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目的:探讨RNA干扰技术沉默Ras homolgyC(RhoC)对卵巢癌细胞SKOV3细胞运动和侵袭力的影响.方法:利用Invitrogenis RNAi Designer 软件设计并构建RhoC的干扰RNA(miRNA)载体,利用质脂体介导法将RhoC miRNA及非特异miRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,经blasticdin进行稳定筛选出抗性克隆;将实验分为RhoC miRNA组(转染特异miRNA)、非特异miRNA组(转染非特异性miRNA)、空白对照组(不转染RhoC miRNA).Western blot检测3组卵巢癌细胞中RhoC蛋白表达水平;同时检测对卵巢癌细胞体外运动及侵袭的抑制作用.结果:SKOV3细胞稳定转染后,转染特异性miRNA组RhoC蛋白表达量[0.198 9(4 257/21 498)]与转染非特异miRNA组[2.142(38 245/17 855)]和空白对照组[2.604(48 872/18 768)]相比,差异均有统计学意义(P＜0.01),而非特异性组与空白对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05);体外细胞运动实验表明,转染特异性miRNA组与转染非特异性miRNA组及空白对照组跨膜细胞数[分别为(52±3)个、(401±28)个及(432±28)个/高位镜(×200)] 比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),而转染非特异性miRNA组与空白对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05).重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,以上3组穿透基底膜细胞数[分别为(48±9)个、(386±26)个及(424±25)个/高位镜(×200)]比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),而后两组之间无统计学意义(P＞0.05).结论:抑制卵巢癌SKOV3细胞RhoC蛋白的表达对卵巢癌细胞的运动及侵袭有抑制作用,这可能为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点. 相似文献
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目的 研究RhoC、MMP2蛋白在卵巢上皮性癌中表达及其在卵巢癌转移中的相互关系.方法 采用免疫组织化学方法检测10例正常卵巢组织、12例卵巢上皮性良性肿瘤及91例卵巢癌组织中RhoC与MMP2蛋白的表达情况,并与临床特征相比较.结果 RhoC,MMP2蛋白在卵巢良性肿瘤和卵巢正常组织中均无表达;在卵巢上皮性癌中阳性表达率分别为37.3%和68.1%.在组织分化程度上中、低分化的阳性表达率明显高于高分化程度的肿瘤(P＜0.005),在临床分期中Ⅲ-Ⅳ期肿瘤的阳性率明显高于Ⅰ-Ⅱ期(P＜0.005),有转移的RhoC和MMP2蛋白的表达率明显高于无转移的蛋白表达率(P＜0.005),卵巢癌中RhoC阳性表达与MMP2阳性表达呈现出协同作用,表现出一致的正相关性(r=0.492,P＜0.05).结论 RhoC、MMP2蛋白的表达与卵巢癌的细胞分化程度、临床分期及有无转移密切相关,说明在卵巢癌的侵袭与转移中协同发挥着重要作用. 相似文献
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