EBV感染与SLE相关性的研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)是一种较常见的系统性自身免疫病,自然转归差,发病机制与遗传和环境因素有关.Epstein-Barr病毒(EBV)感染与SLE发病的相关性长久以来受到学者们的关注.近年在血清学、病毒基因组学、实验动物及流行病学等方面,均有研究证明EBV可能通过分子模拟机制导致易感群体发病.文章就EBV感染与SLE发病相关机制的研究进展进行综述.     

白细胞介素6对体外培养人脐动脉平滑肌细胞成骨样转化、钙化的影响

目的 研究白细胞介素6（IL-6）对体外培养人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）成骨样转化、钙化的作用及可能的信号通路。 方法 组织植块法原代培养HUASMC。培养基加入不同浓度重组人IL-6（rhIL-6）孵育细胞,设空白对照组。茜素红S钙沉积染色及甲氧-酚酞络合酮法检测细胞层钙盐含量。实时定量PCR、荧光定量法以及Western印迹法分别检测骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、骨桥蛋白（OPN）、骨形成蛋白2（BMP２）和骨保护素（OPG）基因以及蛋白表达。凝胶迁移滞后实验（EMSA）检测核心结合因子α1亚基（Cbfα1）的结合活力,以及分别应用p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂SB203580和蛋白激酶C二氢神经鞘氨醇（DHC）后Cbfα1的结合活力。 结果 rhIL-6 50 μg/L诱导12 d,细胞基质层茜素红S染色阳性。与对照组相比,细胞层钙盐含量在rhIL-6 10 μg/L组刺激9 d[（0.76±0.02） mmol/g蛋白]和12 d[（1.54±0.11） mmol/g蛋白]升高,50 μg/L组刺激6 d[（1.81±0.03） mmol/g蛋白]、9 d[（2.08±0.10） mmol/g蛋白]和12 d[（3.22±0.18） mmol/g蛋白]升高,并呈时间、剂量依赖地增加。rhIL-6 10 μg/L刺激12 h,BMP2 mRNA（3.04±0.07）和蛋白（8.14±0.41）及BAP mRNA（2.51±0.11）和蛋白（3.96±0.54）表达上调;刺激72 h,OPN mRNA（3.14±0.32）和蛋白（2.57±0.43）水平及OPG mRNA（4.06±0.24）和蛋白（3.46±0.34）水平上调。rhIL-6刺激6 h,Cbfα1结合活力增加;DHC能够部分抑制rhIL-6诱导的Cbfα1结合活力增加,SB203580没有明显作用。 结论 IL-6体外能够诱导HUASMC发生钙化和成骨样转分化,这可能是临床观察到IL-6与血管钙化相关的机制之一。IL-6的这一作用可能与细胞内蛋白激酶C通路的活化有关。     

慢粒慢性期皮肤浸润1例报告

慢性粒细胞性白血病急变期皮肤浸润较多见,但发生在慢性期者极少见。现将本院收治1例患者报告如下:魏××,男,69岁,住院号245727。因消瘦1年,伴下肢水肿1周于1994,7,28入院。查体:老年男性,一般状况可。全身浅表淋巴结未触及肿大。心、肺无明显异常。肝大,右肋下8cm。质韧,边缘锐,表面光滑,无触痛。脾大,Ⅰ线17cm,Ⅱ线22cm,Ⅲ线7cm,质硬,边缘锐,表面光滑,无触痛。双下肢中度凹陷性水肿,左足为重。实验室检查:血常规:     

骨形态蛋白2 siRNA靶向抑制对体外培养人脐动脉平滑肌细胞成骨样分化及钙化的影响

目的研究骨形态蛋白2（BMP2）小分子干扰RNA（siRNA）靶向抑制对人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）由白介素6（IL-6）诱导刺激的成骨样分化和细胞层钙化的影响。方法以体外培养的原代HUASMC作为实验对象。建立RNA干扰（RNAi）实验平台,通过FAM标记阴性对照siRNA优化转染条件;将BMP2基因的4条候选siRNA分别转染原代HUASMC,Real-TimePCR检测BMP2mRNA表达,筛选有效抑制siRNA。将复苏的原代HUASMC分为siRNA转染组（转染有效抑制siRNA）和模拟转染组（对照组,不转染siRNA）,两组均加入重组人IL-6（rhIL-6）（10ng/mL）刺激孵育,Real-TimePCR检测刺激孵育12、48h时点成骨样转化相关基因BMP2、骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、骨钙素（OC）和骨桥蛋白（OPN）mRNA表达。将复苏的原代HUASMC分为siRNA转染组、对照组和空白组（不予rhIL-6刺激孵育,其余处理与对照组相同）,siRNA转染组和对照组均加入rhIL-6（50ng/mL）刺激孵育,甲氧-酚酞络合酮法检测rhIL-6刺激孵育前及孵育后2、4d时点各组HUASMC细胞层钙盐含量,以总蛋白含量校正。结果成功建立合适的RNAi实验平台。10ng/mLrhIL-6刺激孵育后12h时点,siRNA转染组HUASMC BMP2和BAPmRNA表达明显低于对照组（P〈0.05）;刺激孵育后48h时点,siRNA转染组OC和OPNmRNA表达显著低于对照组（P〈0.05）。加入50ng/mLrhIL-6刺激孵育前,siRNA转染组、对照组和空白组HUASMC细胞层钙盐含量比较差异无统计学意义（P〉0.05）;在siRNA转染组,50ng/mLrhIL-6刺激孵育后2、4d时点的细胞层钙盐含量均明显低于对照组（P〈0.05）,刺激孵育后2d时点的细胞层钙盐含量明显高于空白组（P〈0.05）。结论体外培养的原代HUASMC能够实现BMP2基因的siRNA靶向抑制,能显著抑制由IL-6诱导刺激的成骨样分化和钙化。     

