结直肠癌C-erbB-2基因启动子CpG岛甲基化状态及其与C-erbB-2蛋白表达的关系

目的了解结直肠癌组织C—erbB-2基因启动子区CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平及两者之间的关系。方法取经病理确诊的43例结直肠癌组织和相应癌旁组织，分别用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和免疫组织化学法（IHC）检测C-erbB-2启动子区CpG岛的甲基化和C-erbB-2蛋白表达水平。结果癌组织和癌旁组织中C—erbB-2启动子区CpG岛甲基化率分别为44．2％和74．4％，差异具有统计学意义（P=0．004）。癌组织和癌旁组织中C—erbB-2蛋白过度表达率分别为67．4％和27．9％，差异具有统计学意义（P=0．000）。C—erbB-2蛋白表达水平与肿瘤分期相关。结直肠癌组织C—erbB-2启动子区CpG岛甲基化状态与C—erbB-2蛋白表达水平呈显著相关（r=0．331，P=0．03）。结论结直肠癌中C—erbB-2基因启动子区CpG岛的低甲基化可能在C—erbB-2蛋白过度表达中起一定作用，有望成为有用的肿瘤分子诊断标记和治疗靶点。     

液相色谱串联质谱法检测血清载脂蛋白C的酶解效率

目的分析液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)检测载脂蛋白(apo) C-Ⅰ、C-Ⅱ和C-Ⅲ的酶解效率,为其准确定量检测提供依据。方法对不同apo C含量的混合人血清样品进行变性、还原、烷基化等前处理,经胰蛋白酶酶解,用LC-MS/MS定量检测目标肽段;分析多肽释放图谱和样品间多肽释放的相关性。结果肽段TP(apo C-Ⅰ)、TY(apo C-Ⅱ)和GW(apo C-Ⅲ)的响应值较高。酶解1 h时,肽段ES和DA即达释放峰值; 3 h时,TY释放最充分;而TP、GW和EF的释放速率相对较慢,在8 h达最高值。TP、TY和GW达峰值后,峰面积随酶解时间延长而逐步下降。apo C-Ⅰ释放出的2条肽段EF和TP在5份样品之间一致,相关系数(r)=0.993 9(3 h)和0.992 9(20 h); apo C-Ⅱ(ES和TY肽段)和apo C-Ⅲ(DA和GW肽段)的r值介于0.976 1～0.997 3。结论 apo C-Ⅰ、apo C-Ⅱ和apo C-Ⅲ肽段的酶解效率受肽段自身特性和酶解环境影响,合适地选择代表性肽段和酶解条件将有助于其准确定量检测。     

毛细管电泳法检测糖化血红蛋白的分析性能评估

目的评估毛细管电泳(CE)法检测糖化血红蛋白(Hb A1c)的精密度、正确度、线性和抗干扰性,并与高效液相色谱法(HPLC)进行比对。方法根据不同的评估内容,收集相应样本,分别使用SEBIA CAPILLARYSTM2 Flex Piercing毛细管电泳仪(毛细管电泳法)、ARKRAY HA-8160全自动Hb A1c分析仪(HPLC)和IFCC参考方法检测Hb A1c。采用SPSS 19.0软件进行统计描述及线性回归模型分析。结果毛细管电泳法检测Hb A1c在常见浓度(4.91%~9.67%)下的不精密度均2%;与IFCC参考方法,相关程度较好(R2=0.993);当Hb A1c浓度为5.0%~17.6%时,毛细管电泳法具有良好的线性(R2=0.995),对氨甲酰化血红蛋白、不稳定Hb A1c、胆红素、乳糜微粒等具有较好的抗干扰能力(绝对偏倚≤0.5%)。毛细管电泳法Hb A1c的测定值与HPLC具有较好的相关性(R2=0.993)。结论毛细管电泳法的精密度、正确度、线性和抗干扰性等分析性能均符合临床实验室常规检测Hb A1c的要求。     

四分位数稳健统计和迭代稳健统计在室间质量评价结果分析中的比较

摘要：目的：比较四分位数稳健统计和迭代稳健统计在定量检测指标室间质量评价（EQA）数据处理中的应用。 方法：分析2012年参加上海市临床检验中心常规化学第1次EQA酶法检测肌酐的实验室结果,用四分位数稳健统计和迭代稳健统计分别进行统计。 结果：2种方法确立的靶值基本相同,迭代稳健统计的标准差、变异系数较四分位数稳健统计大,稳健Z比分数值偏离0的程度总体上较四分位数法小,不合格实验室数较四分位数稳健统计少。 结论：相对于四分位数稳健统计,迭代稳健统计是一种更宽松可靠的统计方法。     

apo A1和apo B侯选参考方法在室间质量评价中的应用价值

目的 探讨载脂蛋白(apo)A1和apo B的候选参考方法 在室间质量评价(EQA)中的应用价值.方法 以5个水平的冰冻人血清制品作为EQA质评物,采用免疫透射比浊法(ITA)检测.采用同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC-MS/MS)定量技术对EQA样本进行定值,包括变性、烷基化和胰蛋白酶酶解处理,使用C18色谱柱...     

