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淋巴细胞经TCR-CD3活化增殖作用的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本文探讨了抗CD3单抗诱导的淋巴细胞活化增殖及有关影响因素。实验结果表明:①淋巴细胞内钙升高是淋巴细胞活化增殖的重要条件,CD3McAb引起的早期胞浆游离钙迅速升高主要由内质网释放钙离子所致,而淋巴细胞增殖不仅需要细胞内钙释放,还需要细胞外钙内流;②GTP结合蛋白是淋巴细胞激活过程的一重要环节,经G蛋白作用物霍乱毒素作用后,淋巴细胞DNA合成显著降低;③新霉素和PSS可抑制PLC和PkC的活性,对淋巴细胞NDA合成造成剂量依赖性抑制作用。此外,抗CD3McAb诱导的淋巴细胞DNA合成需要辅佐细胞的存在,高度纯化的T细胞对CD3McAb的刺激不发生增殖反应。 相似文献
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8种国产HBsAg试剂盒检测变异HBsAg的效果评价 总被引:19,自引:2,他引:19
目的:评价国内8种HBsAg诊断试剂检测体外表达的18种变异HBsAg的效果。方法:用8种ELISA试剂检测真核细胞表达的18种变异HBsAg的免疫反应性。结果:8种试剂盒检测变异HBsAg的能力不同,漏检率为16.7%~44.4%。K122I、T123N、C124R和G145R变异的HBsAg漏检率最高。结论:8种HBsAg检测试剂盒都不能很好地检出部分变异HBsAg,应改进试剂性能,提高对变异HBsAg的检出率。 相似文献
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应用131Ⅰ-标记抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体对4例膀胱癌患者进行盆腔内淋巴结放射免疫显像。结果1例右侧髂内淋巴结为阳性显像,阳性率为25%,与术后淋巴结活检结果一致。同其它方法相比,此法除具有能显示髂内淋巴结等优点外,更重要的是对恶性淋巴结具有特异性定性、定位作用。 相似文献
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采用本室建立的可磁化固相二抗 (DAMP) 分离技术与常规应用的双抗体法,聚乙二醇(PEG)法、活性炭法对10种RIA药盒进行实验比较。结果显示DAMP法与双抗体法的五项质控指标均在RIA质控标准的最佳范围内,明显优于PEG法与活性炭法,表明DAMP法具有双抗体法的分离效果,且较双抗体法更为简便、快速,适合用作RIA的通用分离方法。 相似文献
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用胰岛素(INS)免疫豚鼠制得INS抗血清,通过氯胺T法碘化标记INS制备~(125)I-INS,结合本室研制的可磁化固相二抗分离试剂(DAMP),建立了血清INS可磁化固相放射免疫分析法(RIA)。本法灵敏度达0.1μU,回收率>95%,批内变异(CV)<2.3%,批间CV<7.4%。并具有不需离心,操作简便,分离迅速的特点。经临床初步应用,获得满意的结果。 相似文献
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目的了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对6种常用抗生素的耐药状况,探讨耐甲硝唑rdxA基因突变与耐药性的关系。方法分离培养76株Hp,以琼脂稀释法检测Hp对甲硝唑、替硝唑、四环素、克拉(红)霉素、阿莫西林、利福平的最小抑菌浓度(Mininum Inhibitory Concentration,MIC),再用PCR方法扩增甲硝唑耐药相关基因rdxA,DNA测序分析敏感株和耐药株耐药基因的序列与耐药性的关系。免疫印记(westem Blotting)分析耐药基因的表达与耐药性的关系。结果武汉地区人群Hp对甲硝唑、替硝唑、四环素、克拉(红)霉素、阿莫西林、利福平的耐药率分别为67.1%、43.4%、3.9%、11.8%、17.1%和10.5%;甲硝唑耐药基因序列分析表明rdxA基因有插入或点突变;Western Blot显示耐药株和敏感株的rdxA基因的表达有差异。结论幽门螺杆菌对6种抗生素有较高的耐药率,rdxA基因突变导致基因表达水平改变,导致Hp对甲硝唑耐药。 相似文献
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目的:了解乙型肝炎病毒(HBV)是否影响肝细胞对双链DNA(dsDNA)分子诱导产生的Ⅰ型干扰素应答。方法:以肝癌细胞HepG2以及整合有HBV基因的HepG2.2.15细胞为模型,转染dsDNA分子poly(dA-dT),实时定量RT-PCR检测IFN-β、干扰素应答基因IFIT1与炎症因子TNF-α的表达,Western blot检测NF-κB、IRF3的核转位以及pTBK1的表达。HBV复制型质粒HBV1.3转染HepG2、HBV siRNA转染HepG2.2.15后,实时定量RT-PCR检测细胞中IFIT1的表达。结果:poly(dA-dT)能够诱导HepG2细胞产生Ⅰ型干扰素,在转染后6小时,IFN-β与IFIT1表达达高峰,而后下降,TNF-α的表达与对照组相比没有明显变化。Poly(dA-dT)转染后6小时能检测到TBK1的磷酸化与IRF3的核转位,但NF-κB的核转位不明显。HepG2.2.15细胞在poly(dA-dT)转染后12小时能检测到TNF-α的一过性表达,而IFN-β与IFIT1的表达在72小时才达到高峰,与之对应的:在转染后6小时,没有检测到TBK1的磷酸化与IRF3的核转位。poly(dA-dT)与HBV1.3共转HepG2后,HBV的蛋白表达受到抑制,而将HBV siRNA转染HepG2.2.15后,细胞对poly(dA-dT)的应答明显增强。结论:HepG2与HepG2.2.15能够应对ds-DNA的刺激,通过NF-κB与IRF3信号通路产生Ⅰ型干扰素或炎症因子,但HBV的存在影响了肝细胞对dsDNA产生的固有免疫应答。 相似文献
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目的 构建和鉴定HAX1和EGFP双基因共表达重组腺病毒载体.方法 采用DNA重组技术,将目的 基因HAX1克隆至含有报告基因EGFP的穿梭质粒pAdTrack-CMV中,并转化于大肠埃希菌DH5α;筛选出重组质粒pAdTrack-CMV- HAX1,并在BJ5183细菌中与pAdEasy-1质粒进行同源重组,产生重组腺病毒载体;用lipofectamine将其转染HEK293细胞,包装携带全长HAX1的重组复制缺陷型腺病毒pAd-HAX1-EGFP,酶切和序列测定鉴定;用制备好的Ad-HAX1-EGFP感染HEK293细胞,流式细胞术检测其感染效率,RT-PCR、Western 印迹鉴定外源基因HAX1的表达.BrdU检测感染了Ad-HAX1-EGFP的HEK293细胞增殖情况.结果 pAdTrack-CMV-HAX1重组质粒构建成功.pAdTrack-CMV-HAX1 质粒与pAdEasy-1质粒同源重组后与预期结果相符.构建好的Ad-HAX1-EGFP能有效感染HEK293细胞;外源基因能在239细胞中有效表达.HAX1高表达的HEK293细胞其增殖率得以提高.结论 成功构建了表达HAX1和EGFP共表达的重组腺病毒载体,HAX1能够促进结肠癌细胞HEK293细胞的增殖. 相似文献
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