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肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化定量检测研究 总被引:3,自引:0,他引:3
背景与目的:APC基因编码的蛋白参与信号转导途径,大量研究证实APC启动子区的高甲基化在肿瘤的发生发展中起重要作用。本研究建立血浆APC基因实时荧光定量甲基化特异性基因扩增(methylation—specific PCR,MSP)检测方法,并对临床肺癌患者血浆进行检测,以确定该方法在肺癌诊断中的应用价值。方法:将APC基因启动子甲基化阳性肺癌细胞株NCI—H460细胞用有限稀释法获取单个集落形成的细胞,以经典的酚一氯仿法提取细胞DNA,并用MSP对APC基因甲基化进行验证,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μL健康人血浆中.得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟肺癌及肺癌患者、肺部良性疾病患者和健康对照者血浆中提取DNA,对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰;以模拟血浆样品作为标准品,采用外标准曲线法对各种血浆样品中APC甲基化进行定量分析。结果:所建立的实时荧光定量MSP检测方法的线性范围为1.5×10^2-1.5×10^5拷贝/mL。用该方法检测甲基化肿瘤细胞的DNA其最低检测限为1.5×10^2拷贝/mL。78例肺癌患者有40例组织中检测出APC基因甲基化阳性.其中的19例(47.5%)肺癌患者血浆中APC基因启动子甲基化阳性,APC甲基化浓度为1.67×10^2-6.78×10^3拷贝/mL,中位浓度为1.60×10^3拷贝/mL。38例组织阴性的肺癌患者、31例肺部良性疾病患者和23例健康者的血浆APC基因启动子甲基化均为阴性。结论:实时荧光定量MSP检测血浆APC基因甲基化在肺癌诊断方面具有潜在应用价值。 相似文献
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目的:探讨生物发光成像早期监测裸鼠肺部转移瘤及定量评估肿瘤大小的价值?方法:利用生物发光成像检测含荧光素酶报告基因的人肺腺癌SPC-A1-luc细胞在体内外的生物发光活性?经尾静脉注射SPC-A1-luc细胞建立裸鼠肺部转移瘤模型,应用生物发光成像实时监测肺部转移瘤的生长状态并定量评估肺部肿瘤大小,同时用micro-CT检测肺部转移瘤?结果:SPC-A1-luc细胞能高水平并稳定表达荧光素酶,生物发光光子数与细胞量呈良好的线性相关(R2=0.996 6),且与皮下肿瘤体积呈良好的直线相关(R2=0.984 9)?生物发光成像监测裸鼠肺部转移瘤,在第1周即可检测到肺部弥漫分布的肿瘤细胞,第3周肺部生物发光信号降至最低,定量分析表明此时肺部约有600个肿瘤细胞?而第3周micro-CT未能检测到肺部肿瘤,直到第6周micro-CT才检测到肺部肿瘤?结论:利用生物发光成像能早期监测肺部转移瘤的生长并定量分析肿瘤大小,其灵敏度高于micro-CT成像? 相似文献
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目的 评价不同浓度胆红素对酶法测定总胆固醇(total cholesterol, TC)的影响,应用多元回归分析建立校正公式并验证其校正效果。方法 收集100 例来自于南京医科大学第一附属医院2020 年12 月门诊或住院患者的新鲜无黄疸血清标本。配制一系列浓度梯度的胆红素溶液,分别加入其中50 例患者的血清标本中,检测各标本总胆红素(total bilirubin,TB)和TC 浓度,分析胆红素水平对TC 检测结果的影响及二者的相关性。应用多元回归分析建立校正公式,并利用另外50 例患者标本验证该校正公式的性能。结果 黄疸实验组与生理盐水对照组间差异具有统计学意义(F=3.947,P<0.01),标本TC 浓度与TB 浓度呈负相关(r2=0.989 4);在胆红素加入浓度分别为100,200,300,400,500 和600 μmol/L 的实验组中,TC 浓度的平均偏倚依次为:-6.65%±4.89%,-14.21%±8.89%,-29.00%±13.43%,-31.07%±14.62%,-38.21%±13.95% 和-43.51%±12.69%,且初始浓度TC < 3 mmol/L 的标本产生的平均偏倚均明显高于TC ≥ 3 mmol/L 的标本,差异具有统计学意义(t=9.192 ~ 14.836,均P < 0.01);设无黄疸血清标本的TC 浓度为Y,其对应人工黄疸标本的TC 实测浓度为Z,TB 浓度为X,经多元回归分析,校正公式为Y =0.002 353·X + 0.973·Z+ 0.000 337·X·Z - 0.013 34;经公式校正后92.67% 的黄疸标本TC 浓度偏倚小于±10%。结论 黄疸患者血清标本中高胆红素水平可导致其TC 的检测结果偏低,偏倚大小与TB 浓度以及初始TC 浓度相关,运用校正公式可有效校正高胆红素对TC 测定的干扰,符合临床要求。 相似文献
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为了培养医学检验专业学生运用科研思维能力进行临床科研设计,以适应社会对人才的需求,在临床实习中通过导师制及导师团队的运用,提高学生对海量临床实验数据进行分析和处理的能力,通过查阅文献资料分析现象查找原因,在导师团队的帮助下解决临床实际工作中遇到的问题。学生在分析和解决问题的过程中,培养和锻炼了科研思维能力、科研设计能力和实践动手能力,并将书本知识与临床日常工作有机结合起来,拓展了自主学习和团队合作的能力,取得良好的教学效果。 相似文献
