马利兰和环磷酰胺预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征

目的:评估以马利兰和环磷酰胺(Bu-CY2)为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法:对6例MDS患者进行非亲缘异基因骨髓移植术,以Bu-CY2为预处理方案,Bu 4 m g.k-g 1.d-1,-7 d~-4 d,CY 60 m g.k-g 1.-d 1,-3 d~-2 d。输入单个核细胞数(MNC)为3.38×108/kg(2.4×108/kg~4.6×108/kg),CD 34+细胞数5.81×106/kg(1.2×106/kg~8.5×106/kg),粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)数2.88×105/kg(1.61×105/kg~4.56×105/kg)。以霉酚酸酯加环孢素A(C sA)和短程氨甲蝶呤(MTX)预防移植物抗宿主病,前列腺素E1脂质微球预防肝静脉阻塞病。结果:6例患者中性粒细胞≥0.5×109/L的中位时间为18 d(13~21 d),血小板≥20×109/L的中位时间为21 d(13~24 d)。经DNA短串联重复序列多态性分析和染色体检查,均为供者骨髓植活。早期死亡率为0,移植后随访时间为27个月(6~60个月)。目前实际无病生存6例,缓解期实际生存率100%。结论:以Bu-CY2为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植是治疗MDS的有效方法。     

移植前使用α干扰素对慢性粒细胞白血病患者非亲缘异基因骨髓移植预后的影响

目的 了解α干扰素（IFN—α）在移植前使用对慢性粒细胞白血病（CML）患者非亲缘异基因骨髓移植（URD—BMT）预后的影响。方法 分析总结行URD—BMT的CML第1次慢性期（CP1）患者53例，其中BMT前未用IFN—α治疗组23例，用IFN—α治疗组30例；其中疗程≤12个月22例，〉12个月8例。采用单因素分析和Cox比例风险模型分析移植前使用IFN—α对CML患者URD—BMT后植入效果、急性移植物抗宿主病（GVHD）发生及患者5年存活率的影响。结果 经Cox模型多元回归分析，患者年龄、性别、确诊至URD—BMT的时间、停IFN—α距URD—BMT时间对生存率无影响；各组的总生存率、无病生存率、非复发死亡率、植活率、复发率、植入失败率、急性GVHD和慢性GVHD发生率差异均无统计学意义均（P〉0．05）。结论 本文资料所列条件下，移植前使用IFN—α不会对URD—BMT产生不利影响。     

抗CD25单克隆抗体治疗异基因造血干细胞移植后激素耐药的IV度急性移植物抗宿主病

急性移植物抗宿主病(aGVHD)是异基因造血干细胞移植后常见并发症。在人类白细胞抗原(HLA)全相合的非亲缘异基因骨髓移植中Ⅱ～Ⅳ度aGVHD的发生率为78%,Ⅲ～Ⅳ度aGVHD的发生率为36%犤1犦。尽管多种免疫抑制剂如环孢霉素A(CsA)、霉酚酸酯(MMF)、甲氨蝶呤(MTX)、糖皮质激素、他克莫司(FK506)等已用于防治aGVHD,仍有一部分aGVHD不能控制,尤其是甲基强的松龙日剂量大于2mg?kg仍无法获得临床缓解者大多预后不良。本中心共进行异基因造血干细胞移植术180例,其中8例发生糖皮质激素耐药的Ⅳ度aGVHD,予以人源化抗CD25(白介素2受体α链…     

沙立度胺治疗慢性移植物抗宿主病诱发深静脉血栓1例报道

患者男性,33岁.2002年3月诊断为"急性淋巴细胞白血病(L2型)",于2004年4月23日行非亲缘异基因外周血造血干细胞移植术,供、受者间HLA基因型完全相合.     

异基因外周血干细胞移植术后中毒性表皮松解症临床分析

目的总结异基因造血干细胞移植后中毒性表皮松解症(TEN)诊治经验。方法分析3例表现为TEN的造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)。结果3例TEN均发生于外周血干细胞移植后,表现为皮肤水疱及表皮松解,合并高热、肠炎或肝损害,经给予有效的免疫抑制剂,联合营养支持及相应护理措施,皮损均消退。结论TEN是皮肤GVHD最严重的类型,需采用针对aGVHD的免疫抑制为主的综合治疗。     

