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一株铜绿假单胞菌中检出两种新的整合子 总被引:11,自引:0,他引:11
目的研究铜绿假单胞菌多重耐药的临床分离株RJ217中发现的两个新整合子的结构,并分析其在多重耐药性中的作用。方法用改良三相试验分析RJ217产β-内酰胺酶的情况,用常规和长片段PCR法扩增耐药基因和整合子,并对PCR产物进行序列分析。结果发现铜绿假单胞菌RJ217携带两个新的整合子,其中一个携带veb-I型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因,这两个整合子的结构分别为IS10-like-veb-I-aadB-oxa10/aadA1和aadB-oxa10/aadA1。结论整合子介导的耐药基因在RJ217的多重耐药性中发挥了重要的作用。 相似文献
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耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药机制研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的分析本院重症监护病房(ICU)中连续分离到的多重耐药铜绿假单胞菌的同源性,并检测其对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法用纸片扩散法测定铜绿假单胞菌对14种抗菌药的敏感性并进行表型分析;通过重复序列引物聚合酶链反应(rep-PCR)对铜绿假单胞菌进行分型;使用亚胺培南EDTA(乙二胺四乙酸)酶抑制试验检测菌株是否产生金属酶,同时用PCR检测OprD、IMP、VIM基因。结果抗菌药物敏感试验显示23株铜绿假单胞菌中19株同时对亚胺培南和美罗培南耐药,并且都至少对5种以上抗菌药物耐药;rep-PCR电泳结果显示19株耐药株基因表型基本一致,并且与敏感株有明显区别;亚胺培南-EDTA双纸片法筛得5株产金属酶(MBL)的铜绿假单胞菌;用特异性OprD、IMP、VIM引物扩增相应基因时,检测到1株发生OprD缺失,23株都未检测到blaIMP及blaVIM。结论ICU中19株多重耐药铜绿假单胞菌均来自同一克隆;其中1株发生OprD缺失突变,5株金属酶筛选试验阳性,但需分子生物学方法进一步证实。 相似文献
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大肠埃希菌、克雷伯菌中质粒AmpC酶的流行分布 总被引:9,自引:4,他引:5
目的 了解我院大肠埃希菌、克雷伯菌中质粒AmpC酶的流行分布及其基因型特征。方法 对1935株大肠埃希菌、克雷伯菌进行了AmpC酶纸片扩散法筛选试验(头孢西丁≤18),对筛选阳性株分别进行三维试验、多重聚合酶链反应(PCR)、等电聚焦电泳(IEF)、接合试验、PCR及测序,以确定表型及基因型。结果 1935株细菌中,纸片筛选、三维试验、多重PCR的阳性数分别为327、85、54株;13株产CIT群质粒AmpC酶细菌有4株接合试验阳性;IEF证实这4株细菌均产生等电点为9.0、可以被氯唑西林抑制而不能被克拉维酸抑制的β-内酰胺酶。结论 我院大肠埃希菌、克雷伯菌中质粒AmpC酶的阳性率为2.79%(54/1935)。基因型为DHA群和CIT群2类。 相似文献
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革兰阴性杆菌中质粒ampC基因的检测与分析 总被引:26,自引:0,他引:26
目的 运用多重聚合酶链反应 (PCR)检测革兰阴性杆菌的质粒ampC基因。 方法 通过热裂解获得DNA模板 ,用 6组引物进行多重PCR扩增 ,用琼脂糖凝胶电泳区分PCR产物。结果 2 0 0株临床分离的革兰阴性杆菌中有 6株为质粒ampC基因阳性。 结论 用多重PCR技术能简单、快速地检测革兰阴性杆菌质粒ampC基因 ,且特异性高。 相似文献
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医院葡萄球菌属临床分离株的耐药性 总被引:4,自引:1,他引:4
目的研究葡萄球菌属的耐药趋势及变迁,以探讨临床常见葡萄球菌属分离株的耐药性现状,为葡萄球菌感染提供选药依据. 方法对2000~2003年我院临床分离的常见葡萄球菌,采用Kirby-Bauer法进行药敏试验,高盐琼脂扩散法对苯唑西林耐药的菌株做耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)测定,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1999年标准判断结果. 结果近4年临床分离到的前9位细菌共6 602株,金黄色葡萄球菌(SAU)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)分别占第2位(977株,占14.4%)和第6位(607株,占8.9%);MRSA、MRCNS的检出率分别为84%和86.3%,环丙沙星、红霉素、克林霉素、复方新诺明对其耐药率均>40%;头孢唑林对MRSA呈高度耐药(>90%),对MRCNS耐药率<40%;未发现耐万古霉素菌株. 结论近4年临床分离菌仍以革兰阴性菌为主,但SAU和CNS亦占相当比例,且MRSA和MRCNS呈高分离率,应合理使用抗菌药物及采取其他有效措施控制MRS的感染. 相似文献
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4株AmpC启动子和衰减子突变大肠埃希菌的分析研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究启动子和衰减子突变与大肠埃希菌高产AmpC酶的关系.方法用琼脂稀释法、双纸片法、三相试验、等电聚焦电泳(IEF)和聚合酶链反应(PCR)检测其耐药机制,并对其AmpC的启动子和衰减子直接进行基因序列分析.衰减子的发夹状二级结构用DNASIS软件分析.结果琼脂稀释法、双纸片法、三相试验、IEF和PCR证明这4株菌都产染色体AmpC酶,基因序列分析提示它们在启动子和衰减子上都有不同程度的突变,同时还观察到其中一株菌的衰减子的G-C发夹状二级结构由于突变导致△G 7.6 kcal/mol的变化.结论大肠埃希菌AmpC酶的表达同时受到启动子和衰减子的调节. 相似文献