紫杉醇脂质纳米粒子对KB、SKOV3细胞的抑制作用

目的:研究并分析新型紫杉醇脂质纳米粒子(paclitaxel nanoparlicle,TAX-NLC)对KB、SKOV3细胞的抑制作用,为研制新型肿瘤靶向治疗药物提供实验依据.方法:激光共聚焦显微镜动态观察TAX-NLC进入细胞的过程,半定量测定TAX-NLC在细胞内的浓度;MTT法测定TAX-NLC对KB、SKOV3细胞增殖的抑制率;锥虫蓝拒染法计数TAX-NLC作用后的活细胞数,绘制细胞生长曲线.结果:激光共聚焦显微镜动态观察发现细胞内荧光强度逐渐增加,约2 h时达到饱和,胞内外荧光强度差达20～40倍;MTT结果表明,TAX-NLC、紫杉醇(paclitaxel,TAX)对细胞的生长均有抑制作用,并且存在时间和剂量的依赖关系,用药后72 h后抑制率最高达92%;细胞生长曲线显示,TAX-NLC、TAX对SKOV3、KB细胞有明显的抑制作用,前者的作用强于后者.结论:TAX-NLC可能是通过主动转运将紫杉醇载带入细胞内,并在细胞内浓聚,对KB、SKOV3细胞的生长具有较强的抑制作用;其可能是一个有前途的新型肿瘤靶向治疗药物.     

去氢雌马酚对急性早幼粒白血病NB4细胞的增殖抑制作用及其初步机制研究

目的研究黄酮类化合物去氢雌马酚（dehydroequol）对急性早幼粒白血病NB4细胞的增殖抑制作用,并对其作用机制进行初步研究。方法应用噻唑蓝比色法及台盼蓝计数法观察去氢雌马酚及其结构类似物对不同肿瘤细胞增殖的影响,并应用细胞周期分析及细胞凋亡检测研究去氢雌马酚抑制NB4细胞增殖的机制。结果通过比较去氢雌马酚及其3个结构类似化合物对NB4细胞的增殖抑制作用。发现去氢雌马酚抗肿瘤活性最强,并且去氢雌马酚能显著抑制多种肿瘤细胞增殖,其中对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的抑制作用更显著,并能浓度与时间依赖性地抑制NB4细胞增殖,引起NB4细胞G1期阻滞并诱导细胞凋亡。结论去氢雌马酚对急性早幼粒白血病NB4细胞的增殖有很强的抑制作用,并且通过引起细胞G1期阻滞和诱导细胞凋亡而显著抑制NB4细胞的增殖。     

CTS-EDTA的合成与鉴定及其体外螯合Sr2+的研究

目的合成CTS-EDTA,并比较CTS与CTS-EDTA螯合Sr2+的能力。方法通过N-酰化反应合成CTS-EDTA,通过原子吸收光谱法比较CTS与CTS-EDTA螯合Sr2+的能力。结果红外图谱与核磁氢谱均证实成功合成了CTS-EDTA,体外实验表明CTS-EDTA螯合Sr2+的效率在10min后可达到80%以上,而CTS与Control(空白对照)无明显差异。结论N-酰化反应能合成CTS-EDTA,且CTS-EDTA螯合Sr2+的能力明显优于CTS。     

Toll样受体5激动剂CBLB502的辐射造血损伤保护作用

目的：研究CBLB502对辐射造血损伤的防护作用。方法C57BL/6J小鼠随机分为正常对照、60Co γ射线6.5Gy一次性全身照射对照和CBLB502照前30 min 0.2mg/kg皮下给药预防组,照前1 d和照后30 d定期检测外周血细胞数,照射后2和24 h取骨髓检测有核细胞数和集落形成数,竞争性移植方法观察骨髓造血细胞植入能力,流式细胞仪测定外周血中各系细胞比例。结果CBLB502能显著减轻60Co γ射线6.5 Gy照射小鼠的外周血中白细胞、红细胞及血小板数的急剧降低并加速其恢复,照后2和24 h CBLB502预防给药组小鼠骨髓各系造血祖细胞集落形成数均显著高于照射对照组（P＜0.01）,且预防给药可明显提高受照射小鼠骨髓造血细胞的植入能力。结论 CBLB502具有明显的辐射造血损伤保护作用。     

氨磷汀对急性放射病小鼠早期骨髓造血功能的防护作用

本研究旨在探究氨磷汀（WR2721,Amifosfine）对60coY射线6．5Gy单次全身照射（TBI）所致急性放射病小鼠早期骨髓造血的防护作用。60只C57／BL6J小鼠随机分成正常对照（normal）、照射对照（IR）和WR2721预防给药（WR2721）3组。观察WR-2721照射前30min给药对6．5Cy60C01射线照射小鼠照射后60d内小鼠外周血白细胞（WBC）、中性粒细胞（Neut）、血小板（Pit）和红细胞（RBC）数的影响;照射后2h和24h计数骨髓有核细胞数（BMNC）、流式细胞术分析造血干／祖细胞（LSK／LK）数量和观察多系骨髓细胞集落形成能力。结果显示,WR2721组的WBC和Neut在照射后4—18d、Pit数7—18d、RBC数10—30d均明显高于瓜组（P〈0．05）;照射后24hBMNC、LSK和LK数均明显增加（P〈0．05）;2h和24h髓系祖细胞集落形成单位（CFU—GEMM）、粒系-巨噬系集落形成单位（CFU—GM）、巨核系集落形成单位（CFU—MK）、红系暴式集落形成单位（BFU-E）和红系集落形成单位（CFU-E）集落数均明显增加（P〈0．01）。结论：WR2721能有效减轻急性放射病小鼠造血系统早期损伤,促进外周血细胞更早更快恢复。     

DiI标记微血管可视化方法的建立及其在小鼠肠型急性放射病研究中的应用

目的 建立荧光染料DiI心脏灌注标记血管的方法,用于观察小鼠小肠绒毛微血管结构在肠型急性放射病(IF-ARS)发生、发展中的变化,以期为IF-ARS的发病机制研究提供一种可行方法.方法 60Coγ线腹部局部照射C57BL/6小鼠建立肠型急性放射病动物模型;H.E染色观察照射小鼠小肠黏膜损伤;应用荧光染料DiI小鼠心脏灌注法标记血管,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察小鼠小肠绒毛微血管结构及其在照射后的变化.结果 17.5 Gy腹部局部照射的C57BL/6小鼠在照后第5天很少发现再生绒毛和隐窝,已达到肠型急性放射病的损伤程度.成功建立了DiI心脏灌注标记血管方法,在对照组可观察到完整且清晰的小鼠小肠绒毛微血管三维结构,而在照射组发现照后24 h和48 h内小肠绒毛微血管相继出现舒张、渗出的损伤改变,照后3～5d以微血管网充盈不良甚至脱落为主要表现.结论 成功建立了DiI标记的小鼠小肠绒毛微血管可视化的方法,且将其初步应用于观察小鼠小肠绒毛结构及其在肠型急性放射病发生、发展中的变化是可行的.