白细胞介素-12基因再修饰基因瘤苗免疫小鼠的脾细胞过继治疗肝癌

目的　探讨白细胞介素 (IL) 2和B7 1双免疫基因转染肝癌细胞瘤苗免疫小鼠后获得的脾淋巴细胞经mIL 12基因修饰后治疗小鼠肝癌的可行性和疗效。方法　用 2 0 0PFU 细胞滴度的重组腺病毒载体 (Adv)将人IL 2和B7 1基因共同转染小鼠肝癌Hepal 6细胞株 ,经 80mg L丝裂霉素 (MMC)处理制备成肝癌细胞瘤苗 ,免疫同系小鼠后分离其脾淋巴细胞 (SLC) ,转染mIL 12基因 (Adv滴度 2 0 0PFU 细胞 )后注射入直径 1cm的小鼠皮下移植肝癌内 ,观察抗瘤效果。结果　转mIL 12基因SLC治疗组小鼠瘤体增加值最小 ( 0 .0 8± 0 .0 5 )cm3,与各对照组比差异有显著性 [(转染BGFP基因SLC、未转染SLC和生理盐水注射组分别为 ( 3 .46± 0 .15 ) ,( 3 .5 6± 0 .2 3)和( 8.12± 0 .5 4)cm3,P <0 .0 5 ]。结论　IL 2和B7 1双基因修饰肝癌瘤苗诱导小鼠产生的免疫脾淋巴细胞可能成为一种新的过继免疫治疗效应细胞及携带IL 12基因的载体细胞 ;基因治疗、特异性主动免疫和过继性细胞免疫治疗结合将有更优越的抗瘤效果。     

The Influences of Mifepristone, Norethisterone and Tamoxifen on the Glycosph

ＴｈｅＩｎｆｌｕｅｎｃｅｓｏｆＭｉｆｅｐｒｉｓｔｏｎｅ，ＮｏｒｅｔｈｉｓｔｅｒｏｎｅａｎｄＴａｍｏｘｉｆｅｎｏｎｔｈｅＧｌｙｃｏｓｐｈｉｎｇｏｌｉｐｉｄｓＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｆｒｏｍＨｕｍａｎＣｈｏｒｉｏｎｉｃＴｉｓｓｕｅｄｕｒｉｎｇＥａｒｌｙＰ...     

细胞因子调节对纤连蛋白在孕早期小鼠子宫内膜表达的研究

目的:通过研究细胞因子对FN表达的调节,探讨FN在围着床期子宫内膜表达的调节机理。方法:给孕早期小鼠注射不同的细胞因子,收集子宫内膜。分别用Immuno-blot法及RT-PCR法测定子宫内膜FN蛋白和nRNA的水平。结果:LIF低、高剂量组的FNmRNA和蛋白水平都比对照组高,统计分析差异有显著性（P<0.05,P<0.01）,IL-1和IL-1ra各组FN水平与对照组比无显著差异。结论:LIF在转录和转录后水平上调早期子宫内膜FN的表达,LIF参与着床与调节粘附分子的表达有关。IL-1系统则不影响子宫内膜FN的合成。     

大鼠肝抑素纯化及其生物活性的检测

用ＳｅｐｈａｄｅｃＧ－５凝胶过滤层析法，进一步纯化具肝抑素生物活性的大鼠肝蛋白质粗提品，以分离的大鼠再生肝的肝细胞为靶细胞，体外检测各洗脱峰浓缩物对肝细胞增殖的制率结果证明，Ｅ峰浓缩物的抑制作用最强，其活性比为粗提品的２０倍，ＳＤＳ聚丙烯酰胺电泳图及蛋白质迁移率测定表明，该浓缩物的主要成分为分子量１３．５ｋＤ的多肽。本研究对大鼠肝抑素做了初步纯化，验证了该物质在肝再生中起重要调控作用的生物效应。     

LIF对体外培养小鼠孕早期胚胎发育及ICAM-1表达的影响

目的研究白血病抑制因子（ＬＩＦ）在胚胎发育中的作用并探讨其参与胚泡着床的机制。方法收集昆明种小鼠的单细胞受精卵,连续培养１２０ｈ,观察不同浓度ＬＩＦ对胚胎发育的影响;用免疫印迹法测定培养液中细胞间粘附分子（ＩＣＡＭ－１的表达水平。结果ＬＩＦ在０．１～１０ｎｇ／ｍｌ浓度之间对胚胎发育有促进作用,其作用在桑椹胚及胚泡期最明显（Ｐ＜０．０５）;ＬＩＦ增加胚胎ＩＣＡＭ－１的表达,其作用在０．１ｎｇ／ｍｌ浓度时最强,并随着浓度的增加而减弱。结论适应浓度的ＬＩＦ可促进胚胎发育,增加ＩＣＡＭ－１的表达,从而参与胚胎着床过程。     

