壶腹周围癌危险因素的病例对照研究

目的：探讨壶腹周围癌发病的相关危险因素,为有效预防和控制壶腹周围癌提供理论依据。 方法：采用1:1配对病例对照研究,收集湖南省人民医院肝胆外科2003—2014年间122例壶腹周围癌患者（病例组）和同期122例非肿瘤、非消化系统疾病患者（对照组）,对可能的危险因素进行条件Logistic回归分析。 结果：在控制了混杂因素后,壶腹周围癌的危险因素为吸烟、饮酒及乙肝感染。其结果为,随着每日吸烟量（支）的增加壶腹周围癌的患病率随之增加,其中现在不吸烟者、<20支/d、20~39支/d、≥40支/d者的优势比（OR）分别为0.450（95% CI=0.205~0.988）、0.500（95% CI=0.092~2.730）、 2.571（95% CI=1.074~6.156）、3.000（95% CI=0.312~28.841）;每日饮酒<40 g、40~99 g、≥100 g者患壶腹周围癌的OR值分别为3.000（95% CI=0.312~28.841）、65.289（95% CI=0.006~70.239）、4.50（95% CI=0.972~20.827）;乙肝感染者患壶腹周围癌的危险性是无乙肝病史者的3.25倍（95% CI= 1.060~9.967）。 结论：大量吸烟、饮酒以及乙肝感染是壶腹周围癌的危险因素。     

基于肝切除手术来源的成人肝细胞移植的临床应用

目的探讨成人肝细胞移植治疗肝衰竭的临床效果。方法从良性病变的外科肝切除组织中获取有活性的成人肝细胞,对2例肝衰竭患者采用股动脉插管介入法行脾脏内移植。结果2例患者在治疗后病情均得到一定程度的缓解,临床症状和生化指标明显改善,其肝功能有一定程度的恢复,但例1术后第3 d胆红素上升,术后第4 d出现肝昏迷而自动出院;例2于术后1周黄疸指数再次升高,术后40 d死亡。结论成人肝细胞脾脏内移植治疗肝衰竭,技术上安全可行,且具有一定临床疗效;如何增强移植后肝细胞的数量和功能将是维持受体肝功能持续改善的关键。     

荧光原位杂交技术在产前诊断中的应用价值

[目的]探讨荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术在产前诊断中的临床应用价值.[方法]选择中晚期孕妇105例,抽取羊水体外培养后进行染色体核型分析,同时应用FISH技术直接对羊水收集细胞进行13、18、21、X、Y的染色体检测,分析并比较两种方法的成功率.[结果]105例孕妇中完成羊水细胞核型分析103例,诊断成功率98.1%（103/105）：正常100例（正常核型98例,染色体多态性2例）,非整倍体3例（均为21-三体）;完成FISH检测104例,成功率99.0%（104/105）：正常101例（染色体结构变化无法检测）,非整倍体核型（21-三体）3例;两者成功率比较无显著性差异（P〉0.05）.[结论]FISH技术能快速准确检测染色体非整倍体异常,但不能完全替代染色体核型分析,有染色体结构异常者需结合羊水染色体核型分析.     

CGRP预培养对肝细胞冻存损伤的保护作用及机制

[目的]探讨降钙素基因相关肽(CGRP)预培养对冻存肝细胞的保护作用与机制.[方法]外科切除肝组织分成5组:①对照组(DMEM预培养0 h);②标准预培养组(DMEM预培养8 h);③CGRP三个浓度预培养组(10-6 mol/L,10-7 mol/L,10-8 mol/L;8 h).采用胶原酶灌注法分离肝细胞,经预培养后冻存5周,复苏,台盼蓝检测新鲜分离肝细胞成活率,并体外培养肝细胞48 h,用MTT 法观察肝细胞活力,收集细胞培养上清检测谷白蛋白(Alb),乳酸脱氢酶(LDH)水平,检测肝细胞内活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量.[结果]预培养组及各 CGRP(10-6,10-7,10-8)处理组细胞成活率(53±5,63±6,61±6,58±7)、Alb合成(4.8±0.6,6.5±0.7,5.8±0.7,4.9±0.6)及MTT活性(0.25±0.07,0.38±0.06,0.31±0.05,0.22±0.03)较对照组(46±7,3.9±0.6;0.11±0.01)显著增加(P＜0.05),且CGRP(10-6,10-7)处理组细胞成活率、Alb合成及MTT活性显著高于预培养组(P＜0.05);预培养组及各CGRP (10-6,10-7,10-8)处理组肝细胞复苏后48h内LDH释放(25±7,15±4,17±5,18±6),ROS释放(107±9.5,62±4.8,70±7.1,80±5.8)及MDA水平(0.87±0.1,0.70±0.06,0.76±0.07,0.80±0.07)较对照组(31±6,120±8.5,1.31±0.04)显著减少(P＜0.05),且与预培养对照组比较,CGRP (10-6,10-7,10-8) 各处理组LDH及ROS释放显著减少(P＜0.05),CGRP (10-6,10-7)处理组MDA释放显著减少(P＜0.05).[结论]CGRP预培养对冻存引起的肝细胞损伤具有保护作用,其机制与抗氧化应激损伤有关.     

