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目的 :检测蛋白酪氨酸磷酸酶SHP - 2在IL - 1所促发的细胞移动中的作用。方法 :首先构建重组质粒SHP - 2 -GFP以及SHP - 2C >S -GFP ,并分别转入MCF - 7乳腺癌细胞中 ,建立两种细胞株 ,即 :SHP - 2 -GFP -MCF - 7和SHP - 2C >S -MCF -7。利用细胞移动实验、细胞粘附实验、免疫沉淀、蛋白印迹等生物学实验方法 ,从形态学、蛋白表达量、磷酸化水平等方面分析细胞形态变化、E -钙粘蛋白和基质金属蛋白酶MMP - 1、9在 3种细胞株中的表达情况和细胞因子IL - 1刺激后 3种细胞株中的表达情况 ,进而分析SHP - 2蛋白酪氨酸磷酸酶… 相似文献
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Objective: To study whether mouse sertoli cells can induce the apoptosis of matured T lymphocytes in cocultures in vitro. Methods: With TUNEL, DNA electrophoresis, eleetro-mierography and flow cytometry, we examined the apoptosis and its rates of mouse matured T lymphocytes in control group (T lymphocytes only), group A (T lymphocytes culture medium of sertoli cells), group B (T lymphocytes sertoli cells). Results: Under electro-micrography, chromatin condensation, karyopyknosis, karyorhexis and apoptotic body were observed in some T lymphocytes in 3 groups; some nucleuses were stained dark blue with TUNEL; a typical DNA ladder was found with DNA electrophoresis. The apoptotic rates of T lymphocytes in group A and B were significantly higher than that in control group (P<0.01). The apoptotic rate of T lymphocytes in group B was significantly higher than that in group A (P<0.01). Conclusion: In coculture condition in vitro,mouse sertoli cells can induce the apoptosis of matured T lymphocytes. 相似文献
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目的:探讨体外联合培养条件下睾丸足细胞能否诱导T淋巴细胞凋亡。方法:用TUNEL标记、核酸电泳、电镜、流式细胞术检测对照组(T淋巴细胞)、A组(T淋巴细胞+培养睾丸足细胞24h培养基上清)、B组(T淋巴细胞+睾丸足细胞)等3组中小鼠成熟T淋巴细胞的凋亡及其数量的变化。结果:3组T淋巴细胞在电镜下均可见细胞染色质浓集,核固缩裂解,凋亡小体形成;TUNEL标记见部分细胞核染色呈深蓝色;核酸电泳出现展开 相似文献
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体外联合培养条件下小鼠睾丸足细胞诱导成熟T淋巴细胞凋亡 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨体外联合培养条件下睾丸足细胞能否诱导 T淋巴细胞凋亡。方法 :用 TU NEL 标记、核酸电泳、电镜、流式细胞术检测对照组 (T淋巴细胞 )、A组 (T淋巴细胞 +培养睾丸足细胞 2 4h培养基上清 )、B组 (T淋巴细胞 +睾丸足细胞 )等 3组中小鼠成熟 T淋巴细胞的凋亡及其数量的变化。结果 :3组 T淋巴细胞在电镜下均可见细胞染色质浓集 ,核固缩裂解 ,凋亡小体形成 ;TUNEL 标记见部分细胞核染色呈深蓝色 ;核酸电泳出现典型 DNA梯状带 ;流式细胞术检测 A,B两组 T淋巴细胞凋亡量均明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,B组 T淋巴细胞凋亡数量显著高于 A组 (P<0 .0 1)。 结论 :体外培养条件下小鼠睾丸足细胞能够诱导成熟 T淋巴细胞凋亡。 相似文献
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白血病抑制因子受体中gp130细胞内区诱导白血病细胞Meg-01内c-myc的表达 总被引:2,自引:2,他引:0
观察人白血病细胞系Meg-01白血病抑制因子(LIF)受体α亚基(gp190)和另一亚基gp130细胞内区与c-myc的关系,以探明白血病细胞过度增殖和晚期分化异常的机制。方法:用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体(190/130,130190),并分别在Meg-01表达,其与 相似文献
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血管内皮生长因子在大鼠实验性关节炎模型中表达的动态观察 总被引:9,自引:0,他引:9
目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠实验性关节炎模型中的表达,探讨VEGF在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用。方法:30只雄性Wistar大鼠采用皮下注射Ⅱ型胶原的方法诱导实验性关节炎模型,并随机分为6组,每组5只。致敏1、2、3、4、5、6周后分别将各组动物处死,采用免疫组织化学方法对组织中表达的VEGF进行观察,并采用计算机图像分析的方法对各时期VEGF的表达量进行定量分析。结果:大鼠在接受胶原致敏后2周左右发病,滑膜组织中的VEGF蛋白的分泌与炎症发展密切相关。结论:VEGF参与了实验性关节炎滑膜血管翳的形成过程,在RA的发病机制中具有重要意义。 相似文献
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小鼠睾丸支持细胞的分离培养与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:分离培养小鼠睾丸支持细胞并进行鉴定.方法:取18~20 d雄性小鼠的睾丸,酶消化法原代培养.用RT-PCR的方法克隆带有锌指结构域的支持细胞基因SERZ,与pcDNA3.0连接后构建重组质粒pcDNA3.0-SERZ.用Kpn Ⅰ和XbaⅠ分别酶切质粒pcDNA3.0-SERZ,获得线性化模板进而合成探针.原位杂交检测SERZ mRNA在培养细胞中的表达;用RT-PCR的方法检测雄激素结合蛋白(ABP)在支持细胞中的表达.结果:支持细胞多为多边形,核呈三角形或不规则形,染色浅,核仁明显,细胞完全铺开,成膜状,相邻细胞之间交织连接,细胞纯度为(85.1±2.5)%.SERZ mRNA在培养细胞的胞质中高水平表达.RT-PCR结果表明我们分离的支持细胞能够表达ABP mRNA.结论:我们成功分离和鉴定了小鼠睾丸支持细胞,纯度为(85.1±2.5)%. 相似文献
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白血病抑制因子受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞增殖分化的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨白血病抑制因子 (LIF)受体α亚基胞内区远膜端对HL 60细胞增殖分化的影响。方法 构建LIF受体α亚基胞内区远膜端 (gp190CT3 )真核表达载体 ,利用脂质体转染HL 60细胞 ,G418筛选阳性细胞株 ,免疫组化检测其表达。倒置显微镜观察野生型HL 60细胞及转染有gp190CT3的HL 60细胞的生长状态。以Westernblot及流式细胞仪分别检测野生型HL 60细胞及转染有gp190CT3的HL 60细胞中细胞增殖核抗原 (PCNA)及CD15水平。 结果 转染有gp190CT3的HL 60细胞体积增大 ,与野生型HL 60细胞相比 ,转染有gp190CT3的HL 60细胞增殖速度减慢 ,PC NA的表达水平明显降低 ,而CD15水平明显升高 (转染有gp190CT3的HL 60细胞中CD15阳性细胞百分率为 89.98% ,野生型HL 60对照组中CD15阳性细胞百分率为 40 .79% )。结论 LIF受体α亚基胞内区远膜端参与LIF受体的信号转导 ,其效应是抑制细胞的增殖 ,促进细胞分化。 相似文献