稳定表达乙型肝炎病毒含前S2的表面抗原重组细胞系的建立

目的 建立稳定表达含有pre-S2的HBsAg的细胞系。方法 构建在真核细胞表达pre-S2-HB-sAg的重组质粒PCI-HBs2。用此质粒转染HepG2细胞，经克隆化培养以及G418筛选，建立稳定表达HBsAg的细胞系。对其分泌动态、细胞纯度、遗传稳定性等生物学特性做了鉴定。同时对该细胞实验室大量培养的条件进行了优化。结果 成功构建表达pre-S2-HBsAg的重组质粒。转染细胞后筛选到一个稳定表达pre-S2-HBsAg的细胞系3E3。ELISA检测表明该细胞系分泌的HBsAg水平高，生物学性状研究结果表明稳定表达HBsAg的3E3细胞纯度好，遗传性状稳定。结论 成功建立了稳定表达pre-S2-HBsAg的细胞系。该细胞系遗传性质稳定，表达蛋白产量高。此细胞系可用于pre-S2-HBsAg的制备及纯化。     

干湿化学法测定血清葡萄糖结果的比较

目的分析干化学法与湿化学法测定患者血清葡萄糖(GLU)时的偏倚,比较检测结果的可比性。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCLLS)EP9-A文件方案,每天随机选取临床标本8份,分别用两种方法测定样本葡萄糖含量,共测定6天,记录检验结果,去除离散点,计算线性方程和相关系数并进行偏倚估计。结果以湿化学法(X)为对比方法,对干片法(Y)进行评估。干片法(Y)和湿化学法(X)测定GLU的回归方程式为Y=0.9938X-0.10,相关系数γ=0.9958。GLU浓度为5.5mmol/L、13.5mmol/L、23.5mmol/L时,干化学法(Y)的相对偏倚分别为2.36%、1.62%、1.12%。结论干化学法与湿化学法测定血清葡萄糖的结果具有很好的相关性,测定结果的相对偏倚随浓度升高而降低,但变化不大。     

AU-600自动生化分析仪性能评价

目的对AU-600自动分析仪(AU-600)性能进行评价.方法选用AST、TP、BUN、GLU等项目从精密度、准确度、线性范围、交叉污染率对AU-600析进行评价.结果 AU-600的精密度好,CV值AST为2.5%、TP为1.3%、BUN为2.0%、GLU为1.4%;准确度高,回收率AST为103.5%、TP为101.4%、BUN为101.3%、GLU为96.0%,有良好的线性范围;交叉污染率低<1%.结论 AU-600全自动化操作、标本用量少、速度快捷、精密度好、准确度高、线性范围宽、交叉污染率低,适于临床应用.     

白介素 13-1112 C〉T基因多态性与尘螨变应性鼻炎的相关性

目的 对尘螨诱导引起变应性鼻炎的患者行白介素13-1112C〉T基因分型,探讨白介素13-1112C〉T基因与尘螨变应性鼻炎遗传易感性的相关性。方法用PCR-RFLP法对90名无亲缘关系的尘螨变应性鼻炎患者和107名无血缘关系的健康汉族人行白介素13-1112C〉T基因分型。结果尘螨变应性鼻炎组与对照组相比,白介素13-1112cfr,C／C基因型频率均无显著性差异（P〉0．05）;但白介素13-1112位点的基因TT存在显著相关（P〈o．05）。结论白介素13-l112’r仃基因多态性与尘螨变应性鼻炎存在相关性,可能存在原因较多,大样本和单倍体研究将可能有助于阐明关系。     

Hsa-miR-203联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病K562细胞的作用

目的探讨hsa-miR-203联合甲磺酸伊马替尼（mesylate imatinibMI）对人慢性粒细胞白血病K562细胞的影响。方法体外培养K562细胞,利用Lipofectamine^TM2000将has-miR-203模拟物转染至K562细胞,MT＇F法检测使用miR-203、MI以及两者联合使用对细胞增殖的抑制率,流式细胞术检测对细胞早期凋亡率的影响。结果miR-203转染至K562细胞（24、48、72h）后,联合MI显著抑制K562细胞增殖,抑制效果较各单独使用组作用明显增强。单用miR-203浓度为50μmol·L^-1时的抑制率分别为19．69％、25．62％、35．21％。而联合不同浓度（0．5、1、2、3、4μmol·L^-1）的伊马替尼,抑制率随着作用时间增加,呈时间一依赖效应。单用hsa-miR-203、伊马替尼及两者联合作用于K562细胞48h后,早期凋亡率分别为7．8％、8．9％、12．5％。结论当一定浓度的hsa-miR-203与不同浓度的伊马替尼联合之后,对K562细胞的增殖抑制作用增强,hsa．miR-203提高了K562细胞对伊马替尼的敏感性,其机制可能为共同促进K562细胞早期凋亡有关,并为白血病的治疗提供新的依据。     