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摘要:目的:评估使用Swisslog物流传输系统运输标本,对常见肿瘤标志物检测结果的影响。 方法:选择健康体检和住院患者,每一位受试者采集2份血液标本,分别采用气动物流传输系统和人工传输方式,将标本运送至实验室进行常见肿瘤标志物检测,检测项目包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖链抗原19 9(CA19 9)、糖链抗原72-4(CA72-4)、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)、神经元烯醇化酶(NSE)、糖链抗原125(CA125)和糖链抗原15-3(CA15-3)。使用配对t检验比较两种运输方式下检测结果之间差异,评价差异是否为临床所允许。 结果:两种运输方式下CEA、CA72-4、CA15-3、CA125和CA19-9结果之间无差异,而AFP、Cyfra21 1和NSE之间结果差异有统计学意义。AFP偏倚小于评价标准,而Cyfra21-1和NSE大于可接受范围。 结论:气动物流传输系统对AFP、CEA、CA72-4、CA15-3、CA125和CA19-9项目结果无影响,而对Cyfra21-1和NSE有一定影响。传输时尽可能用低速模式,使用固定或缓冲装置,减少传送次数,减弱碰撞强度,缩短传送距离,可以减少传输对检测结果的影响。 相似文献
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目的:探索采用不同的教学策略对医学检验专业成人高等教育专升本学生进行科研思维培养的作用。方法:首先,通过压缩理论课学时,安排论文和科研标书讲解的教学方式,从2011年开始,每学期专业课在保证理论课授课完成的前提下,采用论文讲解的模式进行教学,同时,选择优秀论文作为范例进行讲解。其次,引入导师制,授课教师进行一对多的精准指导,许多老师都是高学历和高职称,具有丰富的带教经验。最后,通过本学系是研究生学科点的优势,安排学生与在读研究生进行见面交流。结果:经过多年的教学实践,本学系的科研培养策略和教学方法对提高了学生的科研思维能力和创新能力有一定帮助。结论:本学系使用的教学方法和教学策略对学生的科研思维能力和创新能力具有一定的意义,可以推广。 相似文献
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目的 研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清壳多糖酶3样蛋白1(chitinase 3-like 1,CHI3L1)和甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)是否存在相关性.方法 选取南京医科大学第一附属医院2015年12月份至2016年4月份收治入院且经病理学证实的HCC患者100例,同时按性别和年龄配对选择慢性乙型肝炎患者100例和体检健康者59例作为对照组,分别检测HCC和对照组血清CHI3L1和AFP,使用MedCalc Ver 15.2.2软件确定CHI3L1和AFP对HCC患者诊断的临界值,统计HCC患者血清CHI3 L1和AFP的阳性率,使用STATA 12.0统计学软件比较血清CHI3L1和AFP是否存在相关性.结果 HCC患者血清CHI3L1和AFP的分布范围分别为18.5 ~ 1487.5 pg/mL和1.3 ~ 121000 ng/mL,阳性率分别为84% (84/100)和84% (84/100),HCC患者中CHI3L1和AFP不存在相关性(P=0.785).结论 HCC患者中CHI3L1和AFP均具有很高的阳性率,但两者不存在相关性. 相似文献
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目的:定量检测疑似人巨细胞病毒(HCMV)感染婴儿尿液及对应母亲乳汁中HCMV DNA,评估两者在诊断HCMV感染中的价值,并比较两者浓度之间的关系。方法:选取51例疑似HCMV感染的婴儿,收集其新鲜尿液及对应的母亲乳汁,分别用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测HCMV DNA。结果:51例疑似HCMV感染婴儿尿液中,有49例检测出HCMV DNA,阳性率为96.0%(49/51)。51份婴儿母亲乳汁中,有37份检测出HCMV DNA阳性,阳性率为72.5%(37/51)。对37例尿液与乳汁HCMV DNA均为阳性的患儿,分别对尿液与乳汁HCMV DNA浓度取对数,将两者进行相关性分析,结果显示两者之间存在一定的相关性,相关系数为0.332(P<0.05)。结论:婴儿尿液中HCMV DNA检测对于婴儿HCMV的感染具有重要的价值,同时对其母乳HCMV DNA检测,可以发现婴儿尿液和母乳HCMV DNA具有一定的相关性。 相似文献
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目的:检测miR-27a在顺铂(DDP)体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡过程中的表达变化,探讨其与细胞凋亡之间的相关性及其检测的临床意义?方法:体外培养SPC-A1细胞,实验组加入终浓度为2.5 μg/ml DDP,同时设置不加DDP的对照组?观察12?24?48和72 h后显微镜下细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,real-time PCR检测培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a的表达变化?结果:DDP(2.5 μg/ml)组SPC-A1细胞形态呈凋亡改变,在48和72 h凋亡率分别为(59.3 ± 2.5)%和(76.4 ± 3.1)%,均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a含量在24?48和72 h均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中miR-27a含量在12?24?48和72 h逐渐升高,两两比较差异均有统计学意义(P < 0.05)?结论:miR-27a在DDP诱导的SPC-A1细胞凋亡中表达升高,提示其可能参与细胞凋亡调控;对miR-27a进行定量检测有望用于对肺腺癌化疗疗效的评估? 相似文献