液体活检技术在肿瘤诊断中的最新研究进展

肿瘤的死亡率居高不下。早期诊断对提高肿瘤患者的生存率,改善预后至关重要。液体活检技术作为一种新型的生物标志物检测技术已成为近年来临床关注的热点。液体活检的研究内容包括循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）、循环肿瘤 DNA（circulating tumour DNA, ctDNA）和外泌体,具有操作方便快捷、能反复获取、易于实时监控等优点。全文就以上标志物在肿瘤早期诊断中的应用价值以及存在的优势和局限性进行综述,以期为肿瘤患者早期诊断提供新方法。     

血流感染金黄色葡萄球菌毒力基因、agr分型及生物膜形成能力调查*

摘要:目的探讨血液 来源金黃色葡萄球菌耐药性、毒力基因、agr 分型、生物膜形成能力,并比较甲氧西林敏感株与耐药株间的差异。方法收集2019年1月一2020年12月102株血液分离非重复金黃色葡萄球菌茵株,采用全自动微生物鉴定药敏分 析系统进行药物敏感性检测;采用PCR及多重PCR分析菌株毒力基因携带情况及agr基因多态性;采用96孔板结晶紫染色法检测生物膜形成能力。采用卡方检验和Fisher 精确概率法比较分析甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏 感金黃色葡萄球菌(MSSA)菌株间耐药性、毒力基因、agr 分型及生物膜形成能力的差异。结果102 株金黄色葡萄球菌中,43株为MRSA,59株为MSSA。毒力基因普遍表达葡萄黃质蛋白基因crtN(99.0%)、溶血素基因(hla 97. 1%、hlb 98. 0%、hld 96.1%),其次为表面因子CP8合成酶基因cap8H(34.3%)、中毒性休克综合征毒素-1基因tst( 21.6%),其中携带crtN/hla/hlb/hld 4种毒力基因组合的菌株最多(48株)。agr分型阳性率为97.1%,其中agr I型占56.9% ,agr I型占36.3%,agr I型占 4.9%,未检测出agt IV型,agr 未获分型3株。生物膜形成阳性共28株,其中12株可形成强生物膜。MRSA菌株对环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率高于MSSA菌株(P<0.05) ;MRSA菌株tst基因携带率高于MSSA (P<0.01) ,cap8H基因携带率低于MSSA(P<0.05),差异有统计学意义;MRSA菌株中agr I和agr I型各占46.51 %和48.84% ;MRSA菌株更倾向形成中等或弱生物膜,与MSSA菌株相比在生物膜形成能力上差异无统计学意义。结论临床分 离血流感 染金黄色葡萄球菌存在多种毒力基因、agr分型、生物膜形成能力,需加强监测。     

碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的药物敏感性及分子特征分析

目的分析碳青霉烯耐药非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae without producing carbapenemase,CRKPPC)的抗菌药物敏感性、β-内酰胺酶基因和外排泵基因的分布及外排泵抑制剂的抑制作用。方法收集2012—2014年我院碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌108株,用Mastdiscs combi Carba plus纸片系统检测碳青霉烯酶表型。用微量肉汤稀释法测定CRKPPC菌株对抗菌药物的敏感性;用PCR和DNA测序技术检测β-内酰胺酶耐药基因,包括超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBL)和质粒介导的头孢菌素酶(Amp C)编码基因及外排泵基因acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH;外排泵抑制剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)和利血平抑制试验分析外排泵在碳青霉烯耐药中的作用;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析细菌外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36的表达。结果碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌菌株中有26株细菌为CRKPPC;这26株细菌对β-内酰胺类药物高度耐药,对阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均较高,但对替加环素、多黏菌素、头孢他啶/阿维巴坦和氨曲南/阿维巴坦等有很好的敏感性; blaCTX-M和blaSHV检出率依次为76.9%和57.7%;外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36均有不同程度的缺失,缺失率分别为57.7%和19.2%;80%以上的细菌中存在acr AB-tolC、kex D、kde A、kpn EF和kpn GH基因; CCCP对碳青霉烯类药物具有显著的抑制作用,而利血平没有明显的抑制作用。结论替加环素、多黏菌素可以作为CRKPPC联合用药的基础药物。CRKPPC菌株中存在Amp C、ESBLs及不同程度的外膜孔蛋白Omp K35和Omp K36缺失,但外排泵对碳青霉烯类药物的外排作用是CRKPPC对碳青霉烯耐药的主要机制,外排泵抑制剂可能在这种细菌引起的感染治疗中有重要价值。     