人端粒结合因子在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位与周期性表达的研究

目的:研究人端粒结合因子1(telomere repeat binding factor 1,TRF1)在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位以及在细胞周期中的表达.方法:应用分子克隆技术扩增TRF1基因全长(TRF1FL)和N、C端缺失突变体(TRF1ΔNC)序列,并克隆入pEGFP-C2真核表达载体,表达绿色荧光(GFP)融合蛋白;将含目的基因质粒转染端粒酶阳性Hela细胞和端粒酶阴性WI38-2RA细胞,Western Blot验证目的蛋白分子量,荧光显微镜观察TRF1在间期细胞和染色体的定位;利用药物阻断HeLa细胞于不同周期,流式细胞仪检测细胞周期,半定量Western Blot检测TRF1在不同细胞周期中的表达.结果:TRF1FL、TRF1ΔNC序列长度分别为1.3 kb和0.9 kb;GFP融合TRF1FL、TRF1ΔNC分子量大小分别为80 kD和60 kD.TRF1FL在间期细胞胞核内呈点状表达,在染色体则表达于染色体未端,TRF1ΔNC在细胞核内呈弥散性表达;TRF1在端粒酶阴性细胞中与早幼粒细胞白血病小体(promyelocytic leukemia body,PML)共定位,在端粒阳性细胞中则没有共定位.TRF1在HeLa细胞中以M期表达量最高,G1/S表达最低,M期表达量是G1/S期的3.9倍(t=12.92,P<0.01).结论:TRF1在端粒酶阳性和阴性细胞中有不同的定位模式,在HeLa细胞中TRF1呈周期性表达.     

Pin1在恶性血液病细胞和细胞周期中的表达

目的:研究Pin1(肽酰脯胺酰顺反式易构酶)在髓系、淋系10种恶性血液病细胞株中的表达情况以及其与不同细胞周期的关系.方法:利用Realtime-PCR检测血液病细胞株的Pin1表达,同时用Thymidine和Nocodazole将细胞阻断在不同的细胞周期,用Realtime-PCR及Western Blot的方法,检测Pin1的mRNA和蛋白的表达水平.结果:Pin1在恶性血液病细胞株中mRNA的表达明显高于正常人骨髓单个核细胞的表达(F=10.508,P＜0.01),其在髓系血液病细胞株和淋系恶性血液病细胞株中的表达均较正常人骨髓单个核细胞明显增高(分别为F=13.584,P＜0.01;F=5.339,P＜0.05).Pin1在G1期mRNA的表达水平显著高于S期(F=40.572,P＜0.05),S期与M期比较没有明显差异(F=8.309,P＞0.05).但在蛋白水平上来看Pin1的变化不明显.结论:Pin1的mRNA在恶性血液病细胞中呈高表达,其表达水平与细胞周期有关,其中以G1期为最高,S期最低.     

端粒重复序列结合因子在肾脏肿瘤中的表达水平

目的:研究TRF1蛋白在肾脏恶性肿瘤及相应癌旁组织中的表达水平.方法:定量分析肾组织中TRF1蛋白的表达水平,应用经倍比稀释的TRF133-277纯化蛋白作为定量标准,建立了以抗TRF133-277单抗作定量Wes-tern-blot的方法,并以该方法检测TRF1蛋白在组织中的表达水平.结果:32例肾肿瘤样本均不同程度的表达TRF1蛋白质,均值为2.428±1.352 μg/μl,癌旁自身对照组织TRF1的表达水平为3.611±1.922 μg/μl(t=5.776,P<0.001).肿瘤组织内TRF133-277表达水平较相应癌旁组织显著降低,并与肿瘤的恶性程度相关,差异具有显著性意义(P<0.01).结论:TRF1蛋白在肾脏恶性肿瘤中的表达明显减低,并与肿瘤恶性程度呈负相关.     

无关供者异基因造血干细胞移植中急性移植物抗宿主病与肿瘤坏死因子基因多态性的关系

目的 探讨无关供者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者及其干细胞供者的肿瘤坏死因子(TNF)单核苷酸多态性(SNP)与急性移植物抗宿主病(aGVHD)之间的关系.方法 回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院移植中心接受无关供者allo-HSCT患者及其供者,共76对,采用多重单碱基延伸SNP分型技术检测TNF基因5个位点的SNP(TNFα-238、TNFα-857、TNFα-863、TNFα-1031、TNFβ+252),分析与aGVHD的发生风险、临床严重程度之间的关系.结果 在23例发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD患者中,其干细胞供者基因型TNFα-857 CC的频率(91.3%)高于基因型CT(8.7%)(P=0.039);TNFβ+252(A/G)位点未检出从基因型,19例患者为GA基因型(82.6%),4例患者为GG基因型(17.4%),3组之间比较差异有统计学意义(P=0.006).而患者与干细胞供者TNFα-238(G/A)、TNFα-863(C/A)和TNFα-1031(T/C)位点的基因多态性均未发现与aGVHD的发生风险相关.结论 干细胞供者TNFα-857 CC基因型与Ⅱ～Ⅳ度aGVHD的发生密切相关,而TNFβ+252为AA基因型的患者不易发生Ⅱ～Ⅳ度aGVHD.