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目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测乙型肝炎(简称乙肝)患者外周血单个核细胞(PBMC)中颗粒溶素(GNLY)mRNA的表达,探讨GNLY基因表达水平与急性乙肝的关系。方法实时荧光定量RT-PCR分别检测40例急性乙肝患者及100名正常对照的PBMC的GNLY基因表达水平,同时检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。结果急性乙肝患者发病期mRNA表达显著高于正常对照组(P〈0.01),恢复期GNLY基因表达与正常对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。乙肝患者GNLYmRNA与血清ALT、AST呈正相关。结论实时荧光定量RT-PCR检测GNLY mRNA的表达准确可靠。患者外周血GNLY基因表达水平与急性乙肝的发生发展存在一定的相关性。 相似文献
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目的: 进化筛选与B淋巴细胞活化因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)特异结合的单链DNA适体,鉴定其结合力。方法:应用指数方式富集的配体系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment, SELEX)技术,将随机序列寡核 相似文献
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目的 利用重组抗原BCOADA-E2和PDC-E2的二联体(BP),检测PBC患者血清中的M2抗体并探讨其临床意义。方法 经Ni—NTA亲和柱纯化重组表达的BP融合蛋白,分别建立免疫印迹法(IBT)和酶链免疫吸附(ELISA)法检测60份PBC患者血清,以60份其他肝病患者、60份自身免疫病患者、80例正常人血清为对照组。结果 经常规试剂盒检测为M2(+)的60份患者血清,利用重组抗原检测阳性53例,阴性7例,阳性率为88.3%;经常规试剂盒检测为M2(-)的60份自身免疫病患者血清、60份其他肝病患者和80例正常人血清,利用重组抗原检测为M2(-)。结论 利用重组抗原BP检测M2抗体敏感性较高。对临床辅助诊断PBC提供一定的手段。 相似文献
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钱 《中华检验医学杂志》2007,30(4):395-398
目的研究颗粒溶素(granulysin,GNLY)、颗粒酶B(granzymeB,GrB)及穿孔素(perforin,PF)三种免疫效应分子在原发性胆汁性肝硬化(primarybiliarycirrhosis,PBC)外周血中的表达并探讨其与PBC的关系。方法以正常健康人和肝炎后肝硬化患者为对照,用实时荧光定量RT—PCR方法检测PBC患者PBMC中GNLY、GrB及PFmRNA的含量。用ELISA方法检测PBC患者血清中GNLY表达情况并分析其与肝功能的相关性。结果PBC组GNLY、GrBmRNA平均拷贝数显著高于健康对照组(P〈0.01)和疾病对照肝炎后肝硬化组(P〈0.001),而PFmRNA与对照组相比差异无统计学意义。PBC患者血清中的GNLY蛋白表达显著高于健康对照组(P〈0.01)和乙型肝炎后肝硬化组(P〈0.01)。血清中GNLY浓度与血清GGT、AIJP的浓度呈正相关(P〈0.01)。结论PBC患者GNLY、GrBmRNA和含量显著高于对照组,同时ELISA方法检测出PBC患者血清中GNLY蛋白含量显著高于对照组,GNLY、GrB表达与PBC的发病存在一定的关联性,为临床PBC病情的监控提供可靠依据。 相似文献
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目的研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定TRAIL及其受体DeR1、DcR2、DR4、DR5 mRNA含量的方法,探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值,并分析隐球菌性脑膜炎患者细胞因子与TRAIL及其受体的相关性。方法设计特异性的引物和探针,以人基因GAPDH为内参照,用实时定量PCR的方法检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL及其受体mRNA的表达水平,采用ELISA方法检测血清IL-4、IL-10、TNF-α、IFN-γ浓度。结果与健康人比较,隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL mRNA的表达明显下降(P〈0.01);受体DeR1 mRNA的表达显著升高(P〈0.01),受体DeR2、DR4、DR5 mRNA的变化无统计学意义。隐脑患者血清中IL-10显著升高(P〈0.01),与TRAIL的变化成负相关;IFN-γ显著下降(P〈0.01),与TRAIL的变化成正相关。结论隐球菌性脑膜炎患者TRAIL下降及其受体DeR1mRNA的表达明显升高,提示TRAIL及其受体DeR1可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索。 相似文献
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目的:分析不合理用药的前瞻性干预与提高合理用药水平的相关性,为药物的合理应用提供建议。方法:选取呼吸内科医生为干预对象,采用制定规章制度、抽查医嘱、加强宣教等干预措施,分别对干预前后的不合理用药情况、抗菌药物使用情况、药师意见采纳情况等方面进行统计分析,了解前瞻性干预对药物合理应用的影响。结果:经前瞻性干预后,呼吸内科的不合理用药率、抗菌药物使用率、药师意见采纳率分别为18.82%、64.17%、86.29%与干预前比较,各项指标差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:加强不合理用药的前瞻性干预可以有效提高我院药物的合理应用水平,体现药师的价值,促进医生和药师的合作。 相似文献
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microRNA在肺癌诊断、治疗及预后判断中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
肺癌是全世界因肿瘤导致死亡的最主要原因。尽管肺癌发生的分子网络在蛋白和基因水平上已经部分得到阐明,但是其高死亡率仍没有明显改善。微小RNAs(miRNAs)是一大类小的内源性非编码RNAs,通过与靶mRNA3’端非翻译区部分互补配对,在翻译后水平调节靶基因的表达。miRNAs在肺脏的发育过程中发挥多种作用,其异常表达可能导致肺癌的发生。肺癌中miRNAs的异常表达模式,以及miRNAs在血清中的稳定存在,都使miRNAs有望成为新型的临床生物标记物用于肺癌的诊断和预后。miRNAs还可以直接作为原癌基因或抑癌基因在肺癌发生和发展过程中起重要作用,调节具有致癌或抑癌功能的miRNAs可能成为肺癌治疗的新方法。该文就miRNAs在肺癌诊断、预后和治疗中的作用进行综述。 相似文献
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冠心病发病率高、危险性大,被称为目前人类的第一杀手.心脏负荷试验可以通过增加心肌负荷,评价冠心病的缺血程度,对冠心病诊断、治疗及预后判断有重要的指导意义,是评价缺血性心脏病患者的诊断和预后的一种重要方法[1].心电图运动试验是心脏负荷试验的初始形式,它通过运动给心脏以负荷,增加心肌耗氧量,诱发心肌缺血,从而出现缺血性心电图改变,辅助临床对心肌缺血做出诊断.目前采用最多的是运动平板试验(TET).虽然目前诊断冠心病的主要依据是冠状动脉造影(CAG),但心电图运动试验以其无创、价格低廉、操作简单、危险性低等优点被广泛应用于临床实践,而且应用越来越广泛[2]. 相似文献
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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立检测人颗粒溶素(granulysin,GNLY)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC,primarybiliary cirrhosis)发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量。结果PBC患者GNLY mRNA的表达范围为5.35×107-4.61×109拷贝/μg RNA;健康对照者为9.28×105-7.32×107拷贝/μg RNA。PBC组GNLY mRNA的平均拷贝数显著高于健康对照组(P<0.01)和疾病对照乙型肝炎肝硬化组(P<0.001)。结论成功建立了人GNLY基因表达含量的荧光定量检测方法,PBC患者GNLY mRNA的含量显著高于健康对照组,GNLY表达与PBC的发生发展存在一定的关联性。 相似文献