妊娠相关蛋白A在急性冠脉综合征中的临床应用价值

目的 探讨妊娠相关蛋白A(PAPP-A)在急性冠脉综合征(ACS)中的诊断价值.方法 选取2008至2009年同济大学附属东方医院心内科住院ACS患者249例,其中ST段抬高的心肌梗死(STEMI)组患者50例,非ST段抬高的心肌梗死(NSTEMI)组患者43例,不稳定型心绞痛(LAP)组患者156例；根据冠脉病变支数分为单支病变组、双支病变组和三支病变组；同时选取205名健康体检者作为对照组.采集患者及健康对照者静脉血标本,每份标本同时采用电化学发光法测定PAPP-A、肌酸激酶同工酶( CK-MB)、高敏肌钙蛋白(hs-T(0)T),采用免疫散射比浊法测定超敏C反应蛋白(hs-CRP)采用方差分析及Kruskal-Wallis H检验进行统计学分析.结果 STEMI组、NSTEMI组、UAP组及健康对照组血清PAPP-A浓度分别为10.45(5.54 ～16.08)、6.56(4.68 ～9.55)、5.70(4.12 ～8.50)、5.23(4.00 ～5.88) mIU/L,差异有统计学意义(H=43.94,P＜0.01)；两两比较显示,STEMI组、NSTEMI组、UAP组PAPP-A浓度均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(t=6.80.2.46、1.72,P均＜0.05).PAPP-A诊断ACS的敏感度为52.2％,特异度为80％,在hs-TnT阴性的患者中,PAPP-A 阳性率为44.5％( 69/155).冠脉三支病变组PAPP-A浓度为7.72(5.03 ～ 12.46)mIU/L,显著高于单支病变组的5.35(4.14 ～8.59) mIU/L,双支病变组的6.05(4.42 ～ 9.58) mIU/L,差异均自统计学意义(t=2.00、1.57,P均＜0.05).ACS患者PAPP-A水平与hs-CRP呈显著正相关(r=0.524,P＜0.05),与CK-MB、hs-TnT相关性较弱(r=0.326、0.343,P均＜0.05).结论 ACS患者血清PAPP-A浓度明显升高,可作为ACS斑块不稳定性的血清学标志物,对hs-TnT阴性的ACS患者具有一定的诊断价值.     

乳腺癌患者围手术期NK细胞及其亚群的动态变化

目的探讨乳腺癌患者围手术期NK细胞及其亚群的变化及其临床意义。方法以乳腺良性肿瘤患者8例、健康人14例为对照,乳腺癌患者29例手术前后,分别用流式细胞术测定外周血NK细胞及其亚群的变化。结果乳腺癌患者外周血淋巴细胞群中CD56＋细胞和CD3-CD16＋CD56＋的百分率以及CD56＋细胞群中CD3-CD16＋CD56dim的百分率等3个指标均较健康对照和良性乳腺良性肿瘤组明显低下（P值均为0.000）,CD56＋细胞群中CD3-CD16＋CD56bright细胞的百分率与两对照组比较差异无显著性。乳腺癌患者术后1 d上述3指标均较术前明显下降（P值均为0.000）,术后7 d,外周血淋巴细胞群中CD56＋细胞的百分率仍明显低于术前（P=0.024）,另两指标与术前差异无显著性,术后1 d和7 d外周血CD56＋细胞群中CD3-CD16＋CD56bright细胞的百分率与术前的差异均无显著性。结论乳腺癌患者NK细胞及其亚群CD3-CD16＋CD56dim明显低于健康对照和乳腺良性肿瘤患者,手术应激会导致其进一步下降,围手术期应密切观察NK细胞尤其是CD3-CD16＋CD56dim亚群的变化,并给予适当的免疫干预。     

检测结核分枝杆菌的BSL-2实验室污染状况的实验评价

目的通过检测生物安全二级（BSL-2）实验室结核分枝杆菌（MTB）的污染情况,对BSL-2实验室安全性进行评估。方法用FA-2型撞击式空气微生物采样器采集MTB检验前、中、后的空气样本收集于血平板和生理盐水采样介质;用物表采样规格板和棉拭子采集物体表面样本。血平板采集的空气样本孵育后,挑取菌落行革兰染色镜检和16S rRNA菌种鉴定。物表样本和以生理盐水为介质的空气样本经N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）/NaOH前处理,采用MTB特异性荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测MTB;同时接种改良罗氏中性培养基和MTB液体培养基培养MTB。结果改良罗氏中性培养基未见分枝杆菌生长,液体培养基检出的2例分枝杆菌经测序证实分别属于MTB复合群和脓肿分枝杆菌;有2%（15/779）的样本MTB核酸阳性,且均来自进行药敏试验的2个BSL-2实验室;有26.7%（8/30）的来自生物安全柜的血平板采样的样本平皿菌落量达2＋或以上,测序分析显示主要为葡萄球菌属、芽孢杆菌属、不动杆菌属。结论受检医院BSL-2实验室MTB污染状况总体可控,但进行MTB药敏试验的实验室应重点加强生物安全防护。