医学检验专业实践教学形成性评价体系的构建

目的　根据医学检验技术专业实践教学特点,建立一套合理有效的形成性评价体系用于评估实践教学效果,提升教学质量与水平。方法　采用调查研究方法,对本专业实践教学中形成性评价体系所需的要素进行筛选,以构建形成性评价体系的框架及评估指标;2016级学生进行实施形成性评价前后的效果评分,结果使用SPSS 20.0进行配对t检验。结果　统计了本专业共30名教师及专家和121名学生的调查结果,针对本专业的实践特点,构建了该评价体系,包含一级指标2个、二级指标5个以及相应的三级和四级指标;经统计学分析,实施形成性评价后学生学习兴趣、实践能力、自学能力、团队协助能力和知识拓展能力提升差异均有统计学意义（P<0.01~P<0.05）,学生上课积极性增加（P<0.05）。结论　证明构建的形成性评价体系符合医学检验专业实践教学特点,有助于提升实践教学效果,为其应用于本专业课程实践教学奠定了基础。     

SARS冠状病毒受体结合域在大肠杆菌中的融合表达和鉴定

目的为了研究SARS冠状病毒感染与免疫和跨种属传播机制,从来源于人和果子狸的SARS冠状病毒spike蛋白基因中,克隆病毒受体结合域（receptor binding domain,RBD）基因片段,在大肠杆菌中进行表达。方法用PCR方法扩增RBD基因,先经T-A连接,转化大肠杆菌DH5α,挑选阳性克隆测序鉴定,双酶切后进一步亚克隆至质粒pGEX-6p-3,构建原核表达重组质粒,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21中表达,并用SDS-PAGE和Western-blotting方法检测表达情况。结果扩增了RBD的编码基因并成功构建了其原核表达载体pGEX-6p-3-hsRBD和pGEX-6p-3-csRBD,RBD能够在大肠杆菌中获得良好的表达,表达的融合蛋白相对分子质量约为47000。结论本工作利用基因工程技术表达了两物种来源的SARS冠状病毒的RBD,两者具有高度的同源性,因此我们可通过配基受体结合实验,为进一步研究SARS冠状病毒感染与免疫及跨种属传播机制奠定了基础。     

梅毒螺旋体TP0772蛋白的原核表达和免疫反应性鉴定

目的 利用原核基因工程技术克隆表达梅毒螺旋体TP0772基因,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用.方法 PCR扩增获得TP0772基因,构建pET-28b-TP0772重组质粒,转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导蛋白质表达,经镍柱纯化后通过质谱技术鉴定.采用免疫印迹法测定其与梅毒患者血清的免疫反应性.建立基于重组TP0772抗原的ELISA间接法并对30份TPPA阳性血清和25份TPP阴性血清进行方法学评价.结果 PCR扩增获得约850 bp的基因片段,成功构建原核表达载体pET-28b-TP0772.目的蛋白分子量约为32kDa,以包涵体的表达形式存在,约占菌体总蛋白的30%.经质谱技术和免疫印迹分析证实重组蛋白为TP0772蛋白,并能够与梅毒患者血清发生特异性结合反应.ELISA测定TPPA阳性血清和阴性血清的符合率分别为93%（28/30）和96%（24/25）.结论 通过DNA重组技术成功获得了重组TP0772蛋白,其与梅毒阳性血清具有良好的免疫反应性,为优化梅毒的血清学诊断方法奠定基础.     

抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿性关节炎诊断中的临床价值研究

目的探讨定量检测抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)对类风湿性关节炎(RA)诊疗的应用价值。方法分别检测41例RA患者及85例非RA患者的anti-CCP及类风湿因子(RF)含量,其中anti-CCP采用微粒子酶免分析法(MEIA)检测,RF采用免疫散射比浊法检测。结果 anti-CCP诊断RA的特异度和敏感度分别为94.1%、65.9%,RF诊断RA的特异度和敏感度分别为82.3%、85.4%。二者在特异度和敏感度方面差异均有统计学意义(χ2值分别为5.67、4.23,P<0.05)。结论 anti-CCP相对于RF指标敏感度稍低而特异度较高,建议联合检测anti-CCP和RF,提高诊断RA的敏感性和特异性。     

EBV-LMP1 cDNA的克隆测序与原核表达质粒构建

目的：克隆EBV－LMP1 cDNA，构建EBV－LMP1基因的原核表达重组质粒。方法：通过RT－PCR技术从B95－8细胞中扩增EBV－LMP1 cDNA，克隆至pGEM-T easy载体上并测序；利用引物上的BamH I与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET-32a，转化JM109菌。提取质粒，限制性内切酶消化，琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果：扩增的LMP1 cDNA长度为1158bp，测序结果与已知序列吻合，重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子。结论：成功克隆了EBV－LMP1 cDNA，并构建了pET-32a-LMP1原核表达载体，为研究LMP1在EBV致瘤中的作用及肿瘤疫苗奠定了基础。     