过表达EB病毒潜伏期膜蛋白1(LMP1)的人B淋巴细胞株的建立

目的构建EB病毒潜伏期膜蛋白1(LMP1)基因的真核表达载体,通过电穿孔法转染人B淋巴瘤细胞株Ramos细胞,建立稳定的LMP1表达细胞株。方法扩增带有EcoRⅠ与BamHⅠ酶切位点的LMP1编码基因,克隆至pcDNA3.1-EF1a-mcs-3FLAG-CMV-EGFP真核表达载体,挑取阳性单克隆感受态细胞行PCR以及测序后将重组质粒通过电穿孔法转染Ramos细胞, G418筛选稳定表达LMP1的细胞株, PCR和Western blot法分别检测LMP1 mRNA和蛋白在Ramos细胞中的表达。结果 PCR与测序证实成功构建了LMP1重组质粒,建立了稳定转染的Ramos细胞,且LMP1蛋白可在细胞中成功表达。结论成功建立了稳定表达LMP1的Ramos细胞。     

糖尿病性包皮龟头炎47例报告

１９９８年１月～１９９８年１１月,我院泌尿外科门诊从以包皮龟头炎为首诊疾病的患者中发现４７例糖尿病患者,经有效控制血糖后,包皮龟头炎得以治愈。现报告如下。临床资料：４７例均为中老年患者,平均年龄４８±７４岁,病程为０５～１５个月。所有患者均有包皮过长,２例为包茎,以往均无包皮龟头炎史或短期患龟头炎而迅速治愈。此次发病后虽经治疗但疗效不明显,病情迁延。本组患者均无明显的多饮、多食、多尿及消瘦之表现,也无白内障、阳痿等其他糖尿病并发症。查体见包皮过长,并呈慢性水肿状,较僵硬、略红,有不同程度细…     

线粒体基因突变糖尿病:一个新突变点的检测和确认

近年来,研究证实线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）缺陷是糖尿病（ＤＭ）发病原因之一。ｍｔＤＮＡ点突变和重排引起的糖尿病家系均见报道。本研究从研究对象的骨骼肌中提取总ｍｔ基因组,在有ＤＭ和（或）神经肌肉疾病母系遗传史的家系中进行筛查,发现一携带新突变的家系。该家系成员多人患有小脑性共济失调、白内障和ＤＭ。先证者是一名６１岁的妇女,患白内障、耳聋、小脑性共济失调和ＤＭ,体重指数（ＢＭＩ）为１８。其女３０岁,患耳聋和白内障,口服葡萄糖耐量实验（ＯＧＴＴ）显示有葡萄糖耐量减弱（ＩＧＴ）,胰岛素（ＩＮＳ）早期分泌…     

维生素D在类风湿性关节炎治疗中的作用

类风湿性关节炎(RA)是一种以滑膜关节慢性炎症为主要临床表现的系统性疾病，T细胞以及某些细胞因子在RA的发病中起重要作用。近年来研究发现维生素D不仅参与钙、磷代谢，改善RA的局部乃至全身的骨质疏松，而且还具有明显的免疫调节作用。它可以抑制自身反应性T细胞的增殖和活化；抑制T细胞分泌白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ     

HLA—DQ与1型糖尿病相关的分子生物学机制

人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＱＢ１基因是１型糖尿病的主要遗传易感位点。在Ｔ细胞发育成熟、自身反应Ｔ细胞株增殖、活化和免疫调节过程中，ＤＱ分子结构特征构成了自身免疫激活的重要分子基础。有关ＤＱ分子结构异常与１型糖尿病（ＤＭ１）相关性的研究为深入揭示ＤＭ１的遗传免疫机制以及建立新的干扰措施提供了新的思路。     

HLA-DQ与1型糖尿病相关的分子生物学机制

人类白细胞抗原 (HLA) DQB1基因是 1型糖尿病的主要遗传易感位点。在T细胞发育成熟、自身反应T细胞株增殖、活化和免疫调节过程中 ,DQ分子结构特征构成了自身免疫反应激活的重要分子基础。有关DQ分子结构异常与 1型糖尿病 (DM1 )相关性的研究为深入揭示DM1的遗传免疫机制以及建立新的干预措施提供了新的思路。