NO对新生大鼠下丘脑钙激活钾通道的直接激活作用

目的：研究NO对下丘脑神经元钙激活钾通道（K_Ca）的作用及其机制。方法：采用膜片钳技术内面向外式。结果：NO可显著提高通道的开放概率，这种增强作用是通过延长通道开放时间及增加开放频率实现的。结论：下丘脑神经元中NO可直接激活K_Ca，它的病理生理作用还有待于进一步研究。     

NO-cGMP通路对下丘脑钙激活钾通道的调控研究

目的研究一氧化氮（ＮＯ）对ＳＤ乳鼠下丘脑神经元钙激活钾（ＫＣａ）通道的作用及其机制。方法采用内面向外 式及细胞贴附式膜片钳技术比较浴槽液中加入１００μmol/L硝普钠（ＳＮＰ）前后动物下丘及神经元ＫＣａ通道动力学 的改变。结果细胞贴附式时浴槽液中加入１００μmol/L ＳＮＰ,通道开放概率由（７．３±１．５）％升高至（４０．２±６．５）％,开放时 间由（７．１２±１．４１） ｍｓ增大至（１５．３４±３．４５） ｍｓ,开放频率由（１１．３±３．５）Ｈz升高为（２６．６±４．２） Ｈz（ｎ＝１０, Ｐ＜０．０５）。结论 ＮＯ－cＧＭＰ通路可显著提高通道的开放概率,这种增强作用是通过延长通道开放时间及增加开放频率实现的,它的 病理或生理作用还有待于进一步研究。     

不同潮气量机械通气大鼠血清对血管内皮细胞钙激活钾通道的影响

目的:研究不同潮气量机械通气大鼠血清对血管内皮细胞钙激活钾通道(KCa通道)的影响.方法:健康雄性SD大鼠随机分为A组(麻醉后不做任何处)和B、C组(麻醉后行气管切开插管并分别给予不同潮气量(VT)的机械通气4h.B组VT10mL/kg,C组40 mL/kg),通气结束后取各组大鼠血清,分别刺激已培养好的人脐静脉内皮细胞(ECV304)30 min,利用细胞贴附式膜片钳观察KCa通道的变化.结果:B、C组内皮细胞KCa通道开放率明显上升,且以C组最为明显.结论:不同VT机械通气大鼠血清对ECV304 KCa通道的开放、关闭具有一定的影响.     

下丘脑神经元钙激活钾通道的温度效应

目的 研究新生SD乳鼠下丘脑神经元钙激活钾通道的温度敏感性。方法 采用膜片钳技术内面向外式。结果 随着温度的增加，通道的电导及开放概率显增加，37℃,39℃时电导的Q10为1.63和1.86，开放概率的Q10为2.83和3.56，通道的开放，关闭时间都具有温度依赖性缩短，结论 下丘脑钙激活钾通道具有高度的温度敏感性，对它的进一步研究可能有助于阐明体温调节的本质因素。     

中性粒细胞极性化过程中定向和侧足形成的方法学模式

背景：中性粒细胞极性是其趋化和产生防御功能的基础,而极性化过程中定向能力和侧足形成是重要的环节,目前相关研究的报道还很少。 目的：观察均匀浓度、陡峭浓度梯度、平缓浓度梯度3种实验模式下细胞极性过程中片足的方向和侧足的形成情况,试图找出研究中性粒细胞极性的方法学模式。 方法：①采用密度梯度离心法,成功急性分离人中性粒细胞。②均匀浓度、陡峭浓度梯度和平缓浓度梯度甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸对细胞进行趋化刺激。③倒置显微镜下观察细胞极性变化情况,判断细胞移动方向。④对细胞进行荧光双标,激光共聚焦显微镜下观察F-actin聚合情况。 结果与结论：①均匀浓度下,中性粒细胞极性化方向和移动轨迹随机分布。②陡峭梯度浓度下,41%的细胞呈现电极向心性分布。③平缓梯度下,68%的细胞表现为沿着甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸浓度的分布,χ2检验提示平缓浓度梯度实验模式存在较好的定向性。④三者均有明显的侧足形成,以均匀浓度为高,这与定向性呈现为相反的结果。结果显示平缓浓度梯度实验模式在研究细胞定向机制方面相对较好,另一方面对细胞定向的干扰可能来源于细胞侧足的形成。     