多途径丝裂原激活的蛋白激酶介导一氧化氮引起的肝癌细胞凋亡

目的研究非离子型的diazeniumdiolate类一氧化氮供体引起肝癌细胞凋亡的分子机制.方法利用免疫印迹、免疫沉淀、凝胶阻滞实验研究一氧化氮供体处理Hep3B肝癌细胞后,丝裂原激活的蛋白激酶、AP-1的激活以及和Hep3B肝癌细胞凋亡的关系.结果一氧化氮可引起细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶和p38激酶的激活,特别是细胞外信号调节的蛋白激酶的持续激活,其中细胞外信号调节的蛋白激酶和c-jun N末端激酶的特异的阻断剂U0126和JNK抑制剂Ⅱ可阻断AP-1的激活和Hep3B细胞的凋亡,而p38激酶的阻断剂SB203580不能阻断AP-1的激活和Hep3B肝癌细胞的凋亡.结论一氧化氮通过激活细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶,进而激活AP-1而引起Hep3B肝癌细胞的凋亡.     

神经节苷脂GM3,GD3对小鼠巨噬细胞介导的细胞毒作用的影响

目的观察外源性神经节苷脂ＧＭ３、ＧＤ３对人肝癌ＳＭＭＣ┐７７２１细胞的杀伤活力的影响。方法应用３Ｈ┐ＴｄＲ掺入法测定ＧＭ３、ＧＤ３对巨噬细胞的细胞毒作用的影响。结果ＧＭ３、ＧＤ３对巨噬细胞短时间（４５分钟）作用后，两者都对细胞毒产生双相调节，但两者调节作用相反。ＧＭ３、ＧＤ３对巨噬细胞长时间（２４小时）作用后，两者均抑制细胞毒作用，ＧＤ３的抑制作用更强。结论ＧＭ３、ＧＤ３作用于巨噬细胞后对其杀伤ＳＭＭＣ┐７７２１细胞的细胞毒作用产生不同程度的抑制，提示两者在巨噬细胞介导的宿主免疫监视和免疫破坏中发挥作用     

应用TaqMan探针定量检测孕妇血清胎儿游离DNA

目的:探讨应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应(Real timequantitativePCR)技术检测孕妇血清中胎儿游离DNA含量变化的可行性。方法:选择孕21三体男胎的妇女5例为实验组,对照组为孕正常男胎的妇女18例,孕正常女胎的妇女17例,提取其外周血血清中游离DNA,应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术检测Y染色体上的DYS14基因,以此确定母体血清中的胎儿游离DNA含量,并同时检测代表母体与胎儿总游离DNA的βactin基因作为对照。结果:孕21三体男胎组血清胎儿游离DNA含量明显高于孕正常男胎组,它们分别为90.7基因当量(genomeequivalents,GE)/ml及42.8GE/ml(P<0.01),孕21三体男胎组血清中的胎儿游离DNA含量为孕正常男胎组的2.1倍,孕正常女胎组血清中未检测到Y染色体上的DYS14基因。结论:TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术是一种敏感、特异、高效的检测方法,胎儿游离DNA含量变化有可能成为产前筛查唐氏综合征的候选指标。     

α干扰素抑制肝癌转移复发及其机制

肝癌占全世界癌症死亡的第三位，是我国癌症死因的第二位。经过几十年的努力，肝癌研究取得了许多进展，在某些临床中心，肝癌根治性切除后5年生存率可达40％以上（本所治疗的肝癌患者的5年生存率在小肝癌切除术者中约为60％，大肝癌切除术者约为30％）。但术后5年复发率高达60％以上（小肝癌也达40％～50％）。转移复发已成为进一步提高远期疗效的瓶颈问题，     

健康人肝组织麦胚凝集素亲和型糖蛋白表达谱分析

目的分析健康人肝组织麦胚凝集素(wheatgermagglutinin,WGA)亲和型糖蛋白表达谱。方法从30例健康人肝组织混合样本的总蛋白中用WGA凝集素亲和层析分离纯化糖蛋白,再利用双向电泳结合SYPRO Ruby荧光染色进一步分离WGA亲和型糖蛋白。目的蛋白质点经质谱鉴定后对其进行生物信息学分析及功能分类。结果初步建立WGA亲和型糖蛋白的双向电泳图谱,图谱均点数为(650±50)个,质谱鉴定并去冗余共获116个蛋白。经生物信息学分析104个蛋白具有不同程度的N糖基化位点,最后按Gene Ontology的分类原则进行功能分类。结论凝集素亲和层析结合双向电泳荧光染色、质谱鉴定是一种高通量的检测方法,WGA亲和型糖蛋白表达谱的初步构建为后续研究奠定了基础。