1表达。 结果：体外增生的RPE细胞胞浆和细胞核HPA-1呈强阳性表达,以细胞浆内表达为主,PI-88干预后细胞浆表达减弱。PI-88对体外RPE细胞的增生有明显的时效和量效抑制关系,药物干预72h细胞A₅₇₀值随质量浓度不同表现明显下降趋势（P<0.05）;而同一质量浓度,药物质量浓度达到100mg/L及以上时,48~72h才表现A₅₇₀值减小的趋势。结论: HPA-1抑制剂可抑制体外培养RPE细胞的增生,并呈现剂量和时间依赖关系。     

多发性硬化合并眼运动功能障碍的分析

目的探讨多发性硬化(multiple sclerosis,MS)合并眼运动功能障碍的特征。方法回顾解放军总医院2004年3月至2007年12月间收治的162例确诊或很可能是MS的连续病例,分析相关的眼部表现,总结眼运动功能障碍的特点。结果162例患者中出现眼科症状或发现眼科异常体征占56.8%,仅以眼部表现为首发症状占16.7%,眼部表现主要为视力下降62例(38.3%)和眼运动功能障碍45例(27.8%),后者主要包括眼球震颤、眼球外展受限、眼睑闭合不全和睁眼困难;此外,还有复视15例(9.26%)和13例(8.02%)眼眶或眼球疼痛。结论多发性硬化合并眼运动功能障碍提示了内侧纵束的损害和第三、六对颅神经损害,还可能为Collier′s征。     

儿童巨大裂孔视网膜脱离的手术治疗

目的 探讨儿童巨大裂孔视网膜脱离的手术特点。方法 观察10例10眼儿童巨大裂孔视网膜脱离患者的手术方法及其疗效、预后。结果 9眼应用玻璃体切割手术,其中7眼术中应用过氟化碳展平后瓣,3眼术后玻璃体腔充硅油,4眼未结合环扎加压。术后1眼由于周连视网膜严重PVR、1眼裂孔未封,视网膜再次脱离。结论 儿童巨大裂孔视网膜脱离首选玻璃体切割术、环扎加压适当放松;术中应用过氟化碳有非常重要作用,术后玻璃体腔填充物选择硅油最合适。     

缝合复位术治疗睫状体解离32例临床观察

目的观察缝合复位术治疗睫状体解离的临床效果。方法对32例（33眼）眼球钝挫伤导致的睫状体解离患者行解离12I缝合复位。结果33眼中，1次手术后31眼眼压恢复正常，27眼睫状体解离121全部封闭，6眼未封解离口均小于1个钟点（其中1眼行二次手术、1眼行三次手术后睫状体解离口全部封闭，但眼压仍较正常低）。结论缝合复位术治疗睫状体解离临床效果良好，既可封闭解离口，又可恢复正常眼压。     

基质金属蛋白酶与角膜病变

基质金属蛋白酶(MMP)是一族活性依赖金属离子锌并以细胞外基质(ECM)成分为水解底物的复杂蛋白酶家系。在机体的生长发育和许多病理过程,主要与细胞外基质的破坏和重塑有关。许多角膜病变如圆锥角膜、与类风湿病相关的周边溃疡性角膜炎、糖尿病性角膜病变、角膜新生血管、翼状胬肉对角膜组织侵袭等发生发展过程均与基质金属蛋白酶有关,近年来这方面的研究逐渐受到重视,而对基质金属蛋白酶活性表达的干扰更为角膜病变的治疗提供了一个有着广阔前景的途径,现就近年来国外这方面的研究复习如下。     

诱导型一氧化氮合成酶在大鼠角膜新生血管模型的表达及意义

目的:研究诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在大鼠角膜新生血管模型的表达和意义。方法:将SD大鼠随机分为正常组,角膜新生血管对照组,地塞米松球结膜下注射组,采用缝线诱导角膜新生血管模型。用裂隙灯数字图像处理系统观察第8d模型组新生血管生长情况,RT-PCR检测3组iNOSmRNA的表达,免疫组织化学方法检测iNOS蛋白质水平的表达。结果:在正常大鼠角膜上皮基底膜和基质层即表达iNOS,新生血管对照组其表达明显增强,球结膜下注射地塞米松组iNOS在新生血管角膜组织中则受到显著抑制,iNOSmRNA水平和蛋白质水平表达有一致性。结论:iNOS表达水平与炎症性角膜新生血管明显相关,地塞米松球结膜下注射抑制iNOS表达与其抑制炎症性角膜新生血管可能有关。     

与颈动脉狭窄相关眼部表现的临床分析

目的 探讨与颈动脉狭窄相关眼部表现的临床特点和发生机制。 方法 回顾性分析124例颈动脉狭窄患者的临床资料和相关眼部表现的情 况。 结果 36例（29%）患者伴有眼部表现，并且28例（22.6%）是以眼部的症状为首发症状就诊；36例患者中，31例（86.1%）经彩色超声多普勒（CDFI）检查显 示狭窄段主要位于单侧或双侧颈内动脉，数字减影血管造影（ＤＳＡ）检查显示为颈内动脉 中度狭窄8例,重度狭窄23例；124例患者中，67例重度颈内动脉狭窄患者出现眼部表现的概 率与34例中度狭窄患者比较，差异无统计学意义（χ2检验，P=0.2662，P＞0.05）；眼部表现包括一过性黑矇52.8%，视野缺损、视力突然下降甚至完全丧失36.1%，双眼复视13.9%，上睑下垂13.9%，持续性高眼压2.8%，同一患者可同时合并多种表现；36例患者中诊断视网膜中央动脉阻塞4例，视网膜静脉瘀滞性病变1例，视网膜中央静脉或分支静脉阻塞6例，新生血管性青光眼1例，前部缺血性视神经病变2例；1例患者双侧颈内动脉完全闭塞并无任何眼部表现。 结论 颈动脉尤其是颈内动脉狭窄可引起急慢性缺血性眼病，但慢性缺血情况下是否有眼部的表现与侧支循环代偿状态有关；对缺血性眼病患者建议常规检查颈动脉系统情况。 (中华眼底病杂志，2006，22：376-378）