柯萨奇病毒B组IgM抗体检测抗原片的研制,优化及应用价值的研究

正柯萨奇病毒B组(CoxB)是单股正链小RNA病毒,是呼吸道感染的主要病原体之一。根据血清型,该B组病毒可分为B1、B2、B3、B4、B5、B6六种类型,主要侵犯免疫力底下的围生儿,可引起脑膜炎,中枢神经系统感染等多种疾病,亦是引起病毒性心肌炎的主要病原体之一,占病毒性心肌炎诱因的20%-25%,病情严重者可导致死亡。CoxB传染源为病人及隐性感染者,可经口、呼吸道、肠道传播或胎儿宫内传染。     

MMP-2和MMP-9在胃癌患者组织和血清中的表达及临床意义

目的研究胃癌患者血清及其癌组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）水平,探讨与胃癌临床病理参数的关系。方法收集38例胃癌患者的癌组织和术前血清标本,用免疫组织化学PV-9000通用型二步法和ELSIA法对胃癌患者组织及血清中MMP-2和MMP-9的含量与表达检测。结果MMP-2和MMP-9在胃癌组织中的阳性表达率分别为94．7％和86．8％,与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关（P〈0．05）;胃癌患者血清中MMP-2水平与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）;胃癌患者血清中MMP-9的含量明显高于正常对照组,差异有显著性（P〈0．05）,且其含量与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关（P〈0．05）。结论MMP-2和MMP-9在胃癌组织中高表达,并与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关;胃癌患者血清中MMP-2的含量与组织中MMP-2的表达没有相关性,血清中MMP-9的含量与组织中MMP-9的表达具有相关性,且与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关。     

风疹病毒E1蛋白克隆表达及应用

目的 构建表达风疹病毒蛋白抗原的重组质粒及工程菌,获得纯化的E1蛋白抗原,用于检测风疹病毒特异性抗体IgM.方法 克隆表达风疹病毒E1重组蛋白,利用产物建立IgM捕获ELISA方法鉴定其抗原性及实用性.结果 表达纯化的E1蛋白经酶标记建立IgM捕获ELISA方法,检测53份抗风疹病毒IgM阳性血清和67份阴性血清,用酶标记E1蛋白建立的捕获ELISA法阳性检出率98.1%,阴性检出率100%,与意大利SORIN公司试剂盒检测结果比较,无统计学意义(P＞0.05);其中1份风疹病毒(IgM)阳性血清1∶16稀释后仍能与抗原反应,初步表明E1蛋白抗原表位有较好的抗原特异性.结论 高效表达纯化的E1蛋白抗原性强,利用其建立的IgM捕获ELISA方法,可用于检测风疹病毒抗体.     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白—新型急性肾损伤的早期诊断标志物

<正>中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL)属于脂质运载蛋白家族(lipocalin)的一员,作为新型急性肾损伤的早期诊断标志物与临床常用的肌酐、尿量等传统检测指标相比,更能迅速、灵敏地反映肾脏的损伤及恢复过程,用于早期急性肾损伤(acute kidney injure,AKI)的诊断更具有特异性和敏感性。     

人卵GST-ZP3融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性的检测

目的:在大肠杆菌中表达人卵透明带3(Human zona pellucida3,HuZP3)蛋白并对其进行纯化。方法:将HuZP3基因的核心片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和序列分析后,用重组质粒转化E.coli BL21,经IPTG诱导产生GST-HuZP3融合蛋白并通过Glutathione Sepharose 4B纯化。以纯化的融合蛋白免疫纯系Balb/C小鼠制备抗血清。抗血清的效价采用ELISA检测。结果:成功地构建GST-HuZP3融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中高效表达特异性的GST-HuZP3融合蛋白。以该融合蛋白免疫小鼠获得高效价抗GST-HuZP3抗血清,且该抗血清可识别大肠杆菌表达的重组ZP3。结论:获得高表达的GST-HuZP3融合蛋白并证实其具有良好的免疫原性,可作为抗原研制开发检测不孕妇女体内是否存在抗自身ZP3抗体的诊断试剂盒。     

益肾兴阳胶囊质量标准的研究

本制剂已收载于部颁标准中[1] ,原标准鉴别项下有黄芪、人参、菟丝子、蚕蛾等药材的显微鉴别及淫羊藿苷的鉴别。为进一步提高制剂质量,本文在原有基础上又增加了人参和黄芪的薄层鉴别法,并采用高效液相色谱法测定制剂中有效成分淫羊藿苷的含量,经对同仁堂提供的3批样品的质量检查,结果均可检出上述成分,而淫羊藿苷含量分别为0 .93,0 .6 8,0 .6 2mg/粒。通过研究证明本法准确、灵敏、专属性强,可作为质控内容,补充于原标准中,从     

精浆中延胡索酸酶活力的测定及临床意义

精子活动率是男性授孕的一项最重要的因素,为精子尾部运动提供主要能量的是通过果糖分解和三羧酸循环合成的ATP。与ATP合成有关的酶及底物的报道已有许多,但对于精浆中延胡索酸酶(E、C、4、2、1、2)的报道却很少。笔者收集了男性不孕患者的精液,测定分析精浆中延胡索酸酶的活力及与精子质量的关系。 材料和方法 收集了64例年龄在25～34岁之间,禁欲4天以上的男性不孕患者的精液,按操作规程测定了每份精液的体积,精子数量及活动度,然后用1200g离心20分钟,将精子与精浆分离,分离后     

前S1抗原与其他乙型肝炎表面标志物的相关性及其临床意义

目的 研究前S1抗原与其他乙型肝炎表面标志物的相关性及其临床意义。方法ELISA法和定量PCR法对290份慢性乙型肝炎患者血清进行了HBV preS1-As、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HbcAb、HBV—DNA及丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）联合检测。结果 在HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组中前S1抗原阳性所占比例为71．01％，显著高于HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组30．97％和HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组41．07％（P〈0．05）；ALT、AST升高率均有显著性意义。结论 前S1抗原与其他乙型肝炎表面标志物有一定相关性，在实际工作中两种方法可协同检测，相互补充。     

姜黄素对SW480细胞株诱导分化的研究

目的探讨姜黄素对SW480(人结肠癌细胞)细胞株诱导分化机制。方法应用MTT比色法和流式细胞仪测定细胞周期的变化。并通过电子显微镜观察诱导分化后的亚细胞结构。结果姜黄素对SW480细胞增殖有明显的抑制作用。且呈时间、剂量依赖性,流式细胞仪分析G1期细胞堆积、S期细胞减少、G2/M期细胞增多、亚细胞结构、细胞空化、核仁不规则、染色质趋边凝集。结论姜黄素能够抑制SW480细胞增殖,阻止G1期细胞向S期转化的进程,促进SW480细胞凋亡。     

基质金属蛋白酶与肿瘤侵袭、转移的相关性

人体细胞的增殖与分化在正常情况下是个有序的过程，受到各种机制的调节，可以有效控制细胞增殖的速度。当细胞突变后，这一正常过程受到破坏，取而带之的是非正常细胞无序的增长和分化，某些调节机制受到破坏，形成大量多余细胞，即肿瘤。肿瘤细胞能侵犯破坏周围组织细胞，还可以发生侵袭、转移，目前研究表明，肿瘤的侵袭和转移都需要借助于蛋白酶的表达和激活。