直接测定红细胞平均血红蛋白含量在贫血诊断中的应用

目的探讨直接测定红细胞平均血红蛋白含量(celluarHb,CHb)在贫血诊断中的意义。方法通过全自动血液分析仪检测健康人群及不同类型贫血患者的CHb,并进行ROC曲线分析。结果CHb的正常参考范围是27.74～31.21pg;除了正常细胞均一性贫血患者的CHb与健康人群无显著性差异(P>0.05)外,下述四类贫血患者的CHb与健康人群均有极显著性差异(P<0.01):在大细胞均一性贫血诊断时,若以CHb>31.2pg为分界值,其敏感度0.94、特异性0.99、诊断效率0.97;在大细胞不均一性贫血诊断时,以CHb>31.2pg为分界值,其敏感度1.00、特异性0.99、诊断效率0.99;在诊断正常细胞不均一性贫血时,以CHb<29.4pg为分界值:敏感度0.62、特异性0.54、诊断效率0.57;在诊断小细胞性贫血时,以CHb<27.2pg为分界值,诊断敏感度1.00、特异性1.00、诊断效率1.00。结论直接测定能真实反映机体红细胞血红蛋白含量,结合合适的分界值,在各种贫血的诊断与鉴别诊断中,尤其是小细胞性贫血,CHb是一项理想的诊断指标,值得进一步推广应用。     

泌尿系结石患者尿NAG活性的变化及其临床意义

目的　探讨尿NAG活性测定用于监测泌尿系结石患者肾功能早期损伤及其临床意义。方法 :检测6 8例泌尿系结石患者的血、尿N 乙酰 β D氨基葡萄糖苷酶 (NAG)活性及尿 β2 MG ,血BUN、Cr等项目 ,并与 5 0例正常人群进行比较分析。结果　泌尿系结石患者尿NAG活性 (39 80± 2 0 2 8U/ gCr)、Β2 MG水平 (5 4 6± 313μg/L) ,明显高于健康对照组 (P <0 0 1) ,且两者呈显著正相关 (r =0 6 0 33,P <0 0 1)。血NAG活性与对照组比较基本无变化 (P >0 0 5 ) ,BUN、Cr无异常。患者中合并肾积水 12例 ,其尿NAG及 β1 MG含量全部大幅度升高 ,跟未伴肾积水组比较有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　泌尿系结石患者肾功能部分受损伤 ,血NAG及BUN、Cr不能反映患者早期肾功能损伤 ,考虑方法学等因素和尿NAG活性是一种较为理想的肾功能早期损伤监测指标     

甲状腺乳头状癌的彩色超声影像特征

目的：探讨甲状腺乳头状癌的彩色超声影像学特征及其与病理学基础的相关性。方法回顾性分析我院2014年1月至2015年5月45例经手术切除或细针穿刺后病理明确诊断的甲状腺乳头状癌患者的资料,分析其超声影像学表现与病理学基础的相关性。结果45例甲状腺乳头状癌患者共50个结节超声诊断阳性率为96%（48／50),46例(92％)表现为低回声结节,26例（52%）表现为边界不清,31例(62％)表现为回声不均匀,20例(40％)表现为无晕环,13例（26%）表现为晕环不完整或不规则,36例（72%）表现为纵横比>1,26例（52%）病变内部可发现斑点状或条状钙化,30例（60%）表现为内部血流丰富或周边条状血流,3例（6%）可探及周围异常肿大淋巴结。结论超声对甲状腺乳头状癌具有一定诊断价值。     

SARS冠状病毒S蛋白受体结合域的克隆测序

目的 从来源于人和果子狸的SARS冠状病毒S蛋白基因中,获得受体结合域(RBD)基因的克隆.方法 用PCR方法扩增RBD基因,将其克隆到pGEM-T Easy载体,转化后挑取阳性克隆进行酶切和测序鉴定,并分析RBD基因序列.结果 获得了人和果子狸来源的RBD的基因片段,长度为579 bp,两者具有高度的同源性.结果 RBD是SARS冠状病毒与靶细胞结合的部位,本工作成功克隆了SARS冠状病毒的RBD基因,为该基因的表达和功能研究奠定了基础.     

SARS冠状病毒spike蛋白上的CoV的受体结合域的研究进展

严重急性呼吸综合征(SARS)是由一种新发现的动物源性SARS冠状病毒(SARS coronavirus)引起,具有高致病性、高传染性和高病死率的新型人类疾病.现已鉴定SARS-CoV的刺突糖蛋白上的受体结合域(RBD)介导了病毒与靶细胞的相互作用,在跨种属传播起了十分重要的作用.现综述RBD的组成、功能和应用等方面的研究进展.