活体亲属肾移植手术的17例报告

目的总结活体亲属肾移植的临床经验。方法对供、受者进行全面的免疫学检查，对供者行IVU检查了解分侧肾功能，行DSA或MRA、螺旋CT血管三维成像检查了解血管的变异情况之后，开放式手术摘取供肾13例，经后腹腔镜活体供肾摘取4例，按常规方法移植给受者。免疫抑制方案为环孢素A（或FK506）、霉酚酸酯（或硫唑嘌呤、雷帕鸣）、强的松三联免疫抑制剂。结果13例开放式手术时间1．5～3．0h，平均2．0h；热缺血时间1．0～1．5min，平均1．2min；术中出血量60～200ml，平均140ml，术中及术后均未输血；术后住院7～10d，平均8d。4例后腹腔镜手术时间3．0～4．5h，平均3．5h；热缺血时间2．5～3．5min，平均2．8min；术中出血量60～100ml，平均75ml，术中及术后均未输血；术后3～5d出院。移植肾血液循环恢复后10～40s泌尿，平均20s。1例受者术后45d发生轻微的急性排斥反应，应用激素冲击3d后逆转，其余受者均无并发症。随访4～60个月，人／肾存活率为100％，移植肾功能良好。结论活体亲属肾移植安全可行，取左肾尽量靠近腹主动脉壁切断肾动脉，取右肾切取少许下腔静脉片。     

前列腺癌上调表达基因BRP44的蛋白细胞定位及功能预测研究

目的 了解GFP-BRP44融合蛋白的细胞定位,初步预测BRP44的功能.方法 构建BRP44与GFP的融合表达真核载体,脂质体介导法转染高表达该基因的前列腺癌细胞株LNCaP,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的细胞定位.生物信息学方法对基因BRP44进行序列分析及功能预测.结果 成功构建GFP-BRP44融合蛋白的真核表达载体,pEG-FP-BRP44融和蛋白在LNCaP细胞核及细胞质均有表达.与单纯GFP相比,融合蛋白在细胞质的表达相比细胞核更强.功能预测提示基因BRP44可能是一个受oct-1等转录因子调控,主要在细胞线粒体发挥基因调节作用的可溶性蛋白.结论 BRP44蛋白可能主要在细胞质发挥作用.     

肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿(附21例报告)

目的：对肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿的疗效进行初步总结。方法：显露肾蒂后充分游离并结扎肾动静脉之间的淋巴管、动静脉及肾盂裸露2～3cm。结果：随访1～6年，乳糜消失率为90．12％，复发率为9．88％。结论：肾蒂淋巴管结扎手术治疗乳糜尿近、远期疗效肯定。     

腹腔镜输尿管切开取石术治疗输尿管上段结石

目的分析总结12例采用腹腔镜下输尿管上段结石切开取石的经验。方法 2005年2月~2008年10月,我院采用腹腔镜经腹膜后间隙行输尿管上段切开取石10例,经腹腔途径取石2例。10例采用3孔法,2例（经腹腔途径）采用4孔法;球囊扩张建立腹膜后间隙,二氧化碳气体充气维持;输尿管结石部位采用冷刀切开,取石后留置双J管并采用薇荞线间断缝合输尿管切口。结果平均结石长径18.5（12~26）mm,均为输尿管上段结石,2例双侧,6例左侧,4例右侧;平均手术时间86.7（58~136）min,无中转开放手术病例;平均住院时间5（4~15）d,平均随访时间14（4~23）个月。结石取尽率100%,无输尿管狭窄出现;1例出现尿漏,4d后尿漏停止,无其他术后并发症发生。结论腹腔镜下输尿管切开取石术创伤小,安全有效,尤其适合于输尿管上段较大嵌顿性结石的处理。     

人精原干细胞的磁式分选和功能鉴定

目的 :目前对人睾丸内精原干细胞 (SSC)的生物学本质特性尚缺乏深入研究。本研究旨在寻求人SSC的特异性表面标志以及对其进行有效分选和功能鉴定的合理方法。　方法 :应用α6、β1 整合素、Thy 1 (CD90 )和c kit作为人SSC标志 ,利用免疫磁珠分选技术对成人睾丸单细胞悬液进行多参数复合分选 ,并利用流式细胞仪对分选后细胞的光散射特性和DNA倍体特性进行检测 ;将人分选后生殖细胞进行显微注射移植 ,观察人SSC在裸鼠睾丸内克隆形成的数量及其精子发生的可能性 ,对上述分选后人SSC进行功能性评价。　结果 :分选后α+ 6Thy 1 + c kit-和 β+ 1 Thy 1 + c kit-细胞均为大小、形态特征较为均一的细胞亚群 ,分别占分离细胞总数的 2 %～ 3%和 0 .5 %～ 1 %。其光散射特性分析显示均为明显低侧向散射特征。DNA倍体分析显示明显DNA倍体组成改变 ,合成期和四倍体细胞消失 ,仅有单倍体、二倍体和减数分裂期细胞 ,α+ 6Thy 1 + c kit-细胞群中 ,二倍体细胞数提高至该细胞群的5 1 .2 %。功能性评价结果表明 ,分选后α+ 6Thy 1 + c kit-细胞中干细胞浓度富积约 4 0倍 ,β+ 1 Thy 1 + c kit-细胞中干细胞浓度富积约 2 0倍。　结论 :α6,β1 整合素和Thy 1可作为阳性标志用于人SSC的分选。应用上述标志的复合免疫磁珠分?     

