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1.
背景:利用基因转染技术诱导脂肪间充质干细胞成软骨细胞已有报道,但腺病毒和腺相关病毒转染脂肪间充质干细胞各有不同,且腺相关病毒载体能否转染脂肪间充质干细胞众说不一.目的:观察Ad5-增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和Raav2-EGFP转染脂肪间充质干细胞后增强型绿色荧光蛋白的表达及转染后细胞增值能力的变化.方法:脂肪组织来源于6月龄新西兰大白兔颈背部.机械消化和酶消化法分取脂肪间充质干细胞,体外培养扩增.分别采用腺病毒载体(Ad5-EGFP)和腺相关病毒载体(Raav2-EGFP)转染脂肪间充质干细胞,并观察EGFP的表达.Raav2-EGFP转染后,需加入2 Μl丁酸钠(1 mol/L).采用MTT法检测基因转染对脂肪间充质干细胞增殖能力的影响.结果与结论:体外培养的脂肪间充质干细胞呈扁平状和长梭形,细胞形态均一,传代稳定.Ad5-EGFP组和Raav2-EGFP组均能观察到较多荧光细胞,转染效率分别达到88%和83%.腺病毒和腺相关病毒载体均能转染脂肪间充质干细胞,且转染效率很高.腺相关病毒需要借助丁酸钠来提高其基因表达水平. 相似文献
2.
突出腰椎间盘组织中免疫复合物的表达及意义 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:检测突出腰椎间盘组织中是否有免疫复合物(Immune Complexes IC)的表达,以便进一步探讨突出腰椎间盘组织的致痛机制。方法:取76例不同类型突出腰椎间盘组织标本用生物素化羊抗人IgG抗体进行免疫组化染色。结果:48例脱出和游离型腰椎间盘组织标本中40例IC表达阳性(占83%),28例膨出和突出型中仅8例(占28%)表达阳性。结论:突出腰椎间盘组织中存在着IC的表达,且IC很可能是盘源性下腰痛及坐骨神经痛的重要病生基础之一。 相似文献
3.
4.
1996年Hamdi率先报告L2 椎浆细胞瘤及腺癌转移各 1例施行肿瘤切除 +假体置换术 ,但终因手术较大、病椎毗邻解剖关系复杂、彻底切除肿瘤及假体置入较困难 ,致使广泛开展受到限制。我院 1991年以来 ,行椎体肿瘤切除人工椎体置换术 4例 ,获得较好疗效 ,报告如下。1 临床资料1 1 一般资料 本组 4例 ,男 1例 ,女 3例 ,年龄 2 6~ 5 3岁。肿瘤部位 :T7椎 1例 ,T9椎 2例 ,L2 椎 1例。肿瘤病理学诊断 :骨巨细胞瘤 2例 ,单纯骨囊肿1例 ,乳腺癌L2 椎转移 1例。术前下肢不全瘫 2例 ,其余 2例无神经损害表现。手术均在全麻下施行 ,术中充分… 相似文献
5.
目的:探讨藏医结合西医治疗病毒性脑炎的临床疗效.方法:分析34例符合诊断标准的病毒性脑炎患者资料,其中治疗组16例,对照组18例,两组均采用常规的西医方法治疗,而对照组辅助使用藏医藏药方法治疗,然后对比分析两组患者临床症状恢复的时间及病情预后情况.结果:与对照组比较,治疗组体温恢复正常时间、颅高压缓解时间、意识障碍恢复正常时间、病理征消失时间均明显缩短(P<0.01);治疗组的病情预后也明显改善(P<0.05).结论:藏西医结合治疗病毒性脑炎可以明显改善临床症状及病情预后. 相似文献
6.
软骨脱细胞基质复合脂肪源性干细胞构建软骨组织的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的] 探讨软骨脱细胞基质支架材料的制备,及其体外复合脂肪源性干细胞构建软骨组织的技术方法.[方法] 成年新西兰大白兔脂肪源性干细胞获得,培养,扩增.成年新西兰大白兔新鲜软骨,低温冻干12 h,后经曲拉通、DNA、RNA酶等处理制备成为软骨脱细胞基质支架材料,终浓度为2×107/L的脂肪干细胞种植于软骨脱细胞基质中于软骨细胞方向诱导培养基中培养2周,构建软骨组织.新鲜制备的软骨脱细胞基质及构建的软骨组织分别行组织学、免疫组织化学及透射电镜检测.[结果] 实验制备的软骨脱细胞基质支架材料内无细胞结构存在,仅残留空白软骨陷窝.具有合适的孔隙率和孔径大小;复合脂肪源性干细胞后细胞向材料内部迁移,粘附,生长良好.部分载体内细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性.[结论] 软骨脱细胞基质可作为支架材料应用于软骨组织工程,复合脂肪源性干细胞培养可成功构建软骨组织. 相似文献
转化生长因子-β(TGF—β)能诱导软骨组织工程种子细胞向软骨分化,是目前基因强化软骨组织工程首选的生长因子基因。它有3种亚型:TGF—β1、TGF-β2、TGF-β3。软骨组织工程种子细胞主要有:间充质干细胞、脂肪干细胞、软骨细胞。胎盘间充质干细胞是目前新发现的具有很好潜力的种子细胞。TGF-β诱导种子细胞的方式主要有两种:一种是外源性诱导,另一种是内源性诱导。通过基因转染技术和组织工程技术相结合的内源性诱导方法能解决外源性诱导的很多缺点,是目前软骨组织工程研究的热点。多基因联合转染的内源性诱导方法能更好的促进种子细胞向软骨细胞转化。然而要将TGF-β诱导的组织工程软骨广泛应用于临床还需解决安全性、残存的免疫原性等问题. 相似文献
8.
