热盐水致大鼠萎缩性胃炎胃粘膜组织细胞增殖与凋亡的实验研究

目的　研究热盐水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎胃粘膜组织中的凋亡细胞及增殖细胞表达状态 ,以探讨长期热咸饮食与慢性萎缩性胃炎发生的关系。方法　采用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)技术及免疫组织化学染色技术。细胞凋亡时DNA含量分析采用流式细胞检测技术。结果　①TUNEL检测细胞凋亡显示 :在热盐水所致的大鼠萎缩性胃炎中凋亡细胞数明显增多 ,在粘膜全层均可见到 ,呈弥漫性分布。萎缩性胃炎中凋亡细胞指数显著高于正常大鼠胃粘膜 (P <0 .0 5) ;②免疫组化法检测显示 :增殖细胞核抗原 (PCNA)在热盐水灌胃所致的萎缩性胃炎中的表达率显著高于正常胃粘膜 (P <0 .0 5) ;③流式细胞检测显示 :萎缩性胃炎时 ,在G0 /G1峰前可见一个亚G0 /G1峰 ,也即凋亡细胞峰出现 ,而在正常胃粘膜时未显示亚G0 /G1峰。结论　热盐水灌胃可导致大鼠胃粘膜组织细胞增殖和细胞凋亡异常 ,其在热盐水所致的大鼠萎缩性胃炎发生中起重要作用。     

热盐水所致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜组织细胞p53和ras表达的实验研究

慢性萎缩性胃炎属于癌前状态 ,它是胃癌发生的重要环节。我们以人类饮食中不可缺少的两大因素———食物的热度与咸度 ,创建了快速建立慢性萎缩性胃炎动物模型的方法 ,并从分子水平探索从正常胃黏膜到萎缩性胃炎到胃癌的演变过程。一、材料与方法1.实验动物和主要试剂 :10 0只 7周龄的雄性SD大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0g ,由第四军医大学实验动物中心提供。SABC即用型试剂盒 ,p5 3和ras一抗 ,生物素化的二抗均购自武汉博士德公司。余化学试剂均购自第四军医大学。2 .大鼠萎缩性胃炎模型的制作 :采用 5 5℃、15 %的盐水连续灌胃 12周 ,制成…     

高渗盐水致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜扫描电镜观察

目的 研究高渗盐水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎（CAG）胃黏膜组织病理变化及细胞超微结构变化，探讨长期成饮食与慢性萎缩性胃炎发生的关系。方法用盐水灌胃（25qc 15％盐水灌胃，1次／d，2．5mE／次）建立大鼠萎缩性胃炎动物模型。选取大鼠腺胃胃窦组织进行病理组织学检查，以扫描电镜观察胃黏膜上皮细胞超微结构的变化。结果光镜下见高渗盐水灌胃后第24周，大鼠胃黏膜出现腺体明显缩小，黏膜肌层的平滑肌呈束状增生插入黏膜固有层中。腺体上1／3至2／3腺上皮萎缩，腺管腔增宽，胃小凹颈部黏膜宽度变窄。扫描电镜见正常组大鼠胃黏膜被纵横交错的小沟分隔成许多胃小区，呈网状，胃小凹（胃腺开口）壁衬有圆形或椭圆形上皮细胞，体积基本一致，有短而稀的微绒毛。上皮细胞排列规则，被覆一薄层连续的粘液：盐水组大鼠在24周时胃黏膜表面扁平，腺细胞表面粗糙，腺腔间黏膜变宽；并见局限性黏膜剥脱，剥脱后的黏膜腺体萎缩，腺腔增大；到32周时，见胃黏膜上皮细胞萎缩、腺腔直径增大、细胞表面破渍，出现大小不等、形状不规则的糜烂面并见纤维性渗出。结论盐水灌胃可引起胃黏膜组织细胞损害，长期过成刺激可损伤胃黏膜诱发黏膜萎缩。     

免疫荧光及激光共聚焦检测萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织细胞Bcl-2及cox-2蛋白表达

