不同构建策略对D-氨基酸氧化酶表达的影响及发酵调节

目的 构建不含编码β-内酰胺酶编码基因的D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)工程菌,对不同构建策略构建的重组菌进行发酵调节研究.方法 采用分子生物学手段,利用不同的策略、不同的毕赤酵母宿主菌,构建DAAO工程菌;利用微生物发酵和调节手段,对工程菌的发酵条件进行优化.结果 获得了表型不同的3株重组菌(Muts的PDK13和PDGA10,Mut 的PDG27),它们的最佳生长条件基本相似,诱导表达条件却不相同,在Basal salts培养基内,当生长时间为36 h,诱导培养基起始pH为6.0、甲醇浓度为0.5%时,最有利于DAAO表达.在菌体密度相同的条件下,Mut 表型(PDG27)甲醇代谢快,诱导24 h,DAAO活力达到最高;Muts型(PDK13和PDGA10)甲醇代谢慢,诱导36 h,DAAO活力达最高;通气量一定时,菌体密度增加,DAAO表达量增加,菌体增加到一定程度表达量反而下降,表明通气量应随菌体密度的增大而增加.结论 Muts型重组菌对通气量要求低且更有利于高密度发酵.     

内热针治疗慢性非特异性颈痛的超声弹性成像研究北大核心CSCD

目的探讨内热针治疗慢性非特异性颈痛的临床疗效。方法 2017年10月至2018年3月,60例慢性非特异性颈痛(NCNP)患者随机分为内热针组(n=30)和热磁组(n=30)。内热针组予内热针治疗,热磁组予热磁治疗。治疗前、治疗后1周、治疗后1个月,超声弹性成像测定两组双侧斜方肌、头夹肌、头半棘肌、颈半棘肌和多裂肌应变率比值(SR),记录疼痛视觉模拟评分(VAS)和颈椎功能障碍指数(NDI)。结果治疗后1周和1个月,两组VAS和NDI均下降(t>2.693, P<0.05);内热针组VAS和NDI显著低于热磁组(F>8.048, P<0.001);治疗后1周和1个月,内热针组各肌肉SR明显下降(F>6.22, P<0.01),热磁组仅右侧头半棘肌SR下降(F=4.35, P<0.05)。结论内热针治疗可提高NCNP患者颈部肌肉弹性,缓解疼痛,改善颈椎功能。     

内热针联合康复手法治疗创伤性膝关节僵直的观察

目的 探讨内热针联合Maitland手法对创伤性膝关节僵直的治疗效果。方法 收集2022年5月至2023年3月就诊于宁夏医科大学总医院康复科、骨科门诊及在院康复患者68例,采用随机数表法分成观察组（n=34例）和对照组（n=34例）,比较两组患膝疼痛程度、运动功能及炎性因子的变化。结果 两组一般资料比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。两组治疗后美国特种外科医院膝关节（HSS）评分、膝关节活动度（ROM）评分较前提高,视觉模拟评分（VAS）和炎性因子水平均下降（P均<0.05）,且观察组均优于对照组（P均<0.05）。结论 内热针联合Maitland手法可有效改善PTKS的膝关节功能和疼痛,同时,炎性因子水平会随着疗效的改善而下降。     

内热针治疗慢性非特异性颈痛的超声弹性成像研究

目的探讨内热针治疗慢性非特异性颈痛的临床疗效。方法 2017年10月至2018年3月,60例慢性非特异性颈痛(NCNP)患者随机分为内热针组(n=30)和热磁组(n=30)。内热针组予内热针治疗,热磁组予热磁治疗。治疗前、治疗后1周、治疗后1个月,超声弹性成像测定两组双侧斜方肌、头夹肌、头半棘肌、颈半棘肌和多裂肌应变率比值(SR),记录疼痛视觉模拟评分(VAS)和颈椎功能障碍指数(NDI)。结果治疗后1周和1个月,两组VAS和NDI均下降(t2.693, P0.05);内热针组VAS和NDI显著低于热磁组(F8.048, P0.001);治疗后1周和1个月,内热针组各肌肉SR明显下降(F6.22, P0.01),热磁组仅右侧头半棘肌SR下降(F=4.35, P0.05)。结论内热针治疗可提高NCNP患者颈部肌肉弹性,缓解疼痛,改善颈椎功能。     

内热针疗法对兔膝关节骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的观察内热针疗法对兔膝关节骨关节炎(KOA)软骨细胞凋亡的影响。方法将30只新西兰大白兔按随机数表法分为空白组(10只)、模型对照组(10只)、内热针组(10只),模型对照组与内热针组均建立KOA模型,空白组不予以建模,建模4周后,内热针组予以内热针治疗(42℃,每天20 min,每周1次)。4周后,模型对照组与内热针组进行Lequesne步态分级,处死3组新西兰大白兔,行组织形态大体观察及染色观察,并采用原位末端标记法(TUNEL法)对软骨细胞凋亡情况进行检测。结果干预4周后,空白组软骨外观无裂痕、缺损,软骨结构、潮线显示清楚;模型对照组家兔软骨结构层次不清,软骨细胞较少,软骨表面下可见明显的裂缝,裂缝周围可见坏死的软骨细胞,潮线断裂及炎性细胞浸润明显;内热针组软骨细胞层较厚,软骨细胞较多,炎性细胞浸润较少,软骨表面下潮线相对清晰。Lequesne步态分级显示,内热针组低于模型对照组,但差异无统计学意义(P 0.05)。内热针组细胞凋亡率为16.94%,明显低于模型组的34.68%,差异有统计学意义(P 0.05)。结论内热针疗法可有效抑制KOA兔软骨细胞凋亡。     

烙灸疗法通过增加软骨细胞中PI3K和mTOR的表达治疗兔膝骨性关节炎的研究

目的 探明烙灸疗法对兔膝骨性关节炎软骨细胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)和哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)的基因和蛋白质表达水平的影响。方法 将实验动物随机分为3组，空白对照组、模型对照组以及烙灸组，每组各10只。采用Hulth造模方法制备兔膝骨性关节炎模型。烙灸组在造模4周后开始干预，在膝关节局部进行烙灸疗法，每天20 min,每天1次，治疗4周；对照组不予干预。各组动物在实验的8周后处死，通过HE染色观察病例变化；采用Western-blot检测PI3K和mTOR蛋白的表达；采用RT-qPCR方法检测PI3K和mTOR mRNA的表达。结果 烙灸组膝关节软骨的Mankin的评分、软骨细胞中PI3K和mTOR的mRNA和蛋白质表达均高于模型对照组(P<0.05)。结论 烙灸疗法可以提高兔膝骨性关节炎模型中软骨细胞PI3K和mTOR的表达，抑制软骨细胞的过度凋亡，从而减少膝骨关节软骨的退变。