目的制造免股骨头缺血坏死(ANFH)模型;验证PTS与ANFH的密切关系,并探讨尿激酶与阿司匹林联合预防免激素性股骨头坏死的作用。方法选用健康日本大耳白免36只,随机均分为3组。第1组为模型组:先分2次间隔2周分别按10ml/kg量静脉注射马血清,第2次注射马血清2周后,再连续肌注甲基强的松龙10mg/kg·d,共7天,之后口服强的松1.25mg/kg·d至实验完。第Ⅱ组为治疗组(马血清和激素加药物预防):按第1纽方法用马血清和激素;另外,第-个月每周2次静脉注射尿激酶8万U/kg/d,之后灌服阿司匹林5mg/kg·d至实验结束。第Ⅲ组为对照组,每日于耳缘静脉注射生理盐水2ml。分期分批取血采用放射免疫法测定内皮素(ET-1)、免疫比浊法测定抗凝血酶-Ⅲ(A-Ⅲ)和D-二聚体(D-dimer)的变化。股骨头组织取样石蜡切片作HE染色;冰冻切片Sudan染色。结果3个月时,模型组AT-Ⅲ[(61.44±5.05)mg/L]较治疗组和对照组降低;D-dimer[(0.53±0.19)μg/ml]和ET-1[(47.84±12.09)μg/L]较治疗组和对照组升高。模型组骨坏死的发生率100%,治疗组骨坏死的发生率25%,显著低于模型组。对照组未见骨坏死。结论激素性股骨头坏死的发病与高凝状态有关,联合应用尿激酶与阿司匹林能有效预防兔激素性股骨头坏死的发生。 相似文献
9.
目的探讨切开复位带线缝合锚钉内固定治疗腓骨小头撕脱骨折的临床疗效。方法利用Twin-fix带线锚钉治疗腓骨小头新鲜撕脱骨折18例,术后早期行功能锻炼,Lysholm评分法评价临床疗效。结果 12~24个月随访后未见骨折移位、关节不稳及伸屈膝关节受限,术后12个月关节功能评分与术前比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论缝合锚钉治疗腓骨小头撕脱骨折具有不破坏周围韧带肌腱,可最大程度恢复解剖结构及提供生物力学支持,早期进行功能锻炼等优点。 相似文献
10.
目的探讨软骨终板通透性对兔退变腰椎间盘Ⅱ型胶原表达的影响。方法 6月龄新西兰大白兔14只,建立退变腰椎间盘模型后饲养8周。8周后处死并手术切取腰段椎间盘每只6个,随机分为A组和B组,其中A组为对照组,B组骨蜡封闭上下软骨终板。两组兔退变椎间盘在体外进行整体器官培养。在培养前以及培养7 d和14 d时分别用Mitotracker Green荧光探针、免疫组化SP法和RT-PCR方法对椎间盘中髓核的细胞活力、Ⅱ型胶原及Ⅱ型胶原mRNA的表达情况进行评估。结果经过7 d的体外培养之后,两组的荧光强度、Ⅱ型胶原的灰度值与培养前比较降低不显著(P0.05),而椎间盘髓核Ⅱ型胶原的mRNA表达与与培养前比较差异显著(P0.05),两组间荧光强度、Ⅱ型胶原的灰度值及椎间盘髓核Ⅱ型胶原的mRNA表达对比差异均无统计学意义(P0.05)。经过14 d的培养,两组的荧光强度分别降低了18.6%与31.3%,与培养之前的荧光强度相比以及两组之间相比差异均具有统计学意义(P0.05);两组的Ⅱ型胶原的灰度值均有提升,与培养之前的Ⅱ型胶原的灰度值相比差异具有统计学意义(P0.01),两组间Ⅱ型胶原的灰度值经比较差异显著,具有统计学意义(P0.01);两组Ⅱ型胶原mRNA的表达比培养前以及培养7 d时明显下降(P0.05),两组之间比较差异显著具有统计学意义(P0.05)。结论降低软骨终板的通透性可以在短时间内(14 d)降低细胞活力和Ⅱ型胶原及其mRNA的表达,加速兔腰椎间盘的退变。 相似文献