上海人群面肩肱型肌营养不良症相关位点的D4Z4多态性

目的 对上海人群4p35位点D4Z4重复序列进行研究，分析D4Z4的多态性。方法 191名正常上海人的基因组DNA经EooR I/Bln I双酶水解后，应用脉冲场凝胶电泳及Southem印迹测定其染色体4p35位点的D4Z4片段长度，并对短的D4Z4片段Kpn I酶进行部分酶切以计数其D4Z4串联重复序列数。结果 在191名正常上海人群中，有17人（占8.9％）携带短的D4Z4片段，其长度在22－34kb之间；其中16人携带的短D4Z4片段位于4q35位点，1人携带的短D4Z4片段为4q35→10q26。结论 面肩肱型肌营养不良症的发病虽与4q35位点D4Z4片段的串联重复序列数减少有关，但上海人群中携带4q35位点短的D4Z4片段个体的比例明显高于西方人群，提示其他因素可能也参与面肩肱型肌营养不良症的发病。     

用尼龙毛法组分淋巴细胞

本文报道用尼龙毛法分离T和B淋巴细胞。讨论了血小板的去除以及用涤纶纤维代替尼龙毛,用 Hanks液代替 199培基的使用。结果表明,用本法分离 T、B淋巴细胞是一种简易、快速、纯度较好、得率高、基本上不损害细胞的方法。     

尿液中肿瘤标志物检测在膀胱癌诊断中的应用研究进展

膀胱癌是一种十分容易复发的恶性肿瘤,治疗后需严密随访。目前膀胱镜检查及可疑病变处活检仍是膀胱癌诊断和随访的金标准[1]。然而,这些检查属侵入性检查,患者有一定痛苦,还可能会导致尿路感染,这使膀胱镜检查的临床应用受到限制。尿细胞学检查(urinarycytology)是非侵入性检查,能直接识别尿中脱落的肿瘤细胞,它对诊断膀胱癌的特异性很高,但敏感性较低,尤其对低分级肿瘤的敏感性仅为20%～40%。理想的早期诊断和监测膀胱癌的方法应该是客观的、非侵入性的、具有高敏感性和特异性,且操作简便,费用低廉。本文就近年来用尿液中肿瘤标志物检测膀…     

新型富集方法在结核分枝杆菌检测中的应用

结核病(tuberculosis)主要是由结核分枝杆菌感染引起的疾病,目前全球大约20亿人,即约占全球1/3的人口感染过结核分枝杆菌。每年与结核分枝杆菌感染有关的病例数超过880万例,而将近200万人死于此病。世界卫生组织专家预测如果未来病情不进一步加强控制,到2020年新发现的感染结核分枝杆菌的患者数可达10亿,死亡人数将达3 600万。及时诊断和治疗是防止结核病的有力措施,也是全球控制结核病的重要举措。     

用腺苷处理区分人类T淋巴细胞亚群的初步观察

本文报告人的外周血T淋巴细胞在体外用腺苷处理后可分成两个亚群:AS细胞(腺苷敏感细胞)和AR细胞(腺苷抵抗细胞),AS和AR细胞的正常值以及它们的表面标志和一般形态学及超微结构特征,证明约80％的AS细胞有对IgG分子的Fc受体,AS和AR细胞主要是T细胞。两种细胞在超微结构方面有显著的差别。用ConA-SC模型测定AS细胞中含有高的ConASC活性,而AR细胞则否。     

定量PCR中常用的参照系统

聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)技术于1983年由美国Cetus公司的K.Mullis建立,这是一个在体外特异地复制一段已知序列的DNA片段的技术,可使人们快速地从试管中获得大量特异的核酸片段。PCR技术给生命科学领域的研究手段带来了革命性的变化,它已与DNA克隆、DNA重组和DNA测序等技术一样,成为分子生物学乃至医学研究和应用中不可缺少的工具。在医学研究和临床诊断治疗中,人们越来越多地需要对某一基因或核酸片段的量的变化进行观察和研究,如病毒在体内的复制状况和治疗过程中病毒荷载量的变化[1～3],基因受某些因素的影响…     

