组织细胞一氧化氮及其合成酶测定的几种方法

组织细胞一氧化氮及其合成酶测定的几种方法北京医科大学心血管基础研究所张灵芝，谭敦勇，周爱儒近年的研究证明，血管内皮舒张因子（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉ－ｕｍ－ｄｅｒｉｖｅｄｒｅｌａｘｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＥＤＲＦ）的主要成分是ＮＯ和前列腺环素（ｐｒｏｓｔａｃｙ...     

自发性高血压大鼠内皮素A型受体基因的表达

应用反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定大鼠ＥＴ－Ａ型受体（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎＡｒｅｃｅｐｔｏｒＥＴＡ－Ｒ）ｍＲＮＡ在体内的分布，证明ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ不仅存在于血管平滑肌细胞，亦存在于内皮细胞中；而且广泛分布于脑、心、肾、肺等组织内。首次发现，在ＳＨＲ大鼠的脑、心、肾组织中，ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ水平明显升高，提示ＥＴＡ－Ｒ基因表达增加，亦可能是高血压发病的一个重要因素。     

转化生长因子β基因在某些心血管疾病中的表达

本文应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交技术，观察了转化生长因子－β基因在家兔动脉粥样硬化斑块、自发性高血压大鼠心肌组织和血管平滑肌细胞中的表达。结果表明，转化生长因子－β基因在上述组织和细胞中的表达均明显增加，血管紧张素Ⅱ可以促进血管平滑肌细胞中ＴＧＦ－β基因的表达，提示ＴＧＦ－β可能在心血管疾病发病过程中起作用。     

心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅵ．一种新的体内基因转移方法

将医用缝合线浸泡在质粒ＤＮＡ溶液中，然后缝合在大鼠股四头肌上，可以观察到外源基因在肌肉组织中高效、稳定地表达，其表达量高于磷酸钙共沉淀和ＤＮＡ沉淀块埋植法，较肌肉直接注射法表达量高１０倍左右。     

对比两种分析微卫星多态性的电泳方法

目的　对比变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Spreadex凝胶电泳两种方法分析微卫星多态性。方法　取 1 1 8例冠心病患者的外周血 ,以高盐沉淀法提取基因组 DNA,经 PCR扩增 HO- 1基因启动子微卫星序列后 ,分别采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Spreadex凝胶电泳两种方法进行基因型分析 ,并选择部分样本以 Sanger末端终止法测定 DNA序列。结果　长度相差 8bp的两条 DNA marker在变性聚丙烯酰胺凝胶上相隔 1 mm;而在 Spreadex凝胶上相隔 8mm,图像清晰且条带分明。同一批样本分别采用两种方法电泳 ,1 1 8个样本中 1 1 0个结果一致 ,两种电泳方法一致性为 93%;对电泳结果不一致的样本重新进行电泳 ,均为变性聚丙烯酰胺电泳结果改变而 Spreadex凝胶电泳结果不变 ,最后两种电泳方法一致性达1 0 0 %。Spreadex凝胶电泳结果与测序结果完全符合。结论　与变性聚丙烯酰胺凝胶电泳相比 ,Spreadex凝胶电泳分辨率较高 ,重复性较好 ,更适用于分析微卫星多态性。     

重组腺病毒相关病毒携带人血管内皮生长因子165诱导家兔缺血心肌血管生成的研究

目的　将携带人血管内皮生长因子 16 5 (hVEGF 16 5 )cDNA的重组腺病毒相关病毒 (rAAV)载体注入家兔缺血心肌 ,观察血管内皮生长因子 (VEGF)的血管生成效应。方法　制作家兔急性心肌梗死模型 ,将rAAV hVEGF 16 5注入缺血心肌。 4周后取注射部位心肌 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)和免疫组织化学、Westernblot方法检测目的基因的表达 ,并计数注射部位心肌毛细血管数目 ,评价外源VEGF的生物学活性。结果　注射rAAV VEGF部位心肌VEGFmRNA及其蛋白的表达可持续 8周 ,而且比对照组增加。远隔脏器未见外源VEGF的播散和表达。注射rAAV VEGF部位毛细血管密度比对照组增加。结论　rAAV hVEGF 16 5可以有效地转染成年家兔心肌组织 ,外源基因稳定长期表达 ,同时能够刺激新血管生成 ,并具有良好的安全性。     

Applications of antisense RNA and DNA in cardiovascular research.

Antisense nucleic acids are DNA or RNA fragments which bind specifically to complementary     

大力加强分子心血管病学的研究

大力加强分子心血管病学的研究汤健，周爱儒心血管系统可以从整体、器官、细胞和分子四个水平进行研究。近年来的研究证明，心血管生理、病理最本质、最核心的问题是基因及其调控的问题。分子心血管病学就是用分子生物学的理论、技术和方法来研究心血管的结构、功能及调节...