Vitek-2 Compact AST-GN13检测耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对左氧氟沙星药敏结果的准确性

目的 探讨Vitek-2Compact AST-GN13对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌左氧氟沙星敏感性测定的准确性。方法 收集亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌50株,以E-Test法为参考方法,分别用Vitek-2Compact AST-GN13药敏卡和纸片扩散(K-B)法对收集菌株进行左氧氟沙星敏感性检测,并评价3种方法结果的符合性。结果 共收集亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌50株,E-Test法结果显示共有46株最低抑菌浓度(MIC)256mg/L,4株MIC=4mg/L;K-B法结果与E-Test法结果相符;Vitek-2Compact AST-GN13检测出现不同结果,其中4株菌株为敏感(≤2mg/L),36株为中介(4mg/L),10株为耐药(≥8mg/L)。K-B法与ETest法标准符合率(CA)为100%,Vitek-2Compact与E-Test法CA为20%,一般错误率为72%,严重错误率为8%。结论Vitek-2Compact AST-GN13检测耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对左氧氟沙星的敏感性时,可能会产生错误结果,日常工作中可采用E-Test与K-B法互为替代方法进行试验。     

自前列腺癌术后患者中段尿分离嗜CO_2粪肠球菌1株

正苛养性细菌(如嗜血杆菌等)的培养,一般依赖CO_2,而肠杆菌科细菌或肠球菌很少依赖CO_2。而嗜CO_2菌属的报道最早可追溯至1951年发现的嗜CO_2葡萄球菌~([1]),而后嗜CO_2大肠埃希菌~([2])、嗜CO_2奇异变形杆菌~([3])被相继报道引起尿路     

364株临床分离的肠球菌分布及耐药性分析

目的：了解我院肠球菌在临床的感染性分布,并对其耐药情况进行分析,指导临床合理有效地使用抗生素。方法：采用回顾性统计分析方法对我院2006年1月-2008年5月分离出的364株肠球菌的鉴定结果以及用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法检测对15种抗生素的耐药情况进行分析。结果：364株肠球菌中,粪肠球菌195株,屎肠球菌160株,鹑鸡肠球菌4株,铅黄肠球菌2株,坚韧肠球菌2株,鸟肠球菌1株。主要分布在尿154例,其次是分泌物70例,血液45例,痰液40例,导管23例,胆汁13例,腹水12例,脓液7例。除对万古霉素和替考拉宁的耐药率较低外,对大多数常用抗生素的耐药率均达50％以上。结论：泌尿系统肠球菌感染最为常见。万古霉素和替考拉宁仍是治疗肠球菌感染最有效的药物,但应结合药敏试验结果指导临床合理地选用抗生素,以减轻对万古霉素的依赖,防止其耐药菌株的产生。     

亚胺培南不敏感大肠埃希菌碳青霉烯酶基因的检测

目的 了解碳青霉烯酶基因在亚胺培南不敏感大肠埃希菌中的分布情况.方法 收集亚胺培南不敏感的大肠埃希菌25株,K-B纸片法测定菌株对药物的敏感性;采用EDTA协同试验及改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型检测;PCR法扩增碳青霉烯酶基因并进行序列分析.结果 25株大肠埃希菌呈现泛耐药现象,其中亚胺培南耐药15株,中度敏感10株;改良Hodge试验阳性1 5株,金属酶表型试验全部阴性;15株菌株检出KPC-2酶基因,未检出其它碳青霉烯酶基因.结论 产KPC-2酶是造成该院大肠埃希菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因.     

