细小病毒H-1诱导胃癌细胞死亡分子机制的基因表达谱研究

背景：自主性细小病毒H—1在活体组织中具有肿瘤抑制活性，并且在细胞培养中能特异地干扰转化细胞或肿瘤细胞的生存，但其诱导转化细胞死亡的分子机制尚不十分清楚。目的：研究细小病毒H—1诱导人胃癌细胞株HGC—27死亡时HGC—27细胞基因表达的变化，进而为阐明细小病毒H—1的抗肿瘤机制奠定基础。方法：采用四唑蓝(MTT)比色法分析HGC—27细胞在感染细小病毒H—1后不同时间点的存活率；分别收集纯化细小病毒H—1感染前和感染48h后HGC—27细胞的mRNA，应用基因表达谱芯片技术研究HGC—27细胞感染细小病毒H—1后的基因表达变化。结果：HGC—27细胞从感染细小病毒H—1后的第3天开始，细胞存活率呈明显下降趋势；感染细小病毒H—148h后，基因表达谱发生了明显的变化，表达改变基因约占被检测基因的11.5％(920／8000)，363对基因的表达明显下调，557对基因的表达明显上调。其中与细胞信号传导、细胞周期、细胞凋亡相关的部分基因表达改变与细小病毒H—1诱导的细胞死亡通路相关；而与DNA合成和修复、代谢以及蛋白质合成相关的部分基因表达改变可能与细胞对外界刺激的防御反应相关。结论：细小病毒H—1诱导人胃癌HGC—27细胞死亡的过程是以一种细胞依赖的方式进行的，并涉及细胞中多个促进死亡的信号传导通路。细小病毒H—1诱导胃癌细胞死亡以及胃癌细胞自身防御反应中所展示的基因表达差异谱，为研究细小病毒H—1抗肿瘤作用的分子机制提供了初步的线索。     

重组细小病毒H-1(rhH1△/p21)对胃癌细胞HGC27生长抑制作用的研究

目的:了解重组细小病毒H-1(rhH1△/p21)对胃癌细胞株HGC27的作用,为进一步研究p21wif1的生物学作用以及肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:采用RT-PCR技术,构建表达p21蛋白的重组细小病毒H-1(rhH1△/p21),并将其转染胃癌细胞HGC27,观察细胞形态学改变,用Western blot检测转移基因蛋白在胃癌细胞中的表达,用MTT法检测其对HGC27细胞生长的抑制作用,用流式细胞仪分析其对细胞周期的影响。结果:成功构建重组细小病毒H-1(rhH1△/p21),所得病毒滴度达到3.5×107PFU/mL,在胃癌HGC27细胞中成功过表达转移基因蛋白p21,使胃癌细胞株细胞周期比例改变,G1期含量明显增加,并抑制其增殖。结论:重组细小病毒H-1(rhH1△/p21)可诱导胃癌细胞株HGC27细胞G1期阻滞,抑制细胞增殖,该基因疗法可有效抑制体外胃癌细胞的生长。。     

基因芯片技术在细小病毒H-1诱导胃癌细胞基因表达研究中的应用价值

目的 探讨基因芯片技术在细小病毒H-1诱导胃癌细胞HGC27相关基因表达改变研究中的应用价值。方法 分别收集H-1病毒感染前与感染48h后胃癌细胞HGC27，分离并纯化细胞mRNA，运用基因芯片技术，通过荧光染料标记、芯片杂交、洗涤、扫描及数据分析等步骤，得到H-1病毒感染前后胃癌细胞HGC27中表达改变的相关基因谱。对基因芯片结果中部分表达有改变的基因进行RT-PCR、Northern blot的分析鉴定。结果 胃癌细胞HGC27感染H-1病毒48h后的基因芯片结果显示：在被检测的8000条目的基因中，920条基因的表达明显改变，β-raf、creb、p38-γ、rad21、sarp1等部分表达有改变基因的RT-PCR和Northern blot鉴定结果显示，与表达谱芯片的结果基本一致。结论 基因表达谱芯片技术是大规模平行监测多基因表达的一种有效方法，可有效地用于细小病毒H-1抗肿瘤机制的研究。     

胃癌分化相关基因研究进展

胃癌的发生、发展涉及多种基因,包括癌基因、抑癌基因、细胞周期调节因子和转移相关基因等的改变。按组织病理学分型,胃癌可分为肠型和弥漫型(Lauren分型)、膨胀型和浸润型(Ming分型)或分化型和未分化型(日本分型)。通过分型可以区分两种在流行病学、病因学、发病机制和生物学行为方面均有所不同的胃癌,其中肠型、膨胀型和分化型属高分化型,而弥漫型、浸润型和未分化型属低分化型。这两种组织类型胃癌的基因改变情况是有差异的,这种分子基因改变的差异进一步提示了两者的发生、发展具有截然不同的基因通路。本文就近年来不同分化类型胃癌中的基因改变作一综述。     

新疆白刺叶中异鼠李素-3-芸香糖苷的含量分析

目的 分析新疆产白刺叶中黄酮类成分异鼠李素-3-芸香糖苷的含量,对新疆白刺的品质评价和质量控制提供依据。方法 采用HPLC法对新疆白刺叶中异鼠李素-3-芸香糖苷进行含量分析。色谱柱：Diamonsil C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流速：1 ml/min;柱温：26℃;检测波长：360 nm。结果 新疆白刺叶中异鼠李素-3-芸香糖苷在0.007 813~1 mg/ml的范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.13%,RSD=3.02%。结论 异鼠李素-3-芸香糖苷在白刺叶中的含量存在较大的种内和种间差异。该方法操作简单,检测结果准确,重复性好,可作为新疆白刺叶中异鼠李素-3-芸香糖苷的定量分析方法。     