薯蓣丸对疲劳大鼠IL-6的影响

目的:探讨薯蓣丸抗疲劳作用机制以及IL-6与疲劳的相关性.方法:SD雄性大鼠36只,随机分为空白组、模型组、薯蓣丸组,各12只.采取强制冷水游泳造模,薯蓣丸组进行喂食薯蓣丸配方颗粒溶液,模型组亦相应增加饮水量.模型组与薯蓣丸组均继续强制冷水游泳21天.实验第28天各组均进行力竭游泳,测定力竭时间与IL-6.结果:薯蓣丸组游泳力竭时间较模型组及空白组明显延长;薯蓣丸组与模型组IL-6均显著低于空白组.结论:大鼠疲劳状态下IL-6水平有所降低,薯蓣丸有一定抗疲劳作用.     

诱导型一氧化氮合酶抑制剂对胆管癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂(i NOS)抑制剂对胆管癌细胞生物学行为的影响。方法:不同浓度i NOS抑制剂1400W孵育人胆管癌QBC939细胞24 h后,分别用硝酸还原酶法、MTT比色法检各组细胞中NO浓度与增殖情况,并计算半抑制浓度(IC_(50));根据IC_(50)值,选择合适浓度的1400W处理QBC939细胞24 h后,分别用划痕试验、Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭情况。以上实验均以未加1400W培养基处理的QBC939细胞为空白对照。结果:与空白对照组比较,各1400W处理组QBC939细胞中NO含量及增殖率均呈浓度依赖性降低(均P0.05),IC_(50)值为51.24μmol/L;用_(50)μmol/L的1400 W处理QBC939细胞24 h后,实验组的细胞划痕愈合率(61.7%vs.92.3%)和细胞侵袭数(72.7个vs.128.0个)均较对照组明显降低(均P0.05)。结论:i NOS抑制剂1400W能抑制胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与NO下游的信号分子变化有关。     

高脂饮食小鼠脂肪组织胞外囊泡损伤海马神经元的研究

目的探讨高脂饮食小鼠脂肪组织分泌胞外囊泡对海马神经元以及小鼠认知行为的影响。方法C57BL/6J雄性小鼠20只,随机分为2组(n=10):正常饮食(normal diet,ND)组、高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,分组喂养28周,每周记录小鼠体重。于第27周检测小鼠血糖、胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),第28周用Morris水迷宫实验检测小鼠学习和记忆能力。取小鼠脂肪组织,HE染色观察形态学差异,并提取其分泌的胞外囊泡,采用TEM及NTA进行鉴定。将PKH 67标记的脂肪组织胞外囊泡经尾静脉注射正常小鼠,30 h后检测脑组织海马神经元摄取脂肪组织胞外囊泡的情况;用相同蛋白量的胞外囊泡处理原代海马神经元,观察其对神经元细胞活性及细胞形态的影响。结果与ND组相比,HFD组小鼠体重明显增加,血糖及胰岛素水平升高,并出现胰岛素抵抗状态。HFD组小鼠逃避潜伏期显著延长,目标象限停留时间明显缩短。HFD组小鼠脂肪细胞明显增大,脂肪组织分泌的胞外囊泡明显增多。脂肪组织分泌的胞外囊泡可被原代海马神经元及正常小鼠脑组织海马神经元摄取。与ND组相比,HFD组小鼠脂肪组织胞外囊泡处理可明显减少海马神经元树突长度、初级树突数和次级树突数,并降低神经元细胞活性。结论长期高脂饮食可能通过影响脂肪组织胞外囊泡,损伤海马神经元。     

低氧对胆管癌细胞增殖的影响及与HIF-1α表达的关系

目的 建立缺氧模型,观察缺氧对QBC939胆管癌细胞生长和HIF-1 α表达的影响.方法 利用氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)模拟缺氧诱导,MTT观察缺氧诱导对胆管癌细胞增殖的影响,用流式细胞术观察缺氧对细胞周期的影响,利用Western Blot观察缺氧诱导对胆管癌细胞HIF-1 α表达的影响.结果 CoCl2(0μmol/L,50μmol/L,100μ mol/L,200μ mol/L,400μmol/L)浓度依赖性诱导胆管癌细胞增殖;CoCl2(200μmol/L)处理48 h组QBC939胆管癌细胞G1期显著减少,处理72 h组G1期显著减少的同时S期和G2显著增加;CoCl2(50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L)处理72 h,HIF-1 α表达显著增加,并随CoCl2浓度增加显著增强.结论 缺氧可诱导胆管癌细胞增殖与增加HIF-1α表达相关.     

湖南乡村医生现状及培训需求调查

【目的】了解湖南省乡村医生队伍的现状及存在的问题。为进一步完善发展乡村医生队伍提供依据。【方法】对湖南省郴州市安仁县的四个乡的14个村;常德市澧县四个乡的14个村的71名乡村医生进行现场问卷调查。【结果】71名被调查的乡村医生中,男女比例为8：1;31～50岁以上的乡村医生占84．5％;中专学历占84．5％;取得执业医师或助理执业医师资格的占33．8％;以西医方式行医占59．1％;诊治最多的疾病为普通感冒的乡村医生占64．7％;最近三年参加过相关免费培训的占51．2％。【结论】目前乡村医生学历低、业务水平低、执业资格率低及年龄偏高的现象值得重视,加强对乡村医生的培训,提高其执业水平对农民群众的健康有着重要的意义。