改进的亚硫酸氢钠测序法检测HepG2 RASSF1A基因CpG岛甲基化状态

目的 改进亚硫酸氢钠测序法，并检验改进后方法在甲基化检测中的可行性。方法 提取人肝癌细胞株HepG2基因组DNA，亚硫酸氢钠化学修饰，针对修饰后Ras相关家族1A基因（RASSF1A）启动子序列设计特异引物并结合沉降PCR扩增，T-A载体克隆、测序。结果 HepG2细胞RASSF1A基因启动子CpG岛的16个CpG位点均被甲基化。结论 改进后亚硫酸氢钠测序法能明显减少非特异性扩增，提高PCR效率，更适于基因甲基化状态的检测。     

社区儿童哮喘及过敏性疾病的环境影响因素分析

比较上海市徐汇区2013年和2020年儿童呼吸系统及过敏性疾病的发生状况,并了解其影响因素。

收集2013—2020年上海市环境空气质量监测数据并描述和比较,指标包括PM_2.5、PM₁₀、O₃、SO₂和NO₂。2013年和2020年9月对上海市徐汇区一所学校的3~5年级的学生分别开展1次横断面问卷调查,调查内容包括家庭环境、生活习惯、家族史、呼吸和过敏性疾病和症状的发生情况等。比较不同时间上海市大气污染变化情况及不同时间儿童呼吸及过敏性疾病发生情况的差异,并采用单因素分析、多因素分析方法对其影响因素进行分析。

共收到有效问卷1 398份（2013年705份,2020年693份）。2020年大气PM_2.5、PM₁₀、O₃、SO₂和NO₂的年均浓度相较2013年显著改善。徐汇区2013年支气管哮喘、支气管炎、持续咳嗽和持续咳痰的患病率和症状发生率高于2020年（均 P<0.05）。多因素分析显示,重污染年份、男生、父母有哮喘病史和过敏史、父母文化程度越高以及家中存在过敏原是支气管哮喘、支气管炎、变应性鼻炎以及特应性湿疹发生的影响因素（均P<0.05）;父母有过敏史、家人吸烟频率较高以及家中存在过敏原是持续咳嗽和持续咳痰发生的影响因素（均P<0.05）。

上海市大气污染2020年比2013年有所减轻,儿童支气管哮喘和支气管炎患病率有所下降;室内外环境、家族史、生活习惯等因素与儿童呼吸系统和过敏性疾病发生相关。

     

改进的PCR在抑癌基因启动子CpG岛甲基化检测中的应用

目的改进聚合酶链反应（PCR）,并检验改进后的方法在甲基化检测中的可行性。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7,提取基因组DNA,利用亚硫酸氢盐测序法,用常规、降落及改进PCR分别扩增,比较扩增效果,PCR产物纯化回收后,TA克隆入载体pGEM-T,转化大肠杆菌（E．coli DH5α）,筛选阳性克降,经PCR扩增鉴定后获得阳性重组质粒,测序比对。结果改进后PCR与常规、降落PCR相比,扩增效率增高,二聚体及非特异性扩增减少;测序结果显示,MCF-7细胞基因组DNA中,RASSFIA基因启动子CpG岛是高甲基化的,E-cadherin基因启动子CpG岛末呈现高甲基化状态。结论改进后方法提高了以PCR为基础的甲基化分析的可行性,更适用于基因甲基化状态的检测,并为扩增富含CG的基因启动子区域提供参考。     

针刺加穴位注射治疗顽固性呃逆92例

目的：观察针刺加穴位注射治疗顽固性呃逆忠者的疗效。方法：内关、天突、膻中等穴常规针刺后，取盐酸异丙嗪注射液1ml～2ml在内关穴位注射。结果：总有效率95．7％。提示：本法通过药物和穴位的双重作用，抑制了中枢系统的异常兴奋，缓解了膈肌痉挛，从而巩固并提高了治疗效果。     

成人前牙错（牙/合）的金属烤瓷冠美容修复41例

1 材料与方法 1.1 临床资料选择有随诊条件的患者41例168颗牙进行登记和不同分类的设计,其中男性13例,女性28例,年龄19～25岁.其中前牙散在间隙8例,前牙扭转11例,前牙错位14例,前牙反牙合5例(其中6例伴重度四环素牙,3例伴氟斑牙,3例伴釉质发育不全).     