阴道加德纳菌在尿路感染病原菌中的地位及其耐药性

阴道加德纳菌（gardnerella vaginalis，GV）是加德纳菌属中唯一的一个菌种。该菌为阴道正常菌群，但若过度生长，可引起乳酸杆菌大量减少，造成阴道微生态失衡和阴道分泌物性质改变，可引发非特异细菌性阴道炎。GV现被认为是与性传播有关的病原菌，除引发非特异细菌性阴道炎外，还可引起绒毛膜炎、子宫内膜炎、急性输卵管炎、术后感染、羊水感染、不孕症、早产以及新生儿败血症等。但关于该菌作为尿路感染病原菌的报道却较少见。为此笔者对近两年我院临床尿路感染患者的尿液细菌培养结果进行了回顾性分析，以期了解GV作为病原菌在细菌性尿路感染中的地位．同时通过GV对各种抗生素的体外耐药性研究，给临床针对GV感染的经验用药提供参考。     

2015—2021年CHINET链球菌属细菌耐药性监测

目的 了解2015—2021年国内主要地区医疗机构临床分离链球菌属细菌对抗菌药物的耐药性。方法 对国内主要地区51所医院临床分离的链球菌属采用纸片扩散法（K-B法）或E试验方法或自动化商业药敏测试系统，按CHINET统一监测方案进行抗菌药物敏感性试验，并按2022年CLSI折点标准统计分析总结。结果 2015—2021年共收集到89 684株链球菌属细菌，包括肺炎链球菌35 254株（39.3%）,β溶血链球菌42 563株（47.6%），草绿色链球菌11 767株（13.1%）。42563株β溶血链球菌中A群、B群以及未能鉴定分型的链球菌分别为39.8%、52.8%、7.4%。非脑脊液样本儿童患者分离的25 552株肺炎链球菌中青霉类敏感、中介、耐药（PSSP、PISP、PRSP）菌株的检出率分别为86.2%～97.7%、1.7%～6.5%和0.6%～7.3%，在成人患者7 997株中的检出率分别为92.0%～95.1%、3.8%～5.3%和1.4%～2.7%。脑脊液分离肺炎链球菌PRSP占比81.2%。无论是脑脊液或非脑脊液分离儿童和成人的肺炎链球菌对红霉素和克林霉素高度耐药，耐药...     

慢性肾脏病伴心脑血管病患者凝血、抗凝及纤溶指标变化分析

摘要：目的?研究慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)伴心脑血管病患者凝血、抗凝及纤溶指标变化，为鉴别诊断肾脏病伴发心脑血管病提供参考依据。方法?收集2019年10月至2020年9月就诊于南京鼓楼医院肾脏科98例CKD患者血液样本，根据是否伴有心脑血管病分为2组：无心脑血管病(A组)31例，伴有心脑血管病(B组)67例。用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)，用Clauss法检测纤维蛋白原(Fib)，用免疫比浊法检测D-二聚体(D-D)；用化学发光免疫测定法检测患者抗凝及纤溶指标，包括：血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)、纤溶酶-纤溶酶抑制剂复合物(PIC)、组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物(t-PAIC)，统计分析两组间各指标的差异。ROC曲线分析有显著差异指标对CKD患者伴发心脑血管疾病的预测价值。结果?B组Fib、D-D、TM、TAT、PIC、t-PAIC水平显著高于A组(P<0.05)；两组间PT、APTT、TT水平差异无统计学意义(P>0.05)。Fib、D-D、TM、PIC预测CKD患者伴发心脑血管疾病的价值较高，ROC曲线下面积分别为0.742、0.858、0.927、0.738(P<0.05)。结论?CKD伴心脑血管病患者Fib、D-D、TM、TAT、PIC、t-PAIC水平有显著改变且Fib、D-D、TM、PIC对其有一定的预测价值。监测上述指标可以辅助临床诊断，减少CKD患者心脑血管事件发生。