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目的 基因工程重组表达2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)融合蛋白。方法 用PCR方法扩增得到OGDC-E2的基因片段,插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-OGDC-E2,测序正确后在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。结果 获得OGDC-E2融合蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子质量与预期大小一致;经免疫学鉴定,重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的免疫原性。结论 基因重组表达的融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的实验诊断。 相似文献
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原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种慢性胆汁淤积性自身免疫性肝病,主要特征为肝内中小胆管的非化脓性进行性炎性损伤。颗粒溶素(granulysin,GNLY)是由自然杀伤细胞和激活的细胞毒性T淋巴细胞选择性表达的细胞毒分子。我们采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附法检测PBC患者外周血GNLY的表达,研究GNLY表达在PBC发病机制中的作用,为临床诊治提供依据。 相似文献
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视网膜病变是常见糖尿病微血管病变,疾病最终结局常导致失明,糖尿病视网膜病变(DR)的防治是临床难题,早期诊断及时治疗尤为重要.DR发生的机制目前尚不十分清楚,可能是高血糖等各种因素引起的视网膜毛细血管壁细胞功能受损及内皮细胞功能异常[1].近年来,炎症学说逐渐成为糖尿病血管病变的研究热点,尤其是关于超敏C反应蛋白(hsCRP)与糖尿病微血管病变的关系受到国内外研究者的重视[2].另有研究表明,高同型半胱氨酸(Hcy)血症也可能是DR的危险因素之一[3],本研究通过检测113例2型糖尿病的血hsCRP、Hcy、糖化血红蛋白(HbA1c)等水平,旨在探讨其在DR早期诊断中的价值. 相似文献
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目的重组表达人OGDC-E2融合蛋白,并用于检测自身抗体。方法重组表达的OGDC—E2,分别采用免疫印迹法(IBT)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测PBC患者的M2抗体。50例确诊的PBC患者为PBC组,以其他肝病患者70例、自身免疫病患者70例和健康体检者70例作对照。结果50例确诊的PBC患者中41例OGDC-E2抗体阳性。9例阴性,阳性率为82.0%。而疾病对照组和健康体检者血清中M2抗体检测均为阴性。结论用重组人2-氧戊二酸脱氢酶复合物E2亚单位检测M2抗体,有较好的敏感性及一定的特异性。有助于临床对PBC的诊断。 相似文献
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