下丘脑神经元中游离Ca^2＋的电生理测定法

目的：采用膜片钳技术通过对SD鼠乳下丘脑神经元上Ca^2 激活K^ 通道（KCa)Ca^2 敏感性的研究测定其细胞内游离Ca^2 浓度（[Ca^2 ]i)。方法：首先应用内面向外式研究不同[Ca^2 ]i时KCa通道诉开放概率（P0）,作出量效曲线,再应用细胞贴附式求得生理状态下此通道的开放概论,从量效曲线上查出的细胞内游离Ca^2 浓度。结果：试验表明SD乳鼠下丘脑神经元上KCa通道的P0具有对[Ca^2 ]i的高度敏感性,求得下丘脑神经元内的[Ca^2 ]为0.1μmol/L。结论：实验结果说明此电生理法测定[Ca^2 ]i具有较高的可靠性和准确性。     

热损伤时下丘脑神经元延迟整流性K~+通道活动的变化

目的 :研究高温状态时下丘脑延迟整流钾通道特性的改变 ,探讨高温条件下出现热损伤的作用机制。方法 :对急性分离的新生SD大鼠下丘脑细胞进行高温处理 ,采用细胞贴附式和内面向外式膜片钳记录方法 ,观察通道活动改变情况。结果 :细胞经 4 3℃处理 4 0min后 ,K+通道活动阳性率下降到 38% (n =16 ) ,而对照组 (37℃ )为 86 % (n =36 ,P <0 .0 5) ;4 3℃高温处理6 0min后 ,细胞K+通道活动阳性率下降到 <10 % (n =35) ,而对照组为 78% (n =18,P <0 .0 5) ,并且通道活动呈现多种形式。结论 :高温可能通过对通道蛋白的破坏作用而改变通道活动特性     

泛素-蛋白酶体系统及其参与造血调控的相关研究进展

泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system,UPS）是目前已知最重要且有高度选择性、能量依赖性的细胞内非溶酶体途径降解蛋白质的系统,是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制。作为重要的造血调控因子,TGF-β家族诱导造血细胞的存活、增生、分化,能抑制白血病细胞的异常增殖,诱导白血病细胞分化。Smads是介导TGF-β家族上述功能的胞内关键信号分子,而泛素蛋白酶可调控Smads蛋白的活性,从而参与对机体造血功能的调控,本文仅对泛素-蛋白酶体系统所介导Smads活性调控参与造血的机制进行探讨。     

膜环境高温对新生SD大鼠下丘脑神经元延迟整流性钾通道的影响

目的：观察高温对下丘脑神经元延迟整流性Ｋ通道的影响。方法：采用膜片钳技术的细胞贴附记录模式,记录ＩＫ的活动动力学。结果：在３２℃、３７℃、３９℃下,随温度升高,新生ＳＤ大鼠ＩＫ的电导、长时程开放时间常数、开放概率升主届,出现较多的簇状开放和多级开放,热损伤处理后,通道活动出现多形式开放,电压依赖程度减弱或丧失,结论：下丘脑神经元ＩＫ可能参与机体的发热和中暑发病过程。     

全血中性粒细胞分离方法对fMLP诱导极性化的影响

目的 比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法,为中性粒细胞极性化研究提供有效手段.方法 取健康成年人外周血,采用Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒细胞,分别检测分离后的中性粒细胞的极性、纯度、存活率,比较二者对极性信号分子F-actin的聚合和胞内Ca2+的影响.结果 二者在极性率、纯度、存活率方面并不存在显著性差异,但Dextran沉降法在fMLP诱导细胞极性3 min内对F-actin的聚合产生抑制作用,同时可使胞内Ca2+升高的Ca2+峰降低约25%.结论 对PMNs极性功能研究时,两种分离方法都可以选择.Percoll非连续密度梯度离心法更有优势,但在需要纯化大量PMNs时,Dextran沉降法也是一种好的选择.