氯高铁血红素诱导内源性血红素加氧酶1对大鼠肾移植急性排斥反应的防护

背景:研究表明,血红素加氧酶1系统及其代谢产物可通过多条途径发挥对器官移植物的保护作用,显著延长移植物生存时间.目的:实验拟进一步评估氯高铁血红素诱导产生的内源性血红素加氧酶1对大鼠肾移植急性排斥反应的防护作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-05/08在解放军第三军医大学动物实验中心完成.材料:以27只BN大鼠为供体(54个供肾),54只雄性Lewis大鼠为受体,建立双侧供肾大鼠原位肾移植模型.方法:以硬膜外导管为支架行供肾静脉与受体肾静脉端端吻合,供肾动脉带腹主脉瓣与受体腹主动脉行端侧吻合,供肾输尿管膀胱瓣与受者膀胱吻合.Lewis受鼠按随机数字表法分为3组(n=18):肾移植模型组术后不予免疫抑制治疗:氯高铁血红素诱导组供鼠于术前1 d腹腔注射氯高铁血红素50 mg/kg,受体于术后腹腔注射氯高铁血红素50 mg/(kg·d)至处死;环孢素A组术后予环孢素A灌胃5 mg/(kg·d).主要观察指标:各组分别于肾移植术后第1,5,7天处死6只受鼠,观察肾组织病理改变,血红素加氧酶1蛋白表达及其对急性排斥反应的影响,同时采集血标本测血肌酐含量.结果:①氯高铁血红素可促进大鼠肾脏血红素加氧酶1蛋白表达水平(尸＜0.05).②移植术后肾移植模型组、氯高铁血红素诱导组的血红素加氧酶1表达水平高于环孢素A组(P＜0.05～0.01),且随着排斥反应的加重,表达逐渐增强;环孢素A组在移植术后血红素加氧酶1表达也有所增强,但明显低于氯高铁血红素诱导组(P＜0.01),排斥反应相对较轻.③氯高铁血红素诱导组大鼠肾组织病理学表现较肾移植模型组明显减轻,但比环孢素A组重.④氯高铁血红素诱导组血肌酐水平低于肾移植模型组(P＜0.05),高于环孢素A组(P＜0.05).结论:血红素加氧酶1在大鼠同种异体肾移植抗捧斥反应、保护移植器官中起到了一定的作用,但其作用远远不及环孢素A等强力免疫抑制剂.     

含产气荚膜梭菌肠毒素基因重组质粒pET-28a-CPE的构建和表达

目的 构建含全长产气荚膜梭菌肠毒素(CPE)基因的重组表达质粒pET-28a-CPE并进行原核表达.方法 培养并提取表达肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615的基因组DNA,PCR扩增出全长CPE基因片段并连接入pET-28a载体质粒中,构建重组原核表达质粒pET-28a-CPE,进行酶切及测序鉴定,并转化入感受态大肠杆菌(E.coli)BL21中,用IPTG诱导CPE表达.结果 复苏、培养成功产肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615,成功构建了表达质粒pET-28a-CPE,经酶切及测序鉴定结果 与设计的完全相符,成功用E.coil BL21进行了原核表达,目的 蛋白CPE占总表达蛋白45.37%.结论 本实验成功构建并表达了含CPE的重组质粒pET-28a-CPE,为进一步观察CPE时前列腺肿瘤等的生物学作用奠定了基础.     

带蒂大网膜移植修补肾移植术后复杂性尿瘘

目的探讨带蒂大网膜移植修补肾移植术后复杂性尿瘘的应用价值。方法肾移植术后尿瘘行多次手术失败的患者21例，年龄23-55岁，平均32岁。尿瘘瘘口部位：肾盂2例，输尿管2例，输尿管膀胱吻合口11例，输尿管末端坏死6例。肾盂瘘切除瘘口后局部修补再用带蒂大网膜移植覆盖，输尿管瘘、输尿管膀胱吻合瘘或输尿管长段坏死者在行移植肾输尿管与自体输尿管对端吻合或与膀胱再植后用带蒂大网膜包绕于吻合口。结果21例患者手术一次成功20例（95％），失败1例（5％）。手术时间75-120min，平均95min。术中失血100-550ml。平均310ml。失败原因为伤口感染导致大网膜坏死而切除移植肾。随访1-7年，尿瘘无复发，吻合口无狭窄、肾积水及尿路感染，肾功能正常。结论利用大网膜的生物学特性，采用带蒂大网修补肾移植术后复杂性尿瘘取材方便，组织修复快，尿瘘复发率低，一次成功率高。     

人睾丸精原细胞的分离和纯化

目的探讨人睾丸精原细胞的分离纯化.方法用联合二步酶消化法获得人生殖细胞悬液,经Percoll不连续密度梯度离心,再用差异粘附法纯化得到成活率较好、含量较高的人精原细胞.结果所获得睾丸组织细胞悬液内活细胞、死细胞平均所占百分比分别为89.71%、10.29%.Percoll不连续密度梯度中,细胞主要在相邻梯度的界面处形成细胞带,其中精原细胞主要分布于27%～35%Percoll梯度间,根据细胞体外培养时的形态学特征等进行判断和分析,经纯化后精原细胞的纯度达到60.42%.结论应用联合酶消化法、Percoll不连续密度梯度离心和差异粘附等方法可以有效地对人精原细胞进行分离和纯化.