问号钩端螺旋体胶原酶结构和功能分析

目的：研究问号钩端螺旋体(简称问号钩体)致病机理，预测问号钩体胶原酶结构和功能，为进一步实验验证提供线索。方法：利用各种公共核酸及蛋白数据库资源，运用多种生物学软件对钩体胶原酶基因及其编码产物的结构和功能深入分析。结果：对问号钩体胶原酶进行了结构域归类；对其基因、蛋白的一般特性，蛋白一级结构，二级结构和超二级结构等作了对比性分析；对其序列中的部分片段：进行三维结构模拟；并绘制了其分子进化树，分析其垂直进化关系。结论：问号钩体胶原酶和其它多：种致病性微生物胶原酶具有不同层次、程度不等的相似性。它属于锌蛋白酶超家族和M9-蛋白酶家族。它可能在钩体浸润宿主并造成宿主多脏器出血等方面起重要作用。     

HIV和HCV联合感染研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染后，80％将发展为慢性肝炎：HCV感染30a后，约20％发展为肝硬化，4％演变为肝细胞肝癌(HCC)^[1]。人类免疫缺陷病毒(HIV)感染后，经历2．10a的无症状期，将发展为获得性免疫缺陷综合症(AIDS)，最终因机会感染和机会肿瘤而死亡。HCV感染病人中HIV联合感染率为10％，HIV感染病人中HCV联合感染率为7％．57％。HIV-HCV联合感染时，二者可相互影响；针对HIV和HCV的抗病毒治疗也可能影响HCV感染和HIV感染的结局。本文对HIV-HCV联合感染的研究进展作简要综述。     

肝再生增强因子在肝癌细胞中的表达及意义

目的研究肝再生增强因子(ALR)对肝癌细胞和原代大鼠肝细胞增殖作用的影响及在肝细胞癌(HCC)中的表达。方法将不同种属的ALR分别与原代大鼠肝细胞和人肝癌细胞株QGY和HepG2共同培养后，用^3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定这些细胞的增殖情况。并应用免疫组织化学法对9例正常肝组织和21例HCC组织中ALR的表达进行了研究。结果不同种属的ALR在体外均能刺激人肝癌细胞株QGY和HepG2增殖，并呈剂量依赖关系，但对原代大鼠肝细胞均无刺激增殖作用。在正常肝组织中ALR不表达，但在HCC肝组织中ALR均表达，且ALR的表达程度与HCC分化程度和大小均无关。结论ALR可能在HCC的发生发展中起着重要作用。     

SARS相关冠状病毒的研究进展

冠状病毒和与SARS相关的冠状病毒：第一个冠状病毒是1937年从鸡身上分离出来的。由于在电子显微镜下其形态呈现日冕状或皇冠状而得名。此后至少有15种不同的冠状病毒被发现。根据目前所知，冠状病毒科只感染脊椎动物，与人和动物许多疾病相关。引起人类疾病的冠状病毒主要表现为呼吸道和消化道感染。冠状病毒感染非常普遍，虽然人冠状病毒感染可解释30％的普通感冒，但它们极少导致下呼吸道疾病，也从未造成SARS这么严重的后果。     

大鼠肝再生增强因子在酵母菌中的表达及生物活性研究

目的构建大鼠肝再生增强因子(rALR)酵母重组表达质粒,在毕赤酵母菌GS115中进行表达.表达产物经超滤方法纯化后在体外进行生物活性研究. 方法以重组质粒pcDNA3.1-rALR为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增rALR编码区的DNA,构建重组质粒pPIC9K-rALR,然后电转化至毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下进行表达.表达产物经1.5% SDS-PAGE电泳和western blot鉴定后进行超滤纯化.用3H-TdR掺入法检测重组大鼠ALR(rrALR)体外刺激QGY和HepG2人肝癌细胞株和原代大鼠肝细胞的增殖情况. 结果重组质粒经酶切及PCR证实rALR编码区DNA正确插入质粒载体中.重组大鼠ALR被GS115菌以外分泌方式表达,其DNA分子量约为1.5×104,与理论预期值相符,western bolt鉴定发现rrALR能与抗人ALR多克隆抗体发生特异性反应,说明人和大鼠ALR抗原性上存在部分交叉.超滤纯化获得大量高纯度的rrALR.在所测定的剂量范围内,rrALR在体外以剂量依赖方式刺激QGY和HepG2肝癌细胞株增殖,但对原代大鼠肝细胞无刺激增殖作用. 结论 rrALR在毕赤酵母菌GS115中获得分泌性高效表达,rrALR在体外以剂量依赖方式刺激QGY和HepG2肝癌细胞株增殖,但对原代大鼠肝细胞无刺激增殖作用,表明肝癌细胞和正常肝细胞表达的ALR受体不同.人和大鼠ALR在生物学活性和抗原性上存在交叉.