冬柏通淋颗粒质量控制研究

目的建立冬柏通淋颗粒(黄柏、忍冬藤、萹蓄)的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对该复方颗粒中黄柏、忍冬藤、萹蓄进行定性鉴别,同时采用高效液相色谱法测定小檗碱和绿原酸两种主成分的含量。结果 TLC鉴别分离度良好,专属性强,阴性样品无干扰;小檗碱对照品在0.108~2.16μg(r=0.999 5)范围内线性关系良好,加样回收率均值为101.61%,RSD为2.53%;绿原酸对照品在0.114~2.28μg(r=0.999 6)范围内线性关系良好,加样回收率均值为99.91%,RSD为2.32%。结论该方法操作简便易行,专属性强,准确可靠,可用于冬柏通淋颗粒的质量控制。     

上海市某郊区学校儿童肺功能测定结果分析

[目的]了解上海市某郊区学校儿童的肺功能基本情况. [方法]对上海市某郊区小学的3～5年级学生进行肺功能检查. [结果]男女生肺功能主要指标如用力肺活量(FVC)、一秒钟用力肺活量(FEV1.0)、峰值呼气流速(PEF)、用力呼气中段流速(FEF2575)、用力呼出25％肺活量的呼吸流速(FEF25％)、用力呼出50％肺活量的呼吸流速(FEF50％)、用力呼出75％肺活量的呼吸流速(FEF75％)等与身高、体重和年龄均呈密切正相关,且与身高的关系最为密切;男生FVC、FEV1.0、PEF、FEF25％高于女生;有17.9％者显示肺通气功能受损,另有6.6％者可能发生早期小气道病变.[结论]肺功能测定是儿童呼吸系统的重要检测手段;儿童肺功能检测中,小气道指标对肺功能早期改变的意义尤其重要.     

基于“以痛为腧”关刺法治疗腰三横突综合征疗效观察

目的观察以痛为腧关刺法治疗第三腰椎横突综合征的临床疗效。方法将65例第三腰椎横突综合征患者采用以痛为腧关刺法治疗,隔日1次,每周治疗3次,10次为一个疗程,治疗期间配合腰背肌功能锻炼,治疗周期为一个疗程,采用中医病证诊断疗效标准、视觉模拟疼痛量表(VAS)和改良下腰痛评分量表(JOA)评价其临床疗效。结果治愈21例,好转36例,无效8例,总有效率87. 69%。治疗前与治疗后视觉模拟疼痛量表(VAS)和改良下腰痛评分量表(JOA)评价显示,差异均具有统计学意义(P 0. 01)。结论基于以痛为腧关刺法治疗第三腰椎横突综合征疗效优良,安全性好,值得临床推广。     

上海市大气污染对小学生肺功能小气道指标的急性效应研究

目的 分析上海市复合型大气污染对儿童肺功能小气道指标的急性影响。方法 在上海市内环、中环和外环各选择一所小学（A、B和C）,每所学校各随机抽取3~5年级一个班级学生为研究对象（共233人）;A、B两校于2013年12月和C校于2014年12月测试肺功能3次,各校分别于次年5-6月测试第4次肺功能。同时收集同期三校就近环境空气质量监测点大气细颗粒物（PM_2.5）、可吸入颗粒物（PM₁₀）、二氧化硫（SO₂）和二氧化氮（NO₂）污染物数据和气象监测数据;采用线性混合效应模型分析大气污染对肺功能小气道指标的影响。结果 控制气象因素和个体因素后,PM_2.5、PM₁₀滞后2 d和累计滞后2 d、SO₂累计滞后2 d和NO₂检测当日浓度每增加一个四分位间距（IQR）,儿童25%肺活量最大呼吸流速（MEF_25%）、50%肺活量最大呼吸流速（MEF_50%）、75%肺活量最大呼吸流速（MEF_75%）和用力呼气中段流速（FEF_25%~75%）均有不同程度的降低（P<0.05或P<0.01）;双污染物模型分析显示SO₂和NO₂分别叠加PM_2.5和PM₁₀污染时,滞后效应值大于SO₂和NO₂单独存在时（P<0.05）。结论 上海市大气污染物短期暴露与儿童肺功能小气道指标变化呈负相关,并存在滞后效应及累计滞后效应。     

电针配合穴位注射治疗耳鸣耳聋68例

目的:比较电针配合穴位注射疗法与常规针刺疗法治疗耳鸣耳聋的疗效差异。方法:采用随机分组将68例患者分为治疗组34例,取耳门、听宫、听会等穴;对照组34例常规针刺。结果:治疗组总有效率88.2%;常规针刺组总有效率68.0%。P<0.05。结论:本方法可营养神经、减轻局部水肿、改善局部血液循环,还能持久地刺激穴位,调整气血的运行,使精气上输耳窍,与针刺配合共奏止鸣复聪之效。