目的:采用免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术,检测热水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎后胃黏膜组织细胞Bcl-2及cox-2蛋白的表达。方法:实验于2004-09/2005-07在西安市中心医院动物中心及解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心完成。①选取7周龄健康、性成熟的雄性SD大鼠48只,随机数字表法分为正常对照组、萎缩性胃炎组,24只/组。②萎缩性胃炎组大鼠采用55℃热水灌胃建立萎缩性胃炎模型,2.5mL/次,1次/d,共90d。正常对照组不造模,给予等量25℃白开水灌胃。③两组分别于造模4,8,12,24,32,65周各取4只大鼠,按身体质量与给药容积比值为0.5%腹腔注射戊巴比妥麻醉,取大鼠胃窦组织制备切片。采用激光共聚焦免疫荧光双标方法检测胃黏膜组织Bcl-2和cox-2蛋白表达的情况。结果:48只SD大鼠全部进入结果分析。造模后两组大鼠胃黏膜组织cox-2和Bcl-2蛋白表达的检测结果:①正常对照组:在造模后各时相点胃黏膜组织细胞均未见cox-2和Bcl-2阳性表达。②萎缩性胃炎组:激光共聚焦显微镜观察显示,造模第24周细胞浆中可见cox-2和Bcl-2表达,呈均质颗粒状,到第32,65周时表达更加明显;免疫荧光双标记中造模第24,65周均可见cox-2和Bcl-2共同表达。结论:胃黏膜出现萎缩后Bcl-2及cox-2表达增加,免疫荧光与激光扫描共聚焦显微检测技术具有分辨率高、灵敏度高等特点,为细胞和组织内部超微结构的分析提供了良好的技术平台。     

盐水致大鼠萎缩性胃炎胃粘膜组织细胞中HSP60及ras蛋白的表达

目的研究盐水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎（CAG）胃黏膜组织细胞HSP60及Tag表达状态，以探讨长期高盐饮食与慢性萎缩性胃炎发生的关系。方法采用盐水灌胃建立大鼠萎缩性胃炎动物模型，选取大鼠腺胃胃窦组织行激光扫描共聚焦显微镜标本制备并对组织细胞结构的变化进行动态观察。结果正常组胃粘膜组织细胞未见阳性表达，盐水组在第24周，在细胞浆中可见HSP60及ras表达，呈均质颗粒状，到32周及65周时表达更加明显。双标记中可见HSP60和Tag共同表达。结论盐水长期灌胃可导致胃粘膜出现萎缩，在此过程中，HSP60和瑙蛋白参与了重要的调节过程。     

实验性萎缩性胃炎大鼠细胞因子IL-6,IL-8的变化及意义

目的探讨热水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎形成过程中血清IL-6,IL-8含量的动态变化及意义。方法将实验动物按随机化原则分成3组,即正常喂养组、正常对照组和热水组。正常喂养组为正常喂养,自由饮25℃白开水;正常对照组为25℃白开水灌胃,每次2.5ml,1次/d;热水组为55℃水灌胃,每次2.5ml,1次/d。各组分别于4周、8周、12周、24周、32周各随机取4只,观察胃黏膜萎缩情况,并同时抽血分离血清,用ELISA方法检测血清IL-6,IL-8含量。结果热水组灌胃至24周时出现大鼠胃黏膜层变薄,固有层腺体减少,固有层纤维结缔组织增生,黏膜肌层明显增生,慢性炎细胞浸润等萎缩性胃炎表现,随着热水灌胃时间的延长,32周胃黏膜萎缩程度明显加重。正常喂养组和正常对照组大鼠各时间点血清IL-6,IL-8含量基本相同;热水组大鼠血清IL-6,IL-8含量在4周就明显升高,8周,12周时IL-6、IL-8含量仍保持在较高水平,与正常对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;24周萎缩性胃炎形成后,其含量与正常对照组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在热水刺激形成萎缩性胃炎的过程中,IL-6和IL-8的升高可能是热水损伤胃黏膜的主要机制之一,在萎缩性胃炎形成过程中起重要的先导作用。     

恶性疟疾11例分析

随着改革开放和经济发展,国内国际交往活动日益增多,人员流动变得极为频繁.加之受全球气候逐渐变暖的影响,近年来恶性疟疾的发病在我国北方屡见不鲜.本文11例恶性疟疾均为末稍血经显微镜检查确认为恶性疟原虫感染.其中多数病历有明确的疫区生活史,或者与疫区来的带疟原虫患者有一起生活史,这就提醒广大医务工作者,对来自疫区的反复发热、头疼、关节痛的病人应疑为本病,给予鉴别诊断.     

热水致大鼠慢性萎缩性胃炎胃黏膜组织细胞HSP-70及Fas蛋白表达

目的:研究热水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎(CAG)时胃黏膜组织细胞HSP-70及Fas表达状态,以探讨CAG发病机制及长期热饮食与慢性萎缩性胃炎发生的关系.方法:采用热水(55℃,2.5mL,1次/d×8-65wk)灌胃建立大鼠萎缩性胃炎动物模型,免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术检测热水组和正常组大鼠胃黏膜组织细胞HSP-70和Fas蛋白的表达情况.结果:正常组胃黏膜组织细胞未见HSP-70及Fas阳性表达,热水组在24wk胃黏膜在组织细胞的细胞质中可见HSP和Fas阳性表达,呈均质颗粒状,到32-65wk时表达更加明显.双标记中可见两者共同表达.结论:热水长期灌胃可导致胃黏膜萎缩,黏膜组织细胞的HSP及Fas表达增加.