AU—600自动生化分析仪性能评价

目的对AU-600自动分析仪(AU-600)性能进行评价.方法选用AST、TP、BUN、GLU等项目从精密度、准确度、线性范围、交叉污染率对AU-600析进行评价.结果AU-600的精密度好,CV值AST为2.5%、TP为1.3%、BUN为2.0%、GLU为1.4%;准确度高,回收率AST为103.5%、TP为101.4%、BUN为101.3%、GLU为96.0%,有良好的线性范围;交叉污染率低<1%.结论AU-600全自动化操作、标本用量少、速度快捷、精密度好、准确度高、线性范围宽、交叉污染率低,适于临床应用.     

Apollon反义核酸联合苦参碱对肝癌细胞增殖与凋亡影响的研究

目的:研究凋亡抑制蛋白(IAPs)家族成员Apollon反义核酸(ASO)联合苦参碱对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制.方法:将一定浓度的人工合成的Apollon ASO经脂质体包裹转染肝癌(HepG2)细胞,并联合不同浓度的苦参碱作用于肝癌(HepG2)细胞48 h后,采用WST-8法检测单用Apollon ASO、单用苦参碱、及ApollonASO联合苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞早期凋亡率;Hoechst33258染色观察HepG2细胞凋亡形态;实时荧光定量RT-PCR检测细胞Apollon mRNA的表达水平.结果:Apollon ASO联合苦参碱作用于HepG2细胞48 h后,单用苦参碱的IC50为0.9 mg/mL;苦参碱与Apollon ASO联合使用,IC50为0.43 mg/mL,增敏倍数为2.09,表现为协同作用.流式细胞术检测结果显示,Apollon ASO联合苦参碱能促进HepG2细胞凋亡,其早期凋亡率达36.4％;经荧光显微镜观察,Apollon ASO组可见核高强度荧光的细胞,并见凋亡小体.实时荧光定量RT-PCR结果表明,不同浓度的Apollon ASO与苦参碱均能显著下调Apollon mRNA的表达水平.结论:Apollon ASO可增强肝癌细胞对苦参碱的敏感性,作用机制可能与共同下调Apollon mRNA表达水平有关,为肝癌的临床治疗提供实验依据.     

血细胞分析仪性能监控体系的建立

目的 建立血细胞分析仪性能监控体系,保证所有检测结果准确可靠.方法 依据ISO/15189要求对实验室的血细胞分析仪建立性能监控体系,包括背景计数、携带污染率、精密度、室内质控、线性检测、仪器校准、准确度、不同仪器和不同检测模式间新鲜全血比对、仪器维护保养等9项指标进行监控,对各项指标均有明确规定,具有一定的可操作性.结果 各仪器的背景计数、携带污染率,精密度均符合仪器要求;日间精密度CV＜1/3 CLIA'88;线性范围满足临床要求,相关系数r均＞0.990;小比对结果显示各参数之间相对偏差＜1/2 CLIA'88;仪器间和不同检测模式间各参数比对结果的相关系数r均＞0.975,各参数在医学决定水平处预期偏倚均未超出要求范围;卫生部及广东省临检中心室间质评结果均为100%.结论 建立血细胞分析仪性能监控体系,保证不同仪器及同一仪器不同检测模式检测结果的一致和准确,有利于实验室的规范化管理.     

两种稀释液在高精子密度精液分析中的比较应用

目的：探讨原装稀释液和生理盐水作为精子稀释液在高精子密度精液常规分析中的比较应用。方法对88例高密度精液（不液化标本12例,液化密标本76例）标本先取原液粗略估计精子密度,再根据密度大小决定其稀释倍数,分别用生理盐水及原装稀释液对同份精液标本进行稀释后用计算机辅助分析（CASA）系统分析其密度、活力。结果原液的密度、活力明显低于生理盐水（P〈0.05）和原装稀释液（P〈0.05）的密度与活力,两种稀释液的密度和活力相近（P〉0.05）;对不液化精液标本未加糜蛋白酶的原液精子密度和活力明显低于加糜蛋白酶后用生理盐水和原装稀释液稀释的精子密度和活力（P＜0.05）,而加糜蛋白酶后用两种稀释液的精子密度和活力则较为相近（P〉0.05）。结论做精液常规分析时,高密度的精液可用生理盐水代替原装稀释液应用于检测。