组织型纤溶酶原激活物双单抗夹心ELISA建立及临床应用

本文动用自制ｔ－ＰＡ单克隆抗体建立ｔ－ＰＡ：Ａａ夹心ＥＬＩＳＡ法。结合ｔ－ＰＡ：Ａ、ＰＡＩ：Ａ测定，对５０例正常人，８７例肝病，４７例冠心病和１９例深静脉血栓 成患者的血浆ｔ－ＰＡ：Ａｇ、ｔ－ＰＡ：Ａ、ＰＡＩ：Ａ水平进行了研究。     

HMBA-induced differentiation of myeloid leukemic cell lines is assoc iated with altered G1 cell cycle regulators and related genes

Theproliferationanddifferentiationofhematopoieticcellscanberegulatedbyanumberofphysiologicalagentsincludinghexamethylenebisacetamide (HMBA) Clinically ,HMBAhasbeenusedforthetreatmentofacutemyeloidleukemiaandmyelodysplasticsyndrome 1 However,themechanismoftheeffectofHMBAonthedifferentiationofmyeloidleukemiccellsislargelyunkown Uptonow ,relatedreportshavenotbeenfound WeusedHL 6 0andU937celllinestostudytheeffectofHMBAonthedifferentiationofmyeloidleukemiccellsandtoexplorethepossiblemechan…     

六亚甲基二乙酰胺对急性白血病细胞株HL-60和U937分化、凋亡的影响及其机制

目的　研究六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)体外诱导HL 6 0和U937细胞分化、凋亡的作用及其机制。方法　流式细胞仪检测细胞分化抗原CD1 1b、CD1 4,细胞凋亡标记Annexin Ⅴ以及进行细胞周期分布和细胞内cyclinD、cyclinE、p2 7抗原的分析 ,RT PCR检测c myc、Rb、Bcl 2基因mRNA的表达。结果　HL 6 0、U937细胞经HMBA处理 72h后CD1 1b表达显著增高 ,高剂量HMBA促使Annexin Ⅴ表达增加。HMBA阻滞HL 6 0、U937细胞于G0 G1 期 ,并使该两种细胞内cyclinE表达显著下降 ,cyclinD、p2 7表达显著增高 ,呈剂量依赖关系 ;HMBA可使HL 6 0、U937细胞c myc、Bcl 2mRNA表达下调 ,而RbmRNA在HL 6 0细胞表达上调 ,在U937细胞则无显著改变。结论　HMBA能诱导HL 6 0、U937细胞出现明显的分化 ,高剂量的HMBA有促使HL 6 0、U937细胞凋亡的倾向 ,其机制可能是通过影响细胞周期调控分子以及有关的增殖分化相关基因的表达 ,从而抑制细胞增殖 ,促进细胞分化。     

组织型纤溶酶原激活物抗原的检测及其临床应用

组织型纤溶酶原激活物抗原的检测及其临床应用王钦红王鸿利邵慧珍朱立红王振义采用自行研制的组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）单克隆抗体（单抗）建立夹心ＥＬＩＳＡ法检测ｔ－ＰＡ抗原（ｔ－ＰＡ∶Ａｇ），同时测定ｔ－ＰＡ活性（ｔ－ＰＡ∶Ａ）和ＰＡＩ活性（ＰＡＩ∶...     

APC抵抗与静脉血栓形成

运用ＡＰＣ－ＡＰＴＴ试验发现了ＡＰＣ抵抗现象，正常ＦＶ可纠正ＡＰＣ抵抗。ＦＶ基因１６９１位Ｇ→Ａ错义突变致使其氨基酸序列上Ａｒｇ→Ｇｌｎ，是ＡＰＣ裂解位点消失从而引起ＡＰＣ抵抗的分子生物学基础，ＡＰＣ抵抗是迄今为止导致静脉血栓形成最重要的原因（４０％￣６０％），当伴有其它因素如蛋白Ｃ、蛋白Ｓ或抗凝血酶－Ⅲ缺陷或者口服避孕剂、妊娠等时，ＡＰＣ抵抗可显著提高静脉血栓形成的发生率。     

六亚甲基二乙酰胺对HL-60细胞细胞周期及其调节蛋白表达的影响

六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisecetamide,HMBA)是一种极性诱导分化剂，已应用于临床治疗急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征(MDS)，但其诱导髓系白血病细胞分化的机制尚不清楚。本研究观察了HMBA对HL—60白血病细胞细胞周期及其调节蛋白表达的影响，以探讨其药理机制。用流式细胞术检测HMBA对HL—60细胞细胞周期分布和细胞周期蛋白D、E及p27表达的影响。用RT—PCR研究HMBA对细胞周期负性调控分子CKI p15，p16，p27基因mRNA表达的影响。结果表明，HMBA主要使HL—60细胞阻滞于G0/G1期，经HMBA处理后HL-60细胞胞浆内细胞周期蛋白E蛋白表达显降低，而细胞周期蛋白D和p27蛋白表达则显增高；未经HMBA处理的HL-60细胞p15，p16 mRNA均无表达；3mmol／L HMBA处理24小时后p15 mRNA出现弱阳性条带，48小时和72小时后出现强阳性条带，p16 mRNA则在48小时后出现弱阳性条带，72小时后出现强阳性条带；p27 mRNA在未经处理和处理后24，48和72小时后均出现强阳性条带，阳性程度无明显差异。结论：HMBA的药理机制之一可能是通过下调细胞周期蛋白E，上调p27蛋白的表达，同时使得p15，p16基因mRNA重获表达。阻滞HL—60细胞周期于G1期，从而发挥其抗增殖作用。     

γ射线辐照抑制淋巴细胞增殖的剂量--效应关系研究

目的：研究γ射线辐照灭活淋巴细胞增殖活性的剂量-效应关系，探讨γ射线辐照血液预防输血相关性移植物抗宿主(TA—GVHD)的合适辐照剂量。方法：取人外周血淋巴细胞，用7．5、15、30Gy γ射线辐照，检测不同剂量γ射线对淋巴细胞增殖的抑制作用。结果：30Gy γ射线辐照可以有效抑制淋巴细胞增殖，15和7．5Gy辐照抑制作用不充分。结论：为了有效抑制淋巴细胞的增殖活性和预防输血相关性移植物抗宿主病，30Gy是γ射线辐照的合适剂量。     

siRNA干扰p27基因表达对脐血CD34+细胞体外扩增影响的初步研究

造血干/祖细胞是一类被定义为具有自我更新和潜在重建造血能力的细胞.脐血是造血干/祖细胞的重要来源.通常人们应用高浓度的细胞因子刺激扩增脐血造血干/祖细胞,但导致其多向分化潜能及移植后造血重建能力下降.近来,Cheng等研究造血干/祖细胞的增殖周期特性发现,两种不同的Cip/Kip家族成员p21和p27可分别特异性地负向调控造血干/祖细胞增殖池的大小,p21可阻滞干细胞进入增殖周期,而p27可限制祖细胞的增殖周期.这为体外操纵造血干/祖细胞的增殖提供了良好途径.我们以pSilencer1.0-U6构建p27 siRNA表达载体转染脐血CD34＋细胞,以去除p27对造血祖细胞的增殖抑制作用,以一种不同于既往细胞因子刺激的方式,试图为体外扩增脐血CD34^＋细胞提供一种新的策略.