超声靶向微泡破坏技术介导基因JNK1在小鼠肝癌细胞株中表达及对细胞迁移和侵袭作用的研究

目的探讨应用超声靶向微泡破坏(UTMD)技术介导小鼠肝癌细胞株Hca-P JNK1基因的表达以及肝癌细胞迁移和侵袭。方法构建并鉴定pCDNA3.1-JNK1载体。将小鼠肝癌细胞株Hca-P分组如下:A组(空白对照组),B组(质粒组),C组(脂质体+质粒组),D组(超声微泡+质粒+超声辐照组),E组(脂质体+超声微泡+质粒+超声辐照组)。采用倒置荧光显微镜观察各组细胞的转染率,荧光定量PCR和Western Blot法检测JNK1的基因和蛋白质表达水平,以CCK-8法检测5组细胞的细胞活性,应用Transwell实验检测各组细胞的体外迁移和侵袭能力。结果成功构建了pCDNA3.1-JNK1载体。各组转染率比较:E组均大于B、C、D组(P均0.05),C、D组转染率均高于B组(P均0.05),C、D组之间差异无统计学意义(P0.05)。E组JNK1 mRNA和蛋白表达水平均高于其他各组(P均0.05);E组细胞活性、迁移和侵袭能力均高于其他各组(P均0.05)结论 UTMD技术结合脂质体转染法可以提高pCDNA3.1-JNK1载体转染小鼠肝癌细胞株Hca-P的效率,加大基因JNK1表达的上调幅度,增强细胞活性、迁移和侵袭能力。     

心肌分层应变技术评价不同心功能尿毒症患者左室纵向功能

目的:探讨应用心肌分层应变技术评价不同心功能的尿毒症患者左室纵向收缩功能的价值。方法:选取75例尿毒症患者,根据左室射血分数(LVEF)分为心功能正常(LVEF≥50%)组(43例)和心功能减退(LVEF50%)组(32例),另设40例健康者作为对照组。先行常规心脏数据测量,然后应用斑点追踪成像(STI)中的分层应变技术获取3组心尖位3个长轴切面心内膜下、中层和心外膜下心肌收缩期纵向峰值应变(LS)。结果:(1)与对照组比较,心功能正常组和心功能减退组的收缩期左房内径(LAESd)、收缩期室间隔厚度(IVSTd)、舒张期左室后壁厚度(LVPWTd)和二尖瓣口舒张早期血流速度/舒张末期血流速度(E/A)值比较的差异均有统计学意义(均P0.01);(2)与对照组及心功能正常组比较,心功能减退组的LAESd、舒张期左室内径(LVDd)及LVEF减低,均差异有统计学意义(均P0.01);(3)3组患者间的LS值由心内膜下至心外膜下心肌保持梯度递减;(4)与对照组比较,心功能正常组心内膜下心肌LS值减低,差异有统计学意义(P0.05),心功能减退组3层心肌LS值减低明显,差异有统计学意义(P0.01);(5)与心功能正常组比较,心功能减退组部分心肌LS值减低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:不同心功能的尿毒症患者左室壁3层心肌LS值受累程度不同,心肌纵向分层应变不但可以比LVEF更早发现左室收缩功能减低,还可以判断病变受累程度。     

超声靶向破坏微泡技术介导小鼠肝癌细胞株JNK1基因表达、细胞迁移和侵袭抑制

目的: 探讨应用超声靶向破坏微泡 (UTMD) 技术介导小鼠肝癌细胞株JNK1基因的表达、细胞迁移和侵袭抑制的作用,阐明其作用机制。方法: 构建并筛选RNA干扰效果最好的短发夹RNA(shRNA)。将小鼠肝癌细胞株Hca-F分为正常Hca-F细胞组、shRNA质粒组、脂质体组、超声微泡结合超声辐照组及脂质体结合超声微泡加超声辐照组。采用倒置荧光显微镜观察各组细胞转染率,荧光定量PCR和Western blotting 法检测JNK1基因mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞的细胞活性,应用Transwell 实验检测各组细胞的体外迁移能力。结果: 脂质体结合超声微泡加超声辐照组细胞转染率高于shRNA质粒组、脂质体组和超声微泡结合超声辐照组(均P<0.05),脂质体组和超声微泡结合超声辐照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。脂质体结合超声微泡加超声辐照组JNK1 mRNA和蛋白表达水平低于其他各组(P<0.05);脂质体结合超声微泡加超声辐照组细胞活性和平均穿膜细胞数均低于其他各组(P<0.05)。结论: UTMD技术结合脂质体转染法可以提高小鼠肝癌细胞株JNK1 shRNA的转染效率,增强其对基因表达、细胞活力、迁移和侵袭能力的抑制。     

移植肝硬度及背向散射积分测定的临床诊断价值

目的应用组织硬度及超声背向散射积分方法对移植肝进行检测,以探讨该技术在肝移植术后的临床诊断价值。方法应用HP Sonos5500型彩超仪对60例健康成年人及60例肝移植患者进行检测,对左肝膈面压缩幅度及背向散射积分值进行定量分析。结果有术后并发症的肝移植患者移植肝的背向散射积分值高于正常对照组及无术后并发症的肝移植组,其差异有显著性意义（P〈0.05）。有术后并发症的肝移植患者移植肝左肝膈面压缩幅度低于正常对照组及无术后并发症的肝移植组,其差异有显著性意义（P〈0.05）。正常对照组与无术后并发症的肝移植组的肝背向散射积分值或左肝膈面压缩幅度之间的差异没有显著性意义（P〉0.05）。结论肝硬度及超声背向散射积分测定能够较客观、准确地评价移植肝的病理状况。     

