粉防己碱上调Smad7表达抑制大鼠肝星状细胞活化

目的观察低浓度粉防己碱(Tetrandrine,Tet)对培养的大鼠肝星状细胞(HSC)活化和转化生长因子β1(TGFβ1)促活化作用的影响,并探讨该作用与TGFβ1受体后信号通路的关系。方法HSC原代培养,给予Tet(0.4、0.8、1.6和3.2μmol·L-1)处理,免疫细胞化学法检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)表达,或给予TGFβ1(质量浓度5μg·L-1)和(或)Tet(1.6μmol·L-1)干预,分别以RTPCR和Westernblot法检测TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体、Smad3、Smad7以及αSMAmRNA和(或)蛋白表达。结果Tet(0.4～3.2μmol·L-1)能抑制培养HSC表达αSMA。Tet(1.6μmol·L-1)抑制TGFβ1诱导的HSCαSMA表达,伴有Smad7表达上调及TGFβ1表达下降,但不影响TGFβⅠ、Ⅱ型受体和Smad3表达。结论低浓度Tet抑制培养HSC的活化和TGFβ1促活化作用,该作用与上调Smad7表达并抑制TGFβ1有关而不影响TGFβ受体表达。     

大黄与粉防己碱抗实验性肝纤维化的对照研究

目的 研究大黄和粉防己碱(Tet)对大鼠实验性肝纤维化的影响并探讨其可能的作用机制。方法 四氯化碳皮下注射法制备大鼠肝纤维化模型，分别给予大黄和Tet灌胃。酶动力法测定肝功能，放免法测定细胞外基质(ECM)，HE、VG染色检测肝组织病理形态学改变，随机抽取样本电镜下观察超微结构改变。结果 大黄与Tet均可改善肝纤维化时的肝功能状态，降低ECM含量，降低肝纤维化程度，以大剂量大黄和小剂量Tet效果最显著。结论 大黄与Tet可保护肝细胞，抑制ECM合成，具有防治实验性肝纤维化和肝硬化的作用。     

日本结直肠癌总观

第二次世界大战以来,日本结直肠癌的发病率显著上升。日本结肠直肠癌学会于1980年开始了一项多机构参与的结直肠癌登记研究。 方法:对1974～1986年间的38369例患者和1991～1994年间的26360例患者的临床和病     

Smad7和uPA基因共表达对大鼠肝星状细胞生物学特性的影响

目的 观察Smad7和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)基因共表达对体外培养肝星状细胞(HSC)活化,分泌胶原特性的影响.方法 采用胶原酶原位灌注、密度梯度离心法分离大鼠HSC,将AdSmad7/uPA或AdSmad7体外感染HSC后,Western blotting法检测细胞总蛋白中Smad7、抗人α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原α2链(Col Ⅰ A2)的表达;ELISA法检测培养上清中uPA蛋白的分泌量;放射免疫法测定HSC培养上清中Ⅲ型前胶原(PⅢP)和层黏连蛋白(LN)的分泌量.结果 AdSmad7/uPA感染体外培养HSC,3 d后观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,转染效率＞90%,Smad7和uPA蛋白的表达量明显高于AdGFP对照;AdSmad7/uPA或AdSmad7转染HSC均可使α-SMA、Col Ⅰ A2、PⅢP和LN水平较AdGFP对照组显著下降(P＜0.05).与转染AdSmad7相比,转染AdSmad7/uPA后的HSC中Col Ⅰ A2、PⅢP和LN表达降低更明显,分别较前者降低44.5%、30.4%和28.4%(P＜0.05).结论 Smad7和uPA基因共表达可协同抑制体外培养的大鼠HSC分泌细胞外基质成分.     