细小病毒H-1感染对有丝分裂原激活蛋白激酶信号传导相关基因表达的影响

目的 探讨具有选择性杀伤和抑制肿瘤细胞生长特性的细小病毒H－1所诱导的胃癌细胞死亡的信号传导通路及可能机制。方法 采用RT－PCR的方法，检测H－1病毒感染后胃癌细胞HGC27的有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号传导途径相关基因在mRNA水平的表达改变。结果 MAPK信号传导相关基因的扩增结果显示：在H－1病毒感染HGC27细胞48h后，细胞CREB基因的表达明显增高，ERK1、STAT2、p38-γ、MEK2、β－RAF、MTK1基因的表达明显降低，而JNK2、ETS2、ERK2大mRNA水平的表达无明显改变。结论 细小病毒H－1的细胞毒作用可能与其影响胃癌细胞MAPK信号传导途径中相关基因的表达有关。即H－1病毒通过干预癌细胞信号传导的特定通路而诱导细胞死亡。由此我们认为，可修饰改造的细小病毒H－1，将是抗肿瘤研究中的一个非常有价值的工具。     

硬膜外麻醉患者术中及术后不同体位的比较

目的:探讨硬膜外麻醉术中及术后不同体位对患者的影响,从而找到合适的体位。方法:对硬膜外麻醉的患者术中和术后进行不同体位的比较,观察生命体征的变化,比较去枕组和置枕组患者的情况。结果:通过对160例临床病例的观察,硬膜外麻醉手术的患者,血压、脉搏、呼吸及术后头痛、头晕、腰痛等发生率,去枕组与置枕组比较差异无显著性。结论:对于硬膜外麻醉术后的患者无特殊原因时,置枕平卧对患者的心理及躯体均有益。     

表没食子儿茶素没食子酸酯抗消化道肿瘤作用的实验研究

背景：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有抗肿瘤作用，但是其有效浓度和可能作用机制尚不十分清楚。目的：研究EGCG对不同消化道肿瘤细胞株的杀伤作用及其抗肿瘤作用的靶位点，为其应用于临床肿瘤治疗奠定理论基础。方法：采用四唑蓝(MTT)比色法检测8株消化道肿瘤细胞株对EGCG敏感性的差异；采用流式细胞仪检测EGCG对敏感肿瘤细胞株细胞周期分布的影响；采用聚合酶链反应(PCR)-酶联免疫吸附测定(ELISA)检测EGCG对敏感肿瘤细胞株端粒酶活性的影响。结果：EGCG对8株消化道肿瘤细胞株均具有剂量依赖性杀伤作用。SW1116和MKN45细胞对EGCG最敏感，半数抑制浓度(IC50)分别为51．7μmol／L和55．9μmol／L；BGC823和SGC7901细胞次之，IC50分别为68．5μmol／L和79．1μmol／L；AGS细胞对低浓度EGCG不敏感，对高浓度EGCG敏感，IC50为83．8μmol／L；MKN28细胞对EGCG中等敏感，IC50为119．8μmol／L；HGC27和LoVo细胞对EGCG不敏感，IC50分别为183μmol／L和194．6μmol／L。3种不同浓度的EGCG作用48h后，敏感肿瘤细胞株MKN45的细胞周期分布与对照组相比均无明显改变。EGCG可抑制MKN45细胞的端粒酶活性，其作用呈剂量和时间依赖性。结论：EGCG对不同消化道肿瘤细胞株具有不同程度、呈剂量依赖性的杀伤作用；对敏感肿瘤细胞株MKN45的细胞周期分布无明显影响。EGCG的抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞的端粒酶活性有关。     

细小病毒H-1感染对胃癌细胞核修复相关基因表达的影响

目的 探讨细小病毒H-1诱导胃癌细胞死亡的可能机制。方法 选取对细小病毒H-1敏感和不敏感的胃癌细胞株HGC27和BGC823，H-1病毒感染48h后提取细胞总RNA。应用不同标记的dCTP逆转录制备荧光探针，与含有8000点人类体细胞基因序列的表达谱cDNA芯片杂交，计算机荧光扫描分析HGC27细胞核修复相关基因表达谱的改变。实时定量PCR检测HGC27和BGC823细胞部分核修复相关基因的表达。结果基因芯片分析显示，HGC27细胞的64对核修复相关基因中，12对基因表达水平下调至0．5以下，6对基因表达水平上调至2倍以上。PCR定量检测证实，HGC27细胞BTG2表达明显下调，MBD2表达显著上调，XRCC4和H2A-Z的表达无明显改变；BGC823细胞BTG2表达明显下调，XRCC4、H2A．Z和MBD2表达无明显改变。结论 细小病毒H-1可能通过影响胃癌细胞核修复通路相关基因的表达，使细胞基因转录或细胞周期停止，从而诱导胃癌细胞死亡。     

恪守办刊初心 创办精品期刊

2019年12月20日,《中华消化杂志》第十届编辑委员会成立。面对机遇和挑战,《中华消化杂志》将恪守为读者和作者服务的办刊初心,创新办刊理念,创办精品期刊,与中国消化事业共同成长,为实现健康中国战略做出更大贡献。