超声靶向破坏微泡技术介导shRNA抑制小鼠肝癌细胞株JNK1基因表达

目的 探讨应用超声靶向破坏微泡（UTMD）技术介导shRNA抑制小鼠肝癌细胞株JNK1基因表达的能力。方法 构建并筛选shRNA最佳表达载体。体外培养肝癌细胞Hca-F,共分为5组：A组为空白对照组;B组为shRNA质粒组;C组为脂质体组;D组为超声微泡+超声辐照组;E组为脂质体+超声微泡+超声辐照组。应用倒置荧光显微镜观察转染率;荧光定量PCR检测JNK1的mRNA水平;Western-Blot检测JNK1的蛋白质表达。结果 获得了shRNA干扰效果最好的表达载体。各组转染率比较：E组均大于B、C、D组（P均<0.05）;C、D组之间差异无统计学意义（P>0.05）。荧光定量PCR和Western-Blot检测各组JNK1mRNA和蛋白表达比较：E组的JNK1mRNA和蛋白表达水平均最低（P均<0.05）。结论 脂质体转染法与UTMD技术结合可以提高小鼠肝癌细胞株JNK1 shRNA的转染效率,并能够增强基因表达的抑制效果。     

动静脉内瘘术前拟造瘘血管彩色多普勒超声评价

目的:探讨动静脉内瘘术前应用彩色多普勒超声技术评估并定位拟造瘘血管的意义。方法:分析78例首次拟行前臂动静脉内瘘手术的终末期肾脏病患者术前及术后第1个月末彩色多普勒超声检查资料。结果:78例于术前行彩色多普勒超声检查选择适宜手术部位并标记可用配对血管,术后第1个月末彩色多普勒超声评价通路情况及有无并发症。78例中74例造瘘成功,1例瘘口狭窄,3例血栓形成。结论:动静脉内瘘术前彩色多普勒超声检查可保证动静脉内瘘的有效建立。     

血液透析患者自体动静脉内瘘狭窄处内膜增生的超声评价

目的应用彩色多普勒超声评价自体动静脉内瘘吻合口处内膜增生程度,探讨其临床应用价值。方法选取动静脉内瘘口狭窄患者18例(狭窄组)和自体动静脉内瘘正常的血液透析患者18例(对照组),超声测量两组患者动静脉内瘘口处内径和内膜厚度、动静脉内瘘血流量及瘘口处与流入道动脉峰值血流速度比值。结果狭窄组动静脉内瘘口处内径和动静脉内瘘血流量均明显低于对照组[(0.11±0.03)cm vs.(0.23±0.04)cm,(375.78±124.56)ml vs.(1053.34±275.71)ml],差异均有统计学意义(均P<0.05),而动静脉内瘘口处内膜厚度及瘘口处与流入道动脉峰值血流速度比值均明显高于对照组[(0.09±0.03)cm vs.(0.05±0.02)cm,2.73±0.35 vs.1.85±0.21],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论动静脉内瘘口狭窄患者局部内膜明显增厚,彩色多普勒超声可直观、准确地评价动静脉内瘘吻合口处管腔变窄及局部内膜增生程度,具有重要临床应用价值。     

维持性血液透析患者动静脉内瘘并发症的超声诊断分析

目的探讨彩色多普勒超声在维持性血液透析患者动静脉瘘并发症诊断中的作用。方法回顾性分析67例因透析中出现血流量不足、瘘口震颤减弱或消失,以及穿刺或瘘口部位包块等原因行超声检查患者的超声及临床资料。结果67例中静脉瘤样扩张37例,血栓19例,狭窄7例,血肿3例,假性动脉瘤1例。结论彩色多普勒超声在动静脉瘘并发症的诊断中发挥着重要作用。     

原发性甲状腺淋巴瘤的超声表现

目的本文研究15例原发性甲状腺淋巴瘤(PTL)患者的超声图像和临床特点,以提高对PTL的超声图像特点的认识。方法回顾分析经病理证实的15例PTL患者的超声图像特点,并进行总结。结果 15例患者均为非霍奇金弥漫性大B细胞型淋巴瘤。3例为弥漫型PTL,双叶甲状腺明显增大,病灶为不均质极低回声,边界不清,无钙化,病灶后方回声增强,1例伴颈部淋巴结肿大。12例结节型PTL,10例单叶甲状腺增大,2例双叶甲状腺增大,病灶结节呈低回声,边界清,形态不规则,3例病灶结节内有微钙化,8例病灶结节后方回声增强,2例患者伴颈部淋巴结肿大;11例病灶内血流信号丰富。结论超声能够较准确提供PTL的声像图特点,结合临床表现应首先怀疑原发性甲状腺淋巴瘤,经病理结果确定诊断。