肝星状细胞与肝纤维化

1　肝纤维化的基本概念(1)肝纤维化是指各种原因所致的肝脏内纤维结缔组织增生,其特征为大量细胞外基质在Ｄｉｓｓｅ间隙沉积。(2)肝纤维化时不仅细胞外基质含量增加,而且细胞外基质的组成成分也发生了改变,正常肝脏Ｄｉｓｓｅ间隙细胞外基质是构成基底膜的成分,而肝纤维化时细胞外基质为形成纤维的胶原和纤维连接蛋白〔1〕。(3)在各种原因引起的肝纤维化中,肝脏细胞外基质含量均增加,但原因不同的肝纤维化早期,其肝脏增加的细胞外基质分布是不同的,如病毒性肝炎引起的肝纤维化主要分布在门脉区,而酒精引起的肝纤维化主要分布在中央静脉周围…     

Smad7基因过表达对L02肝细胞株增殖的影响

日的观察外源Smad7基因对L02肝细胞株增殖活性的影响。方法分别以重组腺病毒AdSmad7和对照病毒AdGFP在体外感染L02肝细胞，以RT—PCR和Western—blot检测外源Smad7基因表达情况，MTT法检测L02肝细胞增殖活性，流式细胞仪检测其细胞周期变化。结果AdSmad7体外感染L02肝细胞后，Smad7 mRNA和蛋白水平均显著上调。转化生长因子B(TGFB)可抑制L02细胞增殖，诱导其凋亡。导入外源Smad7可拮抗TGFβ的作用。结论利用AdSmad7导入外源Smad7基因可间接促进肝细胞增殖，抑制其凋亡。     

大鼠白细胞介素-10基因全长cDNA的克隆和鉴定

背景：肝纤维化病程迁延且药物治疗效果不理想．基因治疗将成为这一领域研究的热点。研究显示白细胞介素(IL)-10对肝脏具有保护作用，可阻止肝纤维化的发生、发展。目的：克隆并鉴定Sprague-Dawley(SD)大鼠IL-10基因的全长cDNA，为进一步构建大鼠IL-10腺病毒重组子和肝纤维化基因治疗的研究奠定基础。方法：自行设计IL-10上下游引物，以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从SD大鼠脾脏单核细胞中扩增编码大鼠成熟IL-10肽链的cDNA片断。扩增产物与连接载体pMD-18T连接后转化感受态菌DH5α，构建重组载体pMD-18T-IL-10。结果：以SD大鼠脾脏单核细胞总RNA为模板，RT—PCR扩增出大小为540bp的大鼠IL-10 cDNA片断。所构建的重组质粒经HindⅢ KvnⅠ双酶切显示含有目的基因片段，测序结果证实扩增出的DNA片断与大鼠IL-10基因序列相符，表明编码区无基因突变。结论：成功地克隆了大鼠IL-10基因的全长cDNA，并构建了重组载体pMD-18T-IL-10。     

血小板源生长因子调控肝星状细胞增殖的机制

血小板源生长因子具有促进肝星状细胞增殖的作用,其详细机制不明,可能涉及到血小板源生长因子与其受体结合后进一步影响三磷酸肌醇激酶、钙通道、信号转导及转录活化蛋白、细胞外信号调节激酶、磷脂酶C-γ1及钠-氢交换等。     

Smad7基因过表达对L02肝细胞株增殖的影响

目的观察外源Smad7基因对L02肝细胞株增殖活性的影响.方法分别以重组腺病毒AdSmad7和对照病毒AdGFP在体外感染L02肝细胞,以RT-PCR和Western-blot检测外源Smad7基因表达情况,MTT法检测L02肝细胞增殖活性,流式细胞仪检测其细胞周期变化.结果 AdSmad7体外感染L02肝细胞后,Smad7 mRNA和蛋白水平均显著上调.转化生长因子β(TGFβ)可抑制L02细胞增殖,诱导其凋亡.导入外源Smad7可拮抗TGFβ的作用.结论利用AdSmad7导入外源Smad7基因可间接促进肝细胞增殖,抑制其凋亡.