两个特殊血友病A患者家系的基因诊断

目的 探讨特殊血友病A(HA)家系的基因诊断。方法 用内含子22倒位检测及FⅧ基因内外4个位点的多态性进行遗传连锁分析;用核酸直接测序法对FⅧ各外显子及其侧翼序列进行检测。结果 家系1先证者表型为重型HA,FⅧ内含子22倒位检测及FⅧ基因内外4个位点的多态性遗传连锁分析未获得诊断信息;直接核酸测序证实先证者及其妹FⅧ基因24号外显子第2209位氨基酸存在R2209Q错义突变,后者胎儿DNA检测为正常男性。家系2中HA先证者已去世,一名要求做携带者检测的女性表型正常,内含子22倒位检测及直接核酸测序没有发现基因缺陷,用FⅧ基因内外4个位点的多态性遗传连锁分析均显示该成员未携带血友病A基因。结论 联合应用直接核酸测序法及多态性遗传连锁分析可以对特殊血友病A家系进行基因诊断。     

Beckman Coulter LH750血液分析仪复检规则的制定和评价

目的制定和评价本院Beckman Coulter LH750血液分析仪复检规则。方法上海瑞金医院门诊与病房标本共1000份乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝的全血标本对复检规则草案进行评估，另选取2007年8月至2007年9月经血常规审核软件DM2审核的门诊、病房20695份标本结果对复检规则进行评价。结果通过检测1000份标本，其2．2％的假阴性低于国际血液学复检专家组制定5％的最大允许范围。其假阴性主要集中于有核红细胞、红细胞形态和血小板形态3个项目。经对20695份标本结果进行分析，本室复检规则自动确认占总标本的66．4％，需复检占33．6％，仪器报警分布以中晚幼粒细胞（IMM．NE2）报警为多，占44．4％，血小板聚集（PLT Clumps）其次，占16．9％，细胞计数超出审核范围共5943项，以血小板计数为多（28．4％），其中首次结果超出审核范围的以白细胞（29．9％）、血小板（31．6％）居多，与历次前后差异结果相比较（8-check）未通过审核的共1148例，以血小板计数居多。结论目前，复检规则的制定和执行越来越受到重视，可以提高血常规检验质量，减少差错，我院采用白细胞分类百分比作为衡量指标，相对“41条复检规则”中的白细胞分类规则，我院的分类采用的百分比作为衡量指标要求更为严格，减少了其假阴性的发生率。加大血小板复查量，可有效地发现假性血小板聚集，提高了我院的报告质量。关于历史结果我院因门诊患者一般1至2周复诊，故将历史结果比较定在2周。允许范围初步订在20％，但仍需对此进行进一步的探讨。     

POCT的发展及临床应用

POCT(point of care testing，POCT)作为临床检验领域新出现的一种检验手段，正日益受到人们的重视，POCT是指在患者医疗现场对任何医疗措施所需进行的检验；不在中央实验室，而在患者身边进行的检验，其结果同样可信。由此可见POCT具有快捷、灵敏、不受场地条件等限制．在诊断、治疗及判断预后中起着越来越大的作用。     

遗传性疾病基因诊断技术及进展

人类基因组计划（ＨＧＰ）的工作框架图已经完成，不久将完成全部图谱。结构基因组学研究目标的顺利进行标志着以揭示基因组功能及调控机制为目标的功能组学和以揭示人类基因与疾病的关联的疾病基因组学的研究已成为ＨＧＰ的新一轮计划。使已知的基因序列用于疾病的诊断和治疗是目前国内外许多实验室正在努力探索的课题，疾病的基因诊断有可能发展成２１世纪